謝道燕，楊繼芬，楊振國，柴建萍，范永慧，江秀均，蘇振國

（云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所，云南蒙自661101）

家蠶原種是生產(chǎn)1 代雜交種的生產(chǎn)資料，其品種性狀的優(yōu)劣，直接影響到蠶種場、蠶農(nóng)、繅絲廠3 方的經(jīng)濟(jì)效益，關(guān)系到蠶絲產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展[1]。桑葉作為家蠶的重要食料，桑園及其周邊農(nóng)田用藥，都有可能通過不同途徑直接或間接污染桑葉，造成家蠶農(nóng)藥中毒[2～4]，這已成為目前制約蠶桑業(yè)發(fā)展的主要瓶頸之一。家蠶農(nóng)藥中毒有多種表現(xiàn)形式，如急性中毒死亡，慢性中毒，延長生長期，體質(zhì)量減輕，蟲體開始收縮變小，不能吐絲結(jié)繭，大部分家蠶在吐絲過程中死于簇中，有些家蠶雖能正常結(jié)繭，但不能化蛹，即使能化蛹，但蛹體變小，有些甚至不能發(fā)育為成蟲或成蟲發(fā)育不全，或在羽化前后死亡[5～6]?；瘜W(xué)防治仍是當(dāng)前桑園病蟲害防治的主要方法，通常桑園噴施農(nóng)藥后，受環(huán)境因素的影響藥物會逐漸發(fā)生降解，桑葉中殘留的藥物對家蠶的殘留毒性也逐漸降低，所以生產(chǎn)上農(nóng)藥造成的家蠶中毒以慢性中毒居多。另外，農(nóng)藥的殘留毒性測定試驗對生產(chǎn)的指導(dǎo)性強(qiáng)。如40%辛硫磷EC對家蠶的室內(nèi)急性毒性為高毒性，具有極高風(fēng)險[7]，但桑樹噴施1 500 倍稀釋藥液后對家蠶的安全間隔期為3～5 d，是桑園害蟲防治的常用農(nóng)藥。今年上半年部份蠶品種出現(xiàn)輕微農(nóng)藥中毒，造成結(jié)繭率低下或不結(jié)繭、交配率低或不交配、產(chǎn)卵量低或不產(chǎn)卵蛾增多等，鑒于此，本研究采用食下毒葉法測定了當(dāng)?shù)厣@長期使用的5 個常規(guī)藥劑組合配方噴施桑樹后不同采葉時間對家蠶不同原原種生長發(fā)育及經(jīng)濟(jì)性狀的影響，為家蠶原原種生產(chǎn)提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑和家蠶品種

供試家蠶原原種：云7A、云7B、云8A、云8B、菁松A、菁松B、皓月A、皓月B 8 個品種（由云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所家蠶原種繁育中心提供），幼蟲在常規(guī)條件下用桑葉飼養(yǎng)至3 齡起蠶（2 齡眠起）。

供試桑樹品種：云桑2 號，樹齡26 年，桑樹種植按常規(guī)進(jìn)行水肥管理。供試農(nóng)藥使用濃度及生產(chǎn)廠家如表1。

表1 供試農(nóng)藥使用濃度及生產(chǎn)廠家

1.2 試驗設(shè)計

參照農(nóng)業(yè)部《殺菌、殺蟲劑對作物安全性室內(nèi)試驗準(zhǔn)則》，按常規(guī)使用劑量設(shè)計用于該試驗的藥液濃度，并設(shè)清水對照。處理A：辛硫磷乳油+敵敵畏乳油+克螨特乳油+多菌靈可濕性粉劑；處理B：辛硫磷乳油+敵敵畏乳油+克螨特乳油+多菌靈可濕性粉劑+草胺磷水劑（噴地面），4 齡起蠶后桑樹噴施蠶用多菌靈粉；處理C：樂果乳油+毒死蜱乳油+敵敵畏乳油+克螨特乳油；處理D：樂果乳油+毒死蜱乳油+敵敵畏乳油+克螨特乳油+草胺磷水劑（噴地面），4 齡起蠶后桑樹噴施蠶用多菌靈粉；處理E（CK）：清水。每種藥組合噴施80 株桑樹為1 個處理，每個處理設(shè)3 個重復(fù)試驗區(qū)，各處理組之間留1墑作為保護(hù)行。

1.3 試驗方法

1.3.1 田間施藥

田間施藥參照文獻(xiàn)[8]的方法，于2017 年6 月13日上午9：00 時用浙江濛花-16 型噴霧器對桑樹從上到下噴施藥液，使藥液均勻附著于葉面、葉背及枝條。藥后1～35 d 試驗地的日均溫度為23.42 ℃，最高溫度為23.85 ℃，最低溫度23.02 ℃；日均降雨量0.16 mm；日均相對濕度為65.08%。

1.3.2 養(yǎng)蠶測試

采用食下毒葉法[9～10]并部分加以改進(jìn)。選取發(fā)育一致的3 齡起蠶置于飼養(yǎng)盒內(nèi)，從桑園分別采摘噴藥后15 d 的桑葉，將桑葉稱重后放入飼養(yǎng)盒內(nèi)飼喂家蠶。每處理設(shè)3 個重復(fù)，每個重復(fù)飼喂50 頭蠶。給予供試桑葉后的家蠶置于25 ℃、RH 50%～60%、光照時間14 h/d的飼養(yǎng)室內(nèi)飼養(yǎng)，調(diào)查添食毒葉24 h、48 h 后的家蠶中毒死亡率，未中毒死亡的家蠶繼續(xù)添食相應(yīng)處理的桑葉至上蔟結(jié)繭，調(diào)查各處理不同采葉時間飼養(yǎng)家蠶的眠蠶體質(zhì)量、各齡齡期經(jīng)過和全繭量、繭層量、繭層率、蛹體質(zhì)量、死籠率等主要經(jīng)濟(jì)性狀指標(biāo)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)均采用Excel 2003 和SPSS 17.0 進(jìn)行統(tǒng)計和分析，采用Duncan 新復(fù)極差法比較各處理間的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 桑樹噴施常規(guī)農(nóng)藥殘留毒性對家蠶的影響

采摘噴施不同農(nóng)藥的桑葉喂食家蠶，藥后15 d，處理A 和處理B（噴地面）4 齡起蠶（桑樹噴施蠶用多菌靈粉）的各家蠶品種未出現(xiàn)中毒死亡；處理D（噴地面）4 齡起蠶（桑樹噴施蠶用多菌靈粉）除了云7B、云8B、菁松B、皓月B 48 h 內(nèi)有0.67%～6.67%的中毒死蠶，其他家蠶品種未見中毒死亡；處理C 48 h 內(nèi)除了云7B 出現(xiàn)0.67%的中毒死蠶，其他家蠶蠶品種48 h內(nèi)無急性中毒發(fā)生。

2.2 各處理對家蠶生長發(fā)育及主要經(jīng)濟(jì)性狀的影響

2.2.1 對齡期經(jīng)過的影響

表2 藥后15 d 各處理對家蠶各齡期經(jīng)過的影響

從表2 可見，藥后15 d，3 齡期各處理的齡期經(jīng)過相同。4 齡期處理A、處理D 除了菁松A、菁松B 和皓月A 的齡期經(jīng)過比處理E（CK）提前0.71～0.75 d，其他品種與處理E（CK）相同；處理B、處理C 的各品種齡期經(jīng)過均比處理E（CK）提前0.12～1 d。5 齡期處理A 除了云7A、云8A、皓月A 的齡期經(jīng)過比處理E（CK）延遲0.08～0.87 d，云8B、皓月B 的齡期經(jīng)過則比處理E（CK）提前0.29～0.5 d，其他2 個品種的齡期經(jīng)過與處理E（CK）相同；處理B 云7A、云8A 的齡期經(jīng)過均比處理E（CK）延遲0.25～0.58 d，其他品種均比處理E（CK）提前0.04～0.91 d；處理C 除了皓月A的齡期經(jīng)過比處理E（CK）提前0.04 d，其他品種均比處理E（CK）延遲0.04～0.58 d；處理D 除了云8B、箐松A、箐松B 3 個品種的齡期經(jīng)過與處理E（CK）相同，皓月A 的齡期經(jīng)過則比處理E（CK）提前0.04 d，其他品種的齡期經(jīng)過與處理E（CK）相比，延遲0.09～0.96 d。

2.2.2 對各齡期眠蠶和熟蠶體質(zhì)量的影響

眠蠶體質(zhì)量是家蠶生長發(fā)育性狀中較為敏感的指標(biāo)之一[11]。

表3 藥后15 d 各處理對家蠶各齡期眠蠶及熟蠶體質(zhì)量的影響

從表3 可見，藥后15 d 采摘桑葉養(yǎng)蠶，各處理對5 齡期熟蠶的影響與處理E（CK）差異不顯著，但對3齡、4 齡眠蠶體質(zhì)量有所影響，其中皓月B 3 齡期眠蠶體質(zhì)量處理D 低于處理E（CK），其他品種及處理的蠶體質(zhì)量與處理E（CK）差異不顯著；各品種4 齡期除處理A 與處理E（CK）差異顯著外，菁松B 眠蠶體質(zhì)量處理B、處理C、處理D 與處理E（CK）差異顯著，皓月B 眠蠶體質(zhì)量處理D 與處理E（CK）差異顯著，其他品種各處理與處理E（CK）無顯著差異。

2.2.3 對簇中死籠率的影響

表4 藥后15 d 各處理對家蠶死籠率的影響

從表4 可見，藥后15 d，處理A 除箐松A、箐松B、皓月B 的死籠率低于處理E（CK）外，其它品種均高于處理E（CK）；處理B 除云7A、云8A、箐松B、皓月A 的死籠率低于處理E（CK），其他4 個品種均高于處理E（CK）；處理C 除了箐松B 的死籠率低于處理E（CK）外，其它品種的死籠率均比處理E（CK）高；處理D 除了云7A、云8A 的死籠率低于處理E（CK），其他6 個品種均高于處理E（CK）。

2.2.4 對產(chǎn)繭量和蛹體質(zhì)量的影響

從表5 可見，藥后15 d，全繭量除了云7A 的處理D，箐松A 的處理B、處理D 和皓月B 的處理B、處理D與處理E（CK）差異顯著，其他品種的其他處理與處理E（CK）無顯著差異。繭層量除了云7A 的處理D，菁松A的處理B、處理D 和箐松B 的處理D 低于處理E（CK）外，其他品種的其他處理與處理E（CK）差異不顯著。繭層率除了菁松A 的處理C、皓月A 的處理A 高于處理E（CK）外，其他品種的其他處理與處理E（CK）差異不顯著；蛹體質(zhì)量除了云7A 的處理D，菁松A 的處理B、處理D 和皓月A 的處理A 低于處理E（CK）外，其他品種的其他處理與處理E（CK）無顯著差異。

表5 藥后15 d 各處理對家蠶產(chǎn)繭量和蛹體質(zhì)量的影響

3 討論

農(nóng)藥對家蠶的慢性毒性是指微量的農(nóng)藥進(jìn)入蠶體后，雖不足以導(dǎo)致家蠶短時間內(nèi)中毒死亡，但隨著其攝入量的積累，對家蠶生長發(fā)育和經(jīng)濟(jì)學(xué)性狀會產(chǎn)生不利的影響。通過5 組常規(guī)農(nóng)藥組合噴施桑樹后，藥后15 d 采葉添食3 齡家蠶，發(fā)現(xiàn)除了樂果乳油+毒死蜱乳油+敵敵畏乳油+克螨特乳油+草胺磷水劑的云7B、云8B、菁松B、皓月B 48 h 內(nèi)有0.67%～6.67%的中毒蠶，其他各品種處理雖然未出現(xiàn)中毒蠶，但發(fā)育不整齊。根據(jù)本次試驗的結(jié)果分析和相關(guān)文獻(xiàn)報道，云南省蠶區(qū)現(xiàn)行推廣的家蠶多絲量品種云蠶7×云蠶8 和菁松×皓月均是20 世紀(jì)90 年代育成的，隨著在生產(chǎn)上推廣應(yīng)用年限的延長，品種的優(yōu)良種性也逐漸退化[12]，在不同季節(jié)、不同區(qū)域飼養(yǎng)均會表現(xiàn)一些不良性狀[13～14]，特別是品種的健康性和抗逆能力較差，如本試驗中的云7A、云7B、云8A、云8B 4 個品種在4 個組合藥劑和清水對照的飼育過程中，出現(xiàn)大小蠶，眠起不齊等不良現(xiàn)象；從死籠率的角度分析，各處理對的7A、云7B、云8A、云8B 的影響較大，其次是箐松A、箐松B，對皓月A、皓月B 的影響較??；從家蠶發(fā)育情況和主要經(jīng)濟(jì)性狀來看，4 個處理對家蠶的繭層率無影響，但各處理齡期經(jīng)過比清水對照提前或延遲、眠蠶及熟蠶體質(zhì)量顯著高于或低于清水對照、全繭量、繭層量和蛹體質(zhì)量的少數(shù)經(jīng)濟(jì)性狀與清水對照相比無差別，但多數(shù)經(jīng)濟(jì)性狀顯著高于或低于清水對照，表現(xiàn)出不一致的特點，出現(xiàn)這種情況可能是個別品種出現(xiàn)了退化傾向或?qū)κ┯盟巹┠褪苄圆罨蛏Ｈ~受到自然環(huán)境的污染，且桑葉養(yǎng)分降低，蠶體質(zhì)下降，另外長期使用同一組合農(nóng)藥，雖然按不同農(nóng)藥的推薦濃度使用，但幾種農(nóng)藥組合到一起并沒有降低濃度，反而增加了使用濃度；但同時也有可能其中某2 種藥劑的有效成份之間相互影響，造成藥劑毒性降低，防治效果下降，同時也增加了成本，從而導(dǎo)致‘病害越治越重，蟲害越治越多’，造成環(huán)境污染，桑園病蟲害抗性增強(qiáng)，桑樹受損或土壤遭到破壞等，因此不合理使用農(nóng)藥對家蠶的生長發(fā)育和經(jīng)濟(jì)性狀會產(chǎn)生不利的影響。4 個組合藥劑長期噴施桑樹后對桑樹及家蠶有一定的影響，建議重視桑園管理，生產(chǎn)用葉病蟲害防治需科學(xué)、合理用藥，避免長期使用單一配方造成桑樹受損或土壤遭到破壞，從而縮短了桑樹及土壤的使用壽命，同時應(yīng)加強(qiáng)蠶品種的選育，防止品種退化。