白耀輝，張優(yōu)良，岑名迅，陳文杰，賴銳豪，丁 姣

(1 珠海安和生化科技有限公司，廣東 珠海 519040；2 仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院，廣東 廣州 510225)

隨著科技的高速發(fā)展，人們的觀念發(fā)生了巨大的變化，抗衰老化妝品在中國有著悠久的歷史，早在唐朝就有武則天為了保持青春靚麗而用珍珠粉等敷面，以達(dá)到延緩皮膚衰老的目的[1]。如今，人口老齡化越來越嚴(yán)重，促使了抗衰老化妝品的飛速發(fā)展?？顾ダ匣瘖y品主要是在化妝品中添加抗衰老的功能性物質(zhì)，以達(dá)到抗衰老的目的，目前，在化妝品中添加的主要是有生物活性的多肽類，如乙?；?8，棕櫚酰三肽-1，肌肽[2]等。

多肽是肽類中的一部分，是構(gòu)成生命的重要物質(zhì)[3]?？茖W(xué)研究表明．活性生物多肽的形成，實(shí)際上是由20余種天然氨基酸通過肽鏈以不同的排列方式和形態(tài)構(gòu)成。由于一些多肽具有美白，美容，抗衰老，祛疤痕，祛痘[4]等功能，在化妝品方面上越來越受到重視，在化妝品中添加生物活性多肽，以達(dá)到美白，抗衰老[5]的目的，在化妝品中應(yīng)用越來越廣泛，如抗衰老的面部原乳，抗衰老的面膜等[6-7]。

在抗衰老多肽的作用中，不同的多肽作用機(jī)理不同，有些多肽是神經(jīng)遞質(zhì)抑制類，有些是信號類，還有是抗氧化類的，它們的作用機(jī)理不同，如果將不同的多肽復(fù)配起來，如信號類的多肽與神經(jīng)遞質(zhì)抑制類的多肽復(fù)配，這樣多種機(jī)理同時(shí)進(jìn)行，互補(bǔ)互助，以達(dá)到更好的效果[8]。

本研究選用乙?；?8、棕櫚酰三肽-1和肌肽作為添加劑，制備單多肽面部乳液和復(fù)配多肽面部乳液，探究不同多肽或復(fù)配多肽添加劑對面部乳液的理化性質(zhì)、感官性質(zhì)及抗衰老性質(zhì)的影響。

1 實(shí) 驗(yàn)

1.1 儀器與試劑

1.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器

電子天平；干燥箱/培養(yǎng)箱；電動離心機(jī)；旋轉(zhuǎn)式粘度計(jì)；霉菌培養(yǎng)箱；高速分散均質(zhì)機(jī)；電熱恒溫水浴鍋；pH儀。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑

1%卡波姆；山梨坦硬脂酸酯/蔗糖椰油酸脂；出芽短梗酶多糖；霍霍巴蠟 PEG-120 酯類；丙二醇；氨基酸保濕劑；月桂氮卓酮//PEG-40/氫化蓖麻油；三乙醇胺；β-葡聚糖；1%透明質(zhì)酸鈉；1%聚谷氨酸鈉；聚季銨鹽-51；二肽二氨基丁酰芐基酰胺二乙酸鹽；丙烯酸鈉/丙烯酰二甲基牛磺酸鈉共聚物；杰馬BP；苯氧乙醇；乙酰基六肽-8；棕櫚酰三肽-1；肌肽。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 面部乳液配方

表1 面部乳液的配方Table 1 The formula of facial lotion

1.2.2 面部乳液的制備

以200 g為乳液總量，按表1中稱量山梨坦硬脂酸酯(和)蔗糖椰油酸脂，出芽短梗酶多糖，丙二醇于250 mL的燒杯中，用玻璃棒攪拌均勻，再加入110.5 g的水，用玻璃棒攪拌均勻，用電熱恒溫水浴鍋加熱至90 ℃，后按表中加入A組的其他原料，用攪拌機(jī)以800 r/min轉(zhuǎn)速攪拌至固體全部溶解，待固體溶解后以400 r/min的轉(zhuǎn)速攪拌降溫至45 ℃待用。取另一250 mL燒杯準(zhǔn)確稱量B組和C組的原料于燒杯中，用玻璃棒攪拌均勻。待A組原料溶液降溫到45 ℃，A、B、C三組溶液混合，用均質(zhì)機(jī)以3500 r/min轉(zhuǎn)速均質(zhì)三分鐘，均質(zhì)完成后再用攪拌機(jī)以400 r/min轉(zhuǎn)速攪拌，并降溫至室溫。

1.2.3 單功能多肽乳液的制備

按照200 g面部乳液的6%添加功能性多肽。其中，分別選取乙?；?8、棕櫚酰三肽-1和肌肽等三種功能性多肽，制備A、B、C號多肽乳液。

表2 單功能性多肽乳液中多肽種類和添加量Table 2 The types and additions of peptides in monofunctional polypeptide emulsions

1.2.4 復(fù)配多肽乳液的制備

按照1:1或1:1:1復(fù)配功能性多肽，并按照200 g面部乳液的6%添加復(fù)配功能性多肽，制備復(fù)配多肽乳液。分別對樣品標(biāo)志為樣品E、F、G、H，具體復(fù)配方式如表3所示。

表3 復(fù)配多肽乳液中多肽復(fù)配類型和添加量Table 3 The types and additions of polypeptides in polypeptides emulsion

1.2.5 表征與測試

(1)乳液理化性質(zhì)測定

根據(jù)GB/T13531.1-2008中的稀釋法測量乳液的pH值；采用旋轉(zhuǎn)式粘度計(jì)測量乳液的粘度；采用電動離心機(jī)，在2000～5000 r/min下離心30 min，觀察離心后乳液是否發(fā)生油水分離現(xiàn)象，測量樣品乳液的離心穩(wěn)定性；采用高低溫試驗(yàn)箱對乳液樣品的熱寒循環(huán)穩(wěn)定性進(jìn)行測定，程序變溫方式為：先40 ℃下恒溫24 h，然后-15 ℃恒溫24 h，變溫速率為10 ℃/min，如此循環(huán)7次，觀察乳液油水分層現(xiàn)象變化。

根據(jù)化妝品安全技術(shù)規(guī)范(2015年版)國家微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)對乳液樣品進(jìn)行微生物檢驗(yàn)。稱取10 g乳液樣品，加入裝有玻璃珠和90 mL滅菌生理鹽水的三角瓶里，充分振蕩均勻，靜置15 min后，加入樣品上清液作為1:10的檢液。

(2)乳液的感官性質(zhì)測定

試樣乳液基本的感官性質(zhì)主要測試試樣的鋪展性，保濕性，光澤度，細(xì)膩性，黏滯感，清爽度，白皙度七個(gè)方面，具體感官測定方法如下：

①選取手臂干凈，皮膚健康，無化妝品過敏反應(yīng)20～23歲的志愿者87名，男生45名，女生42名。

②以雙手前臂內(nèi)側(cè)為實(shí)驗(yàn)區(qū)，選取4 cm×4 cm的實(shí)驗(yàn)區(qū)域，并進(jìn)行標(biāo)記，每個(gè)標(biāo)記區(qū)域?qū)⒅殖伤姆莸让娣e區(qū)域，雙手總共有八份等面積區(qū)域。

③進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前需將手臂清洗干凈，并用75%的乙醇溶液消毒清洗手臂內(nèi)側(cè)，3 min過后將八個(gè)試樣固定份量分別涂抹在八個(gè)區(qū)域，輕輕涂抹15圈后進(jìn)行評估打分。

④隨后志愿者將每天按照上面1到3的步驟重復(fù)一遍，實(shí)驗(yàn)周期為一個(gè)月，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)手臂不能涂抹其他的任何化妝品，并將每次的表格收齊，最后統(tǒng)計(jì)平均值。本次實(shí)驗(yàn)采用的是十分制，8～10表示感覺很好，6～8分表示感覺良好，6分以下表示感覺一般或者不好。

(3)抗衰老效果評價(jià)

采用對比法對乳液樣品的抗衰老效果進(jìn)行測定，選取40名年齡在20～30歲的女性志愿者，她們擁有眼角紋，并大致相同，皮膚性質(zhì)，皺紋程度，相差不大。將這些志愿者隨機(jī)分成八組對應(yīng)八個(gè)樣品，分別為A組、B組、C組、D組、E組、F組、G組、H組，使用對應(yīng)編號的樣品。每組志愿者使用同一個(gè)樣品。這些志愿者皮膚對化妝品不過敏，在實(shí)驗(yàn)期間禁止用其他化妝品。志愿者們每天早上八點(diǎn)與晚上九點(diǎn)，將眼角紋處擦洗干凈，在室內(nèi)晾干十五分鐘，每次取固定的試樣，輕輕涂抹在眼角紋處，再用指腹輕輕的按摩15圈，使試樣更好的被皮膚吸。實(shí)驗(yàn)周期為三個(gè)月，三個(gè)月后觀察志愿者的眼角紋減輕程度。

2 結(jié)果與討論

2.1 乳液理化性質(zhì)測定

2.1.1 pH值

在乳液基本性質(zhì)的測定中，按照GB/T29665-2013對護(hù)膚乳液理化性質(zhì)的測定方法測定，看是否符合GB/T29665-2013對護(hù)膚乳液理化性質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)要求。A試樣pH的測定結(jié)果如表4所示。由表4可以看出，實(shí)驗(yàn)中制備的試樣pH的范圍在6.5～7.0之間，pH相對變化較小，符合GB/T29665-2013對護(hù)膚乳液的要求。

2.1.2 粘 度

由表4可以看出試樣乳液的粘度范圍大致是7000～8000，粘度范圍相對較小，各試樣的粘度相差不大。

表4 樣品乳液的pH值和粘度Table 4 The pH and viscosity of sample emulsion

2.1.3 微觀形態(tài)

圖1是各試樣在400倍下的顯微鏡圖像，由上面各圖中可以看出試樣乳液形狀均勻，大都成圓球狀或者橢圓狀，粒徑大小約為0.1～10 μm，故其結(jié)構(gòu)細(xì)膩，使用膚感較好。

2.1.4 離心穩(wěn)定性

圖1 樣品乳液的微觀形態(tài)Fig.1 Micromorphology of sample emulsion

在離心穩(wěn)定性的測定中，試樣乳液都達(dá)到了GB/T29665-2013對護(hù)膚乳液的標(biāo)準(zhǔn)要求，由此可以知道試樣乳液的穩(wěn)定性較好。添加功能肽并不影響乳液樣品的離心穩(wěn)定性。

表5 樣品乳液的離心穩(wěn)定性Table 5 The centrifugal stability of sample emulsion

2.1.5 寒熱循環(huán)穩(wěn)定性

在耐寒耐熱的測定中，試樣乳液都達(dá)到了GB/T29665-2013對護(hù)膚乳液的標(biāo)準(zhǔn)要求，由此可以知道試樣乳液的穩(wěn)定性較好。添加功能肽并不影響乳液樣品的寒熱循環(huán)穩(wěn)定性。

表6 樣品乳液的寒熱穩(wěn)定性Table 6 The cold and thermal stability of sample emulsion

2.1.6 微生物檢驗(yàn)

圖2 樣品乳液的微生物檢測Fig.2 The microbial detection of sample emulsion

圖2是樣品微生物細(xì)菌及霉菌的檢驗(yàn)，由圖中的照片可以看出樣品中幾乎沒有生長細(xì)菌與霉菌的菌落，由此可知樣品乳液的防腐性好，乳液的穩(wěn)定性好。

2.2 乳液的感官性質(zhì)測定

因?yàn)樵嚇尤橐褐谱鬟^程中未添加任何香料，所以不對香氣指標(biāo)等進(jìn)行測試。在人體皮膚評價(jià)中，取每次評價(jià)的分值最后計(jì)算出平均值，試樣乳液基本的感官性質(zhì)評價(jià)的結(jié)果如表7所示。由表7可以看出，八個(gè)樣品的各個(gè)感官性質(zhì)評分都達(dá)到了良好以上，可知試樣乳液的給人的感官好，其中八個(gè)樣品中細(xì)膩性評價(jià)分值最高，可知試樣乳液的細(xì)膩性較好。

表7 樣品乳液的感官性質(zhì)Table 7 The sensory properties of sample emulsion

2.3 抗衰老效果評價(jià)

2.3.1 單功能多肽乳液

抗衰老功效評價(jià)過程中，通過對比志愿者眼角紋皺紋程度的減輕狀況和觀察皮膚改善狀況來得出結(jié)論，在連續(xù)三個(gè)月的觀察對比中，使用樣品A的志愿者眼角紋沒有得到明顯的改變，或者沒有變化，而使用B組、C組和D組志愿者的眼角紋皺紋程度稍微減輕，皮膚的衰老程度得到了一定的改善。因此可以得出下面的結(jié)論。(1)普通乳液不具有祛皺抗衰老的能力；(2)使用添加抗衰老功效性多肽的乳液，其減輕皮膚的皺紋與抗衰老的能力明顯比空白組的能力強(qiáng)，這也證明了抗衰老多肽在皮膚抗衰老過程中的具有的重大作用。

2.3.2 復(fù)配多肽乳液

經(jīng)過連續(xù)三個(gè)月的使用，對比志愿者使用前后的眼角紋減輕程度，從連續(xù)觀察對比中可以看出使用試樣添加多肽乳液復(fù)配的志愿者的皺紋得到明顯的改善，眼角紋有很大的減輕效果。對比添加單方功效性多肽乳液的B、C、D組的效果，E、F、G、H組的復(fù)配多肽乳液的能有效減輕志愿者的皺紋。因此可以得出下面兩個(gè)結(jié)論。(1)使用添加功效性多肽復(fù)配的抗衰老效果比添加單方功效性多肽好；(2)不同作用機(jī)理的多肽，可以通過復(fù)配，協(xié)調(diào)各種機(jī)理同時(shí)進(jìn)行，達(dá)到更理想的效果。

3 結(jié) 論

探究不同多肽在乳液中抗衰老的效果極其復(fù)配的效果。三種不同的功效性多肽，作用機(jī)理也不同，但是最后三種多肽復(fù)配的達(dá)到的效果最好，說明不同作用機(jī)理的多肽可以互補(bǔ)，共同作用。所制備的試樣的基本理化性質(zhì)和感官性質(zhì)，都達(dá)到了GB/T29665-2013對護(hù)膚乳液理化性質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)要求。添加功效性多肽乳液具有更好的抗衰老能力，且復(fù)配多肽乳液的抗衰老效果明顯優(yōu)于單多肽乳液。