岳 穩(wěn) 傅光華 黃 瑜*
(1.福建省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所 福州 350013;2.龍巖學院 福建龍巖 364000)
鴨瘟(Duck plague,DP),又稱為鴨病毒性腸炎(Duck virual enteritis,DVE),是由鴨瘟病毒引起鴨、鵝及天鵝等雁形目禽類發(fā)生急性、熱性和敗血性傳染病[1-2]。鴨瘟可感染不同品種及不同日齡鴨,傳播迅速、流行廣泛,發(fā)病急、病死率高,是危害養(yǎng)鴨業(yè)的主要疫病之一。鴨瘟最早由Baudet等于1923年首次報道在荷蘭發(fā)生,我國最早是黃引賢在1959年報道廣州出現(xiàn)首例鴨瘟病例[3]。福建省于1998年出現(xiàn)櫻桃谷肉鴨感染鴨瘟病例,此后至2015年這17年間均未見鴨瘟報道,然而2016年初開始,福建省部分地區(qū)肉鴨陸續(xù)出現(xiàn)疑似鴨瘟的病例[4-5]。該文就一起福建省連城縣某鴨場飼養(yǎng)的麻鴨感染鴨瘟的診斷詳細報道如下,以期為同行提供參考和借鑒。
2019年12月初,福建省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所接診一起來自福建省連城縣的160日齡麻鴨病例。據(jù)主訴,11月25日有部分鴨只出現(xiàn)精神沉郁、食欲減退,3 d后有的鴨只頭部腫大、急性死亡,2 d內每天死亡200多羽,病死率20%。
剖檢送檢的病死鴨,可見食道黏膜覆蓋大量假膜,散布大小不等的潰瘍出血帶;肝臟出血、胰腺出血,腦膜充血;腸道黏膜出血,泄殖腔出血。其余組織均無明顯眼觀病變。
3.1 臨床樣品處理 無菌采集病死鴨肝臟、脾臟組織,一部分用于細菌分離培養(yǎng);另一部分加入含抗生素(青霉素1 000 U/mL、鏈霉素1 000 ug/mL)的PBS緩沖液研磨勻漿,制成20%混懸液。
3.2 細菌分離培養(yǎng) 將采集的病死鴨肝臟、脾臟組織樣品,分別取樣劃線接種血瓊脂平板進行細菌分離培養(yǎng),并觀察2 d。結果未見細菌生長。
3.3 樣品 (RT-)PCR檢測 以病毒DNA/RNA抽提試劑盒,按產品說明書提取樣品中的核酸,分別進行禽流感病毒、鴨坦布蘇病毒、禽1型副粘病毒、鴨瘟病毒和鴨圓環(huán)病毒等檢測。PCR擴增產物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠進行電泳。結果,僅鴨瘟病毒呈陽性,其余病毒均呈陰性。擴增片段送生物試劑公司進行測序,測序結果表明獲得的擴增片段序列與GenBank數(shù)據(jù)庫中的鴨瘟病毒序列同源性為99.6%以上。
圖1 樣品PCR產物電泳圖
3.4 病毒分離鑒定 將制備的肝脾組織混懸液離心取上清,經(jīng)尿囊腔接種5枚11日齡鴨胚,每枚接種0.2 mL。之后于37℃恒溫培養(yǎng),連續(xù)觀察7 d。無菌收集致死鴨胚尿囊液,對所收集尿囊液測定血凝活性并再次進行以上病毒檢測。結果顯示收集的死亡鴨胚尿囊液毒不凝集SPF雞紅細胞,經(jīng)PCR檢測結果顯示分離病毒僅呈鴨瘟病毒陽性,其余病原均為陰性。
根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢病變及實驗室檢測結果,確診該麻鴨群感染鴨瘟。
5.1 緊急分類和消毒 對發(fā)生鴨瘟的該群麻鴨及其鴨舍、場地等進行緊急消毒,每天1次、連續(xù)3 d;從發(fā)病鴨群中挑出患鴨并淘汰,與死亡鴨一同進行無害化處理。
5.2 緊急接種疫苗 對發(fā)生鴨瘟的該群麻鴨每羽緊急注射3倍量的鴨瘟活疫苗,并在飲水中適當添加維生素C和葡萄糖,連飲3~4 d。
由于確診快、處理快,該批發(fā)病麻鴨群于緊急注射鴨瘟疫苗后4 d起病死鴨數(shù)量明顯減少,于第7 d未見病死鴨,較好控制了疫情。
1)該群發(fā)病麻鴨于緊急注射鴨瘟活疫苗后4 d起病死鴨數(shù)量明顯減少,于第7 d未見病死鴨,疫情得到較好控制,表明緊急注射鴨瘟活疫苗對控制鴨瘟疫情有效,也表明當前養(yǎng)鴨生產中可用現(xiàn)有的鴨瘟活疫苗進行免疫預防鴨瘟和發(fā)生鴨瘟時的緊急接種,鴨瘟病毒還未出現(xiàn)變異。
2)從全國情況看,雖然鴨瘟不呈大面積暴發(fā),但仍有零星發(fā)生。因此,養(yǎng)鴨企業(yè)(戶)平時養(yǎng)殖中應加以防范,加強飼養(yǎng)管理,搞好環(huán)境衛(wèi)生;同時,定期對鴨群做好鴨瘟疫苗的免疫;引進種苗、種蛋或種鴨時均應來自安全地區(qū)。
3)鴨瘟可感染不同品種、不同年齡的鴨,但發(fā)病率和病死率存在一定差異,雛鴨發(fā)病率低于成年鴨,以往研究也表明雛鴨在20日齡內極少發(fā)生該病,但近年來發(fā)現(xiàn)鴨瘟最早可在7日齡內發(fā)病,呈現(xiàn)一種低齡化的趨勢[6-7]。