沈敏,熊英,王穎,董甜甜,王仁杰,劉天紅,姜令緒,徐彩虹,李玉全*
(1. 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)海洋科學(xué)與工程學(xué)院, 山東 青島 266109;2. 重慶市農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所, 重慶 401329;3. 山東省海洋生物研究院, 山東 青島 266104;4. 山東省青島市城陽(yáng)區(qū)海洋發(fā)展局, 山東 青島 266109)
隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)的不斷發(fā)展,海水養(yǎng)殖、淡水養(yǎng)殖及半咸水養(yǎng)殖均得到了快速發(fā)展[1],不同鹽度水體中養(yǎng)殖的同種水產(chǎn)動(dòng)物在風(fēng)味、營(yíng)養(yǎng)和質(zhì)構(gòu)方面均有差異[2]。鹽度決定了魚類體內(nèi)糖類、脂肪和蛋白質(zhì)的含量,是影響肌肉品質(zhì)的重要因素[3]。研究表明,鹽度具有提升凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)[4-6]和烏鱧(Channaargus)[7]肌肉中游離氨基酸總量、呈味氨基酸含量的作用。李小勤等[8]的研究表明養(yǎng)殖鹽度升高可增加草魚(Ctenopharyngodonidellus)肌肉膠原蛋白含量。凡納濱對(duì)蝦是中國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)水產(chǎn)養(yǎng)殖蝦類,目前低鹽度水體養(yǎng)殖在中國(guó)占有很大的比例[9]。關(guān)于凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖鹽度方面的研究,目前主要集中在低鹽養(yǎng)殖領(lǐng)域,高鹽領(lǐng)域的相關(guān)研究報(bào)道甚少。煮制是食用凡納濱對(duì)蝦常用手段,煮制過(guò)程可能會(huì)影響對(duì)蝦的肌肉品質(zhì),本實(shí)驗(yàn)以高鹽養(yǎng)殖(58‰)凡納濱對(duì)蝦為試驗(yàn)材料,以低鹽(22‰)水體養(yǎng)殖的凡納濱對(duì)蝦為對(duì)照,通過(guò)檢測(cè)生、熟樣品的質(zhì)構(gòu)物性、氨基酸、膠原蛋白和蝦青素等指標(biāo),分析養(yǎng)殖鹽度對(duì)凡納濱對(duì)蝦肌肉品質(zhì)的影響,探討兩種養(yǎng)殖鹽度間生、熟蝦樣各指標(biāo)含量的變化,以期為養(yǎng)殖優(yōu)質(zhì)凡納濱對(duì)蝦、保證食用品質(zhì)提供參考。
高鹽凡納濱對(duì)蝦來(lái)自鹽度58‰水體,體長(zhǎng)(10.55±1.25)cm;低鹽凡納濱對(duì)蝦來(lái)自鹽度22‰的水體,體長(zhǎng)(11.25±1.18)cm。生樣剝離蝦頭與蝦殼,用吸水紙擦拭后進(jìn)行實(shí)驗(yàn);熟樣采用冷水放蝦沸水煮3 min進(jìn)行制備,煮熟后剝離蝦頭與蝦殼。
1.2.1 質(zhì)構(gòu)物性分析
取高鹽和低鹽凡納濱對(duì)蝦蝦樣,使用質(zhì)構(gòu)儀(CT3-4500,美國(guó)Brookfield)在對(duì)蝦肌肉第2腹節(jié)中央測(cè)定。使用TA44探頭,檢測(cè)硬度、黏性、內(nèi)聚性、彈性、膠著性和咀嚼性等指數(shù)。
壓縮測(cè)定條件設(shè)置如下:測(cè)試類型為TPA質(zhì)構(gòu)分析;測(cè)試目標(biāo)為距離,測(cè)試目標(biāo)值5.0 mm;觸發(fā)點(diǎn)負(fù)載6.8 g;測(cè)試速度0.5 mm/s;循環(huán)次數(shù)為2次。
1.2.2 游離氨基酸的測(cè)定
1.2.3 膠原蛋白的測(cè)定
測(cè)定游離氨基酸(FAA)含量,參考王曜等[10]方法,稍作改動(dòng)。生樣和熟樣各稱取2.0 g樣品,分別加入20 mL鹽酸溶液(0.02 mol/L),在4 ℃下進(jìn)行均質(zhì)、離心(5 000 r/min,5 min),取上清液。對(duì)沉淀進(jìn)行重復(fù)操作1次后,將上清液合并,定容至50 mL。量取1 mL定容后溶液和1 mL 5%的磺基水楊酸溶液充分混合,渦旋10 min,再將混合后溶液于冷凍離心機(jī)(Hitachi,型號(hào)CF16RN,日本)中離心(15 000 r/min,20 min),取上清液經(jīng)0.22 μm水相微孔濾膜過(guò)濾后借助日立L-8900全自動(dòng)氨基酸分析儀(青島農(nóng)業(yè)大學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室)進(jìn)行檢測(cè)(色譜柱2622#pH離子交換色譜,4.5 mm×60.0 mm;柱溫57 ℃;柱后衍生,衍生反應(yīng)溫度135 ℃)。
圖7為一個(gè)周期內(nèi)即0.1 s時(shí)間內(nèi),讀取天線端電壓幅值隨時(shí)間的變化曲線,可以看出有且僅有一個(gè)波谷,而且物體在旋轉(zhuǎn)過(guò)程中,只有當(dāng)讀取天線每旋轉(zhuǎn)到與天線正對(duì)位置時(shí),讀取天線端電壓信號(hào)幅值才會(huì)出現(xiàn)最低值;從圖8可以看出,兩個(gè)周期內(nèi)出現(xiàn)了兩個(gè)波谷,采集兩個(gè)波谷之間的時(shí)間間隔即可求出電機(jī)轉(zhuǎn)速,可以求得兩個(gè)波谷之間的時(shí)間間隔約為0.1 s,與電機(jī)轉(zhuǎn)速設(shè)定值相吻合。
因?yàn)閚-k≥3,故取a∈
膠原蛋白的測(cè)定主要參照Yoshinaka等[11]的測(cè)定方法并做進(jìn)一步改進(jìn)。稱取4.0 g蝦肉,加10倍體積蒸餾水勻漿,離心(4 ℃,10 000 r/min,20 min)后棄上清液,后加入20倍體積0.1 mol/L NaOH溶液攪拌過(guò)夜(過(guò)夜溫度4 ℃,放置時(shí)間10 h左右),離心(4 ℃,10 000 r/min,20 min),棄上清液,重復(fù)2次。然后加入10倍體積0.5 mol/L冰醋酸,攪拌過(guò)夜(過(guò)夜溫度4 ℃,放置時(shí)間10 h左右)后,按照上述條件離心,重復(fù)1次,收集的上清液即為可溶性膠原蛋白提取液。
1.2.4 蝦青素的測(cè)定
蝦青素的測(cè)定參照Niamnuy等[12]的方法,稱取5 g預(yù)先處理好的蝦肉樣品,加入40 mL 4 ℃預(yù)冷2 h的丙酮進(jìn)行萃取,用高速勻漿機(jī)混合2 min,4 ℃下5 000 r/min離心5 min。萃取3次后,將離心所得上清液混合,置入250 mL分液漏斗中,并添加40 mL石油醚和100 mL的0.5%NaCl溶液,用手搖勻,萃取20 min,分離石油醚層,轉(zhuǎn)移到50 mL容量瓶中定容,用紫外可見分光光度計(jì)(UV6100,上海元析儀器有限公司)測(cè)定 472 nm下的吸光值,含量計(jì)算參考Tolasa的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)用WPS軟件(金山軟件股份有限公司,中國(guó))和SPSS19.0軟件(IBM公司,美國(guó))進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,借助單因素方差分析(One-ANOVA)和Duncan多重比較檢驗(yàn)數(shù)據(jù)差異的顯著性,所有數(shù)據(jù)均用3個(gè)平行組數(shù)據(jù)的(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)表示,以P<0.05作為差異顯著。
從表2可以看出,經(jīng)氨基酸自動(dòng)分析檢測(cè)儀檢測(cè),凡納濱對(duì)蝦生、熟蝦肉中均測(cè)得15種游離氨基酸。無(wú)論生樣還是熟樣,高鹽蝦與低鹽蝦的游離氨基酸總量未產(chǎn)生顯著差異(P>0.05)。兩種鹽度養(yǎng)殖的蝦的生、熟蝦肉中含量較高的氨基酸為丙氨酸、甘氨酸、精氨酸和脯氨酸。生樣中,高鹽蝦甘氨酸和精氨酸含量高于低鹽蝦;煮熟后,高鹽蝦的甘氨酸、精氨酸含量顯著高于低鹽蝦(P<0.05)。在脯氨酸方面,低鹽蝦生樣含量顯著高于高鹽蝦(P<0.05);煮熟后,無(wú)論高鹽蝦還是低鹽蝦,脯氨酸含量都升高,58‰鹽度蝦肉生樣脯氨酸含量為346.71 mg/(100g),熟樣含量達(dá)到788.06 mg/(100g),是生樣的2.27倍。
從表1可以看出,兩種鹽度養(yǎng)殖的蝦生樣相比較:高鹽蝦的硬度、咀嚼性和內(nèi)聚性均顯著高于低鹽蝦(P<0.05),高鹽蝦與低鹽蝦在膠著性及黏性方面未產(chǎn)生顯著差異(P>0.05)。
在沉淀中加入5倍體積蒸餾水,然后在高壓滅菌鍋內(nèi)120 ℃條件下加熱1 h,10 000 r/min離心20 min,上清液即為不可溶膠原蛋白提取液。膠原蛋白通過(guò)Folin—酚試劑法測(cè)定。Folin—酚試劑A由2%Na2CO3溶液、0.1 mol/L NaOH溶液、0.5%CuSO4·5H2O溶液及1%酒石酸堿溶液配制。
文中設(shè)計(jì)的標(biāo)量脫靶量測(cè)量系統(tǒng)采用基于LFMCW雷達(dá)測(cè)距原理的脫靶量測(cè)量方法,系統(tǒng)帶寬大、距離測(cè)量精度高。但是接收機(jī)中頻帶寬小,信號(hào)采樣率和數(shù)據(jù)傳輸速率低,信號(hào)處理計(jì)算量小,電路簡(jiǎn)單。該系統(tǒng)具有電路簡(jiǎn)單、成本低、體積小、重量輕、峰值功率低、測(cè)量精度高等特點(diǎn)。而且采用一體化、模塊化設(shè)計(jì),根據(jù)不同任務(wù)可裝載于不同的靶標(biāo)平臺(tái)。該系統(tǒng)已形成系列化產(chǎn)品,成功應(yīng)用于靶彈、靶船和無(wú)人機(jī)等多個(gè)靶標(biāo)平臺(tái)。系統(tǒng)脫靶量測(cè)量精度≤1 m,測(cè)量范圍為0~60 m,達(dá)到國(guó)內(nèi)先進(jìn)水平,為部隊(duì)打靶訓(xùn)練和科研靶試提供精確的脫靶量信息,具有良好的應(yīng)用前景。
表1 高鹽與低鹽凡納濱對(duì)蝦蝦肉質(zhì)構(gòu)物性分析Tab.1 Texture for profiling studies in meat from high and low salinity L. vannamei
注:不同字母表示同一列處理間差異顯著(P<0.05)。
有些時(shí)候我們讀古詩(shī)詞,會(huì)產(chǎn)生一種這首詩(shī)或者詞時(shí)序顛倒、不和邏輯的感覺。例如李頎的《送魏萬(wàn)之京》:朝聞?dòng)巫映x歌,昨夜微霜初渡河。[9]首句點(diǎn)明了魏萬(wàn)出發(fā)的時(shí)間是早上,為什么下一句卻寫昨夜的景象。這不是時(shí)間錯(cuò)亂了嗎?其實(shí)這是倒戟而入的筆法,倒追昨晚發(fā)生的事件。早上詩(shī)人見到魏萬(wàn)將走是實(shí)景實(shí)寫,“昨夜微霜初渡河”實(shí)際上是詩(shī)人想象魏萬(wàn)昨晚的情形??此平癯?、昨夜是時(shí)間上的混亂,實(shí)際上卻是藝術(shù)創(chuàng)作的神來(lái)之筆。
1.2 方法 對(duì)照組孕產(chǎn)婦無(wú)定期產(chǎn)檢,按照個(gè)人意愿進(jìn)行保健措施。觀察組孕產(chǎn)婦嚴(yán)格按照下述原則執(zhí)行孕期保健:①孕產(chǎn)婦早孕期首診時(shí)建立電子孕產(chǎn)婦保健系統(tǒng)檔案,并給予孕婦孕產(chǎn)期保健手冊(cè);②定期發(fā)放相關(guān)宣傳資料,定期開辦孕婦學(xué)校及講座;③制定產(chǎn)檢計(jì)劃,及時(shí)發(fā)現(xiàn)相關(guān)并發(fā)癥、合并癥并給予積極處理;④對(duì)胎兒實(shí)施監(jiān)護(hù),了解胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)狀況、有無(wú)發(fā)育畸形等。
表2 高鹽與低鹽凡納濱對(duì)蝦蝦肉中游離氨基酸的含量與組成 Tab.2 Free amino acid composition and content in meat from high and low salinity L. vannamei mg·(100g)-1
注:不同字母表示同一行處理間差異顯著(P<0.05)。
如表3所示,高鹽蝦與低鹽蝦相比較,無(wú)論是生樣還是熟樣,不可溶蛋白含量均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于可溶蛋白含量(P<0.05)。兩種鹽度養(yǎng)殖的蝦生樣相比較:高鹽蝦的可溶蛋白和不可溶蛋白含量均顯著高于低鹽蝦(P<0.05);兩種鹽度養(yǎng)殖的蝦熟樣相比:高鹽蝦的可溶蛋白濃度顯著高于低鹽蝦(P<0.05),不可溶蛋白含量之間差異不顯著(P>0.05)。
表3 高鹽與低鹽凡納濱對(duì)蝦蝦肉中膠原蛋白含量Tab.3 Collagen content in meat from high and low salinity L. vannamei
注:不同字母表示同一行處理間差異顯著(P<0.05)。
由圖1可以看出,高鹽蝦生樣蝦青素含量顯著高于低鹽蝦生樣(P<0.05),高鹽蝦熟樣與低鹽蝦熟樣之間的蝦青素含量差異不顯著(P>0.05)。低鹽蝦在煮熟后,蝦青素含量顯著升高(P<0.05),高鹽蝦煮熟后,蝦青素含量雖有升高,但未達(dá)到顯著差異水平(P>0.05)。
兩種鹽度養(yǎng)殖的蝦熟樣相比較:高鹽蝦的咀嚼性、膠著性和內(nèi)聚性3個(gè)指標(biāo)顯著高于低鹽蝦(P<0.05)。在彈性、硬度和黏性方面,高鹽蝦與低鹽蝦相比差異不顯著(P>0.05)。
不同字母表示處理間差異顯著(<0.05)。
Different letters show significant differences(<0.05).
鹽度是影響水產(chǎn)養(yǎng)殖的主要因素之一,影響水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)、存活、生理代謝和能量收支等行為[13-14]。鹽度通過(guò)影響水產(chǎn)動(dòng)物的生理代謝,進(jìn)而影響機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)、糖類及脂肪等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝和組成,最終影響肌肉品質(zhì)[15]。
質(zhì)構(gòu)特性是食品重要的物理特性,可反映食品的質(zhì)地品質(zhì)[16]。硬度、彈性、緊密性和咀嚼性等是質(zhì)構(gòu)評(píng)價(jià)的主要指標(biāo)[17]。周偉等[15]研究發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖鹽度對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦(Penaeusmonodon)肌肉的質(zhì)構(gòu)特性有明顯的影響,發(fā)現(xiàn)3種養(yǎng)殖鹽度(0、15‰和25‰)下,斑節(jié)對(duì)蝦肌肉的質(zhì)構(gòu)隨著養(yǎng)殖鹽度的提高,肌肉緊密性、硬度和咀嚼度都逐漸增高(P<0.01),彈性和緊密性有增高的趨勢(shì)。張婷等[16]的研究表明,魚體內(nèi)聚性越高,魚肉總體越完整,咀嚼時(shí)越細(xì)膩,口感越好,表明質(zhì)構(gòu)特性與水產(chǎn)品肌肉品質(zhì)之間關(guān)系密切。本實(shí)驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn),無(wú)論是生樣還是熟樣,高鹽凡納濱對(duì)蝦的咀嚼性、內(nèi)聚性均顯著高于低鹽蝦(P<0.05);煮熟后,高鹽養(yǎng)殖對(duì)蝦的咀嚼性、膠著性及內(nèi)聚性均顯著高于低鹽蝦(P<0.05)。總體看來(lái),無(wú)論是生樣還是熟樣,高鹽養(yǎng)殖對(duì)凡納濱對(duì)蝦肌肉的質(zhì)構(gòu)特性影響顯著,高鹽蝦的肌肉質(zhì)構(gòu)品質(zhì)優(yōu)于低鹽蝦。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與王士穩(wěn)[17]報(bào)道的海水養(yǎng)殖的凡納濱對(duì)蝦較淡水蝦肌肉質(zhì)地指標(biāo)更佳的研究結(jié)果相似。
魚類、貝類和蝦類等水產(chǎn)動(dòng)物含有豐富的游離氨基酸[18]。氨基酸是構(gòu)成動(dòng)物蛋白質(zhì)的基本物質(zhì),可以調(diào)味增香,強(qiáng)化食物營(yíng)養(yǎng)[19],氨基酸含量與組成同時(shí)決定蝦類的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和呈味特性[20]。孟紹鳳等[21]研究發(fā)現(xiàn)游離氨基酸是蝦中最重要的非揮發(fā)性風(fēng)味化合物,中國(guó)對(duì)蝦(Fenneropenaeuschinensis)、秀麗白蝦(Chinesewhiteprawn)及日本沼蝦(Macrobrachiumnipponense)中精氨酸、甘氨酸、脯氨酸和丙氨酸的含量較高。梁萌青等[4]研究發(fā)現(xiàn)凡納濱對(duì)蝦肌肉中甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸及精氨酸含量隨鹽度增加(0~30‰)而顯著增加(P<0.05);戴習(xí)林等[22]研究發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖水體鹽度顯著影響凡納濱對(duì)蝦蝦體肌肉風(fēng)味氨基酸含量,而且鹽度越高,風(fēng)味氨基酸含量也越高。可見,水體鹽度會(huì)顯著影響蝦類肌肉的氨基酸含量,但對(duì)不同蝦類的影響不盡相同。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),兩種養(yǎng)殖鹽度的凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)含量較高的游離氨基酸是丙氨酸、甘氨酸、精氨酸和脯氨酸。與生樣相比較,高鹽蝦甘氨酸含量高于低鹽蝦,煮熟后,高鹽蝦的甘氨酸和精氨酸含量顯著高于低鹽蝦。就脯氨酸而言,低鹽蝦生樣含量顯著高于高鹽蝦,煮熟后,無(wú)論高鹽蝦還是低鹽蝦,脯氨酸含量都升高,且高鹽養(yǎng)殖凡納濱對(duì)蝦脯氨酸含量略高于低鹽蝦??傮w看來(lái),高鹽養(yǎng)殖的凡納濱對(duì)蝦在丙氨酸、甘氨酸、精氨酸及脯氨酸含量上均高于低鹽蝦,實(shí)驗(yàn)結(jié)果與梁萌青等[4]、戴習(xí)林等[22]和孟紹鳳等[21]等研究結(jié)果一致,進(jìn)一步證實(shí)了水體鹽度會(huì)影響蝦類肌肉的氨基酸含量,且氨基酸含量隨鹽度增加而增加,游離氨基酸作為蝦中最重要的非揮發(fā)性風(fēng)味化合物,在一定程度上代表著蝦類的呈味特性,所以高鹽養(yǎng)殖對(duì)凡納濱對(duì)蝦的肌肉風(fēng)味的影響是顯著的,而高鹽養(yǎng)殖對(duì)凡納濱對(duì)蝦游離氨基酸含量具體影響機(jī)理有待進(jìn)一步研究。
第二天起床晚了,這半年第一次讓自己這般慌忙,不想遲到,所以步伐急促,在慌張中擠進(jìn)公司電梯的時(shí)候,我看到站在我面前的竟然是隔壁戴墨鏡的女人!她也在這里上班?我向她點(diǎn)頭打招呼。她仍舊戴著墨鏡,和昨天款式不同的墨鏡。到8樓的時(shí)候,她走出電梯,向我說(shuō)拜拜,有笑容,但是她戴著墨鏡,我看不清她的眼睛是不是也笑了。
水產(chǎn)動(dòng)物的品質(zhì)與肌肉膠原蛋白含量密切相關(guān)。膠原蛋白主要存在于結(jié)締組織中,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,容易被人體吸收[17,23]。蝦青素是一種類胡蘿卜素,顏色呈深粉紅色,具有抗氧化、增強(qiáng)免疫力、抗腫瘤、預(yù)防癌癥和改善視力等效果[24-25]。李小勤等[8]研究發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖鹽度升高可增加草魚(Ctenopharyngodonidellus)肌肉膠原蛋白含量;梁擁軍等[26]研究發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖鹽度升高顯著增加了高體革鯻(Scortumbarcoo)肌肉膠原蛋白含量(P<0.05);蔣霞敏等[27]研究發(fā)現(xiàn)隨著養(yǎng)殖鹽度的增加,雨生紅球藻(HaematococcusPluvialis)的蝦青素累積量比原來(lái)增多。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),高鹽養(yǎng)殖凡納濱對(duì)蝦的可溶性和不溶性膠原蛋白含量均高于低鹽蝦,且高鹽蝦鮮樣蝦青素含量顯著高于低鹽蝦生樣(P<0.05),這與李小勤等[8]、梁擁軍等[26]的研究結(jié)果相似。
本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)高鹽(58‰)與低鹽(22‰)水體養(yǎng)殖的凡納濱對(duì)蝦生鮮樣品和煮熟樣品的質(zhì)構(gòu)物性、氨基酸組成及含量、膠原蛋白和蝦青素含量等指標(biāo),發(fā)現(xiàn)在硬度、咀嚼性、內(nèi)聚性和膠著性等方面,高鹽養(yǎng)殖凡納濱對(duì)蝦均優(yōu)于低鹽蝦;兩種鹽度養(yǎng)殖的蝦的生、熟蝦肉中含量較高的氨基酸為丙氨酸、甘氨酸、精氨酸和脯氨酸,且高鹽蝦熟樣中的丙氨酸、甘氨酸、精氨酸和脯氨酸含量高于低鹽蝦,食用風(fēng)味可能更佳,在膠原蛋白和蝦青素指標(biāo)方面,高鹽蝦含量更高。綜合考慮,高鹽養(yǎng)殖的凡納濱對(duì)蝦生、熟肌肉品質(zhì)均優(yōu)于低鹽養(yǎng)殖凡納濱對(duì)蝦,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值更高。