蔡榮榮 周思賢
摘 要 采用不同炮制法將浙產(chǎn)桃膠進(jìn)行炮制并測(cè)定總多糖含量,建立桃膠炮制品質(zhì)量的控制方法。分別對(duì)一定量的干桃膠生品采用桃膠炒黃、炒焦、鹽炙、酒炙以及桑柴灰浸制的方法進(jìn)行炮制。結(jié)果發(fā)現(xiàn),5種炮制品的總多糖含量都比未經(jīng)炮制過的生品高,其中酒制最高,炒焦其次,接著炒黃、桑柴灰浸制,鹽制最低。
關(guān)鍵詞 浙產(chǎn)桃膠;炮制方法;多糖;硫酸-蒽酮法
中圖分類號(hào):TS202.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2020.05.097
桃膠是來自于薔薇科的木本植物桃(Amygdalus persica L.)或野生桃(Amygdalus davidiana C.),當(dāng)樹皮部分受到外部傷害,如昆蟲叮咬、切傷,或生病后會(huì)分泌出顏色為淡桃紅色、淡黃色至稍深的黃褐色的類似于半透明膠質(zhì)物。我國(guó)有著豐富的桃膠資源,每667 m2果園年產(chǎn)桃膠25~55 kg,主要分布于河北、浙江等地。炮制品有干桃膠、炒黃、炒焦、鹽制、酒制和桑柴灰制等,其中干桃膠跟酒制桃膠最為常用。炮制能起到純凈藥材的作用,也能干燥藥材,降低或消除藥物毒副作用[1]。
1 材料與方法
1.1 材料與儀器設(shè)備
以浙江省內(nèi)種植栽培的桃樹生產(chǎn)的桃膠為試驗(yàn)材料,購(gòu)于浙江寶芝林中藥科技有限公司。
WFZ UV-2000紫外-可見分光光度計(jì),尤尼柯儀器上海有限公司;KQ-500B超聲波清洗機(jī),江蘇超聲波儀器昆山有限公司;W177-1200W中草藥粉碎機(jī),泰斯特儀器天津有限公司;BPG-9040A精密鼓風(fēng)干燥箱,一恒科學(xué)儀器上海有限公司;萬分之一分析天平,上海梅特勒托利多儀器研究所有限公司。
D-無水葡萄糖購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院,桑柴灰購(gòu)于安徽合肥廬江人家,蒽酮試劑和濃硫酸購(gòu)于四友精細(xì)化工天津有限公司。
1.2 方法
用D-無水葡萄糖作為標(biāo)準(zhǔn)品,利用紫外分光光度法測(cè)定桃膠炮制品以及生品中多糖的含量。使用硫酸-蒽酮比色法,多糖在壞水(即70%濃硫酸)的作用下水解成單糖,并迅速脫水形成糠醛或羥甲基糠醛,得到的糠醛或羥甲基糠醛與蒽酮反應(yīng),脫水縮合,形成糠醛衍生物。反應(yīng)后生成藍(lán)綠色物質(zhì),在紫外分光光度計(jì)某波長(zhǎng)下有最大吸收,且其光吸收值在一定范圍內(nèi)與糖含量成正比關(guān)系。
1.2.1 預(yù)備試驗(yàn)
采用超聲波輔助溶解法溶解桃膠,篩選最佳超聲功率和用時(shí)。設(shè)定超聲功率[2]分別為30 W、50 W、70 W、90 W和110 W,固定超聲時(shí)長(zhǎng)為15 min,用硫酸-蒽酮法顯色后在紫外分光光度計(jì)于400 nm、450 nm、500 nm、550 nm和600 nm處測(cè)定吸光度。吸光度值最大時(shí)是超聲70 w,490 nm波長(zhǎng)處。另將超聲時(shí)設(shè)為5 min、10 min、15 min、20 min和25 min,用相同方法在490 nm處測(cè)定吸光度值,發(fā)現(xiàn)時(shí)長(zhǎng)10 min時(shí)吸光度值達(dá)到峰值。故篩選出最佳超聲功率為70 W,用時(shí)10 min,波長(zhǎng)490 nm處。
1.2.2 樣品制備
選取一定量的干桃膠,對(duì)其進(jìn)行炒黃、炒焦、黃酒拌炒(桃膠∶黃酒=100∶20)、鹽水拌炒(桃膠∶食鹽=100∶2)、桑柴灰浸制(桃膠∶桑柴灰=50∶10),烘箱低溫干燥,稱取干燥后桃膠炮制品作為生品,用中草藥粉碎機(jī)研碎,再用研缽研細(xì),過80目藥典篩,制成桃膠粉末備用。
1.2.3 總糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定方法的建立
對(duì)照品溶液的制備:稱取D-無水葡萄糖[3]對(duì)照品10.02 mg,放入100 mL的容量瓶中,加超純水溶解,定容,搖勻,配制成濃度為0.100 2 mg·mL-1的對(duì)照品溶液。
供試品溶液制備:精密稱取各桃膠粉末0.01 g,置于50 mL錐形瓶中,加入超純水,超聲(功率70 W,
10 min)使溶解完全無顆粒,繼而轉(zhuǎn)移到100 mL的容量瓶中,加入適量超純水定容至刻度,上下混勻,配制成濃度為0.1 mg·mL-1的供試品溶液。
臨用前新配1 g·L-1硫酸蒽酮試劑[4]:精密稱取0.100 g
蒽酮粉末溶解于100 mL的新配置的80%硫酸中。
1.2.4 D-無水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
分別用移液管精密吸取對(duì)照品溶液0.2 mL、0.4 mL、
0.6 mL、0.8 mL和1.0 mL,置于10 mL具塞刻度試管中,搖勻,加超純水補(bǔ)充至1.0 mL,新配硫酸蒽酮試劑6 mL,待各試管加完后同時(shí)放入100 ℃水浴10 min,取出后迅速放入冰水浴10 min,冷卻至室溫;另取超純水
1.0 mL,加入上述同量的新配硫酸蒽酮試劑,同法操作,作為空白對(duì)照。于490 nm[5]處測(cè)定各個(gè)濃度下的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液的吸光度值。以D-無水葡萄糖濃度C(mg·mL-1)
為橫坐標(biāo),吸光度值A(chǔ)值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。計(jì)算得回歸方程:Y=7.5178X-0.0331(R2=0.980 2)。葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1。
精密吸取1.0 mL的6種樣品溶液于10 mL具塞刻度試管中,按上述方法操作并加入顯色劑顯色后于490 nm處測(cè)定各樣品吸光度值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程計(jì)算出各桃膠炮制品和生品中的總多糖含量。
2 結(jié)果與討論
如表1所示,分別取各桃膠的炮制品及生品的溶解液,在最大吸收波長(zhǎng)490 nm處測(cè)定吸光度值,發(fā)現(xiàn)酒制桃膠的吸光度最高,桃膠生品即干桃膠的吸光度最低。
由表1可知,經(jīng)過不同炮制方法炮制后的桃膠中總多糖含量各不相同,酒制桃膠的吸光度最高,炒焦其次,接著是炒黃、桑柴灰浸制,鹽制最低,但都要比桃膠生品的吸光度高。在一定溫度下桃膠中總多糖含量隨溫度升高而變多,黃酒能增加桃膠炮制品的多糖含量。
酒制桃膠的總多糖含量是這幾種炮制品中最高的,經(jīng)過重復(fù)性試驗(yàn),驗(yàn)證這個(gè)結(jié)果仍然成立,分析這是由于黃酒由谷物釀造而成,本身含有一部分多糖。而桃膠在黃酒悶潤(rùn)的過程中,使得其中的總多糖更容易提取出來。?;覝坪望}制的處理過程中沒有加熱的步驟,因此沒有溫度的變化,所以總多糖溶出量相對(duì)較少,但高于生品的總多糖溶出量,說明鹽制和桑柴灰有助于桃膠中多糖的溶出。
3 結(jié)論
不同炮制方法工藝和輔料處理后的桃膠,總多糖含量都有一定的變化。因此桃膠作為藥用,治療疾病時(shí),可以采取炮制后入藥。臨床選用桃膠用藥時(shí),應(yīng)該根據(jù)病人的病癥和病程而選用對(duì)應(yīng)的桃膠炮制品。
參考文獻(xiàn):
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[2] 丁成麗,劉力,李銀芳.正交試驗(yàn)優(yōu)選桃膠多糖超聲波輔助提取工藝[J].食品研究與開發(fā),2014,35(22):47-49.
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[4] 易劍平,畢雅靜,宋秀榮,等.蒽酮-硫酸法測(cè)定枸杞多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)的研究[J].北京工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2005,31(6):641-646.
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(責(zé)任編輯:趙中正)
收稿日期:2020-01-16
作者簡(jiǎn)介:蔡榮榮(1982—),女,浙江寧波人,碩士,實(shí)驗(yàn)師,研究方向?yàn)槭称坊瘜W(xué)與中藥化學(xué)。E-mail: cairr2012@163.com。