李會(huì)萍，鄭大勇，楊 帥，周云麗

（1.天津醫(yī)科大學(xué)寶坻臨床學(xué)院檢驗(yàn)科，天津 301800；2.天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，天津 300060）

1.2 方法

采用含分離膠的生化管采集所有對(duì)象空腹8 h以上的靜脈血，1 h內(nèi)1870×g離心10 min，分離血清。血清在2～8℃下可保存7 d，在-20℃可保存3個(gè)月。所有樣本均無(wú)溶血，避免加熱滅活和反復(fù)凍融。

采用ARCHITECT i2000SR全自動(dòng)免疫分析儀（美國(guó)雅培貿(mào)易公司）及配套試劑（化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法）檢測(cè)血清SCC-Ag、Pro-GRP、CEA及CYFRA21-1水平。采用cobas e411全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（瑞士羅氏公司）及配套試劑（電化學(xué)發(fā)光法）檢測(cè)血清NSE水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。呈正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以表示，2個(gè)組之間比較采用t檢驗(yàn)。呈非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以中位數(shù)（M）[四分位數(shù)

肺癌是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，具有極高的死亡率。近年來(lái)，肺癌的新發(fā)病例和病死率均呈增加趨勢(shì)[1]。肺癌按組織學(xué)分類可分為小細(xì)胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）和非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）。目前常用的肺部腫瘤標(biāo)志物有胃泌素釋放肽前體（pro-gastrin-releasing peptide，Pro-GRP）、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen，SCC-Ag）、細(xì)胞角蛋白19片段（cytokeratin 19-fragment，CYFRA21-1）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE），其中用于輔助診斷SCLC的腫瘤標(biāo)志物主要為NSE。1978年，MCDONALD等[2]首次從豬胃神經(jīng)纖維中分離到胃泌素釋放肽（gastrin-releasing peptide，GRP）。EDKINS[3]的研究結(jié)果顯示，GRP可由肺癌細(xì)胞自分泌產(chǎn)生，并通過(guò)自分泌途徑調(diào)節(jié)癌細(xì)胞生長(zhǎng)，在適當(dāng)條件下GRP會(huì)被釋放到組織中，從而通過(guò)旁分泌刺激腫瘤細(xì)胞的增殖。GRP在體外可促進(jìn)SCLC細(xì)胞的有絲分裂，但對(duì)鱗狀細(xì)胞癌或肺腺癌細(xì)胞無(wú)效[4]。Pro-GRP是GRP的前體，因此Pro-GRP可間接反應(yīng)GRP的表達(dá)水平。本研究擬探討Pro-GRP對(duì)SCLC的輔助診斷價(jià)值。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2015年1月—2018年3月天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院明確診斷為SCLC的患者96例（SCLC組），其中男72例、女24例，年齡34～85歲；包括局限期SCLC患者74例，廣泛期SCLC患者22例；其中有86例完成1個(gè)療程的化療。選取同期天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院明確診斷為NSCLC的患者63例（NSCLC組），其中男37例、女26例，年齡36～84歲。SCLC和NSCLC均經(jīng)病理證實(shí)。另選取同期天津醫(yī)科大學(xué)寶坻臨床學(xué)院體檢中心體檢健康者76名（正常對(duì)照組），其中男25名、女51名，年齡34～80歲。（P25～P75）]表示，組間比較采用非參數(shù)Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評(píng)價(jià)各項(xiàng)指標(biāo)診斷SCLC的價(jià)值。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SCLC組、NSCLC組及正常對(duì)照組各項(xiàng)指標(biāo)的比較

SCLC組和NSCLC組血清SCC-Ag水平高于正常對(duì)照組（P＜0.001），SCLC組與NSCLC組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。SCLC組血清Pro-GRP、NSE水平均高于正常對(duì)照組和NSCLC組（P＜0.001），正常對(duì)照組與NSCLC組之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。NSCLC組血清CEA、CYFRA21-1水平均高于正常對(duì)照組和SCLC組（P＜0.001），正常對(duì)照組與SCLC組之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 Pro-GRP、NSE與SCLC患者臨床基本特征的相關(guān)性

廣泛期SCLC患者血清Pro-GRP水平高于局限期SCLC患者（P＜0.01），不同性別、年齡（＜60歲、≥60歲）患者之間血清Pro-GRP、NSE水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表1 SCLC組、NSCLC組及正常對(duì)照組各項(xiàng)指標(biāo)的比較 M（P25～P75）

表2 不同臨床基本特征SCLC患者血清Pro-GRP、NSE水平的比較 M（P25～P75）

2.3 Pro-GRP、NSE對(duì)SCLC的診斷價(jià)值

ROC曲線分析結(jié)果顯示，Pro-GRP和NSE診斷SCLC的曲線下面積（area under curve，AUC）分別為0.960、0.849，最佳臨界值分別為76.31 ng/L、13.87 ng/mL，敏感性分別為84.5%、77.6%，特異性分別為98.6%、79.5%。見(jiàn)圖1。

2.4 SCLC患者化療前、后血清Pro-GRP、NSE水平的變化

SCLC患者化療后血清Pro-GRP、NSE水平低于化療前（P＜0.001），化療后血清Pro-GRP的下降比為68.75%（56.68%～79.88%），血清NSE的下降比為53.77%（43.43%～65.12%）。見(jiàn)表3。

圖1 Pro-GRP、NSE診斷SCLC的ROC曲線

表3 SCLC患者化療前、后血清Pro-GRP、NSE水平的變化 M（P25～P75）

3 討論

Pro-GRP是一種刺激腫瘤細(xì)胞增殖的生物活性蛋白，與GRP由同一種GRP基因編碼產(chǎn)生，由于GRP在體液中易被肽鏈端解酶快速降解，半衰期很短，在外周血中不容易被檢測(cè)到，所以常通過(guò)測(cè)定Pro-GRP來(lái)間接反映GRP水平。因此，Pro-GRP可以作為腫瘤標(biāo)志物。

目前，臨床上常用的肺部腫瘤標(biāo)志物有Pro-GRP、CEA、SCC-Ag、NSE、CYFRA21-1。美國(guó)臨床生化委員會(huì)和歐洲腫瘤標(biāo)志物專家組將Pro-GRP、CEA、SCC-Ag和CYFRA21-1推薦為常用的肺癌標(biāo)志物。高水平的CEA可能與肺腺癌[5]及SCLC有關(guān)。然而，CEA被更多地用于結(jié)腸直腸癌，在許多非腫瘤性疾病中也可觀察到CEA水平升高[6]。CYFRA21-1通常用于NSCLC，在SCLC中的應(yīng)用價(jià)值有限[7]。有研究結(jié)果顯示，CEA和CYFRA21-1在監(jiān)測(cè)NSCLC治療反應(yīng)方面均有一定的預(yù)測(cè)作用[8]。為此，本研究對(duì)Pro-GRP、CEA、SCC-Ag、NSE、CYFRA21-1在肺癌中的應(yīng)用進(jìn)行了探討。

本研究結(jié)果顯示，SCLC組血清Pro-GRP水平高于NSCLC組和正常對(duì)照組（P＜0.001），廣泛期SCLC患者血清Pro-GRP水平高于局限期SCLC患者（P＜0.01），提示Pro-GRP或能用于SCLC分期的判斷。有研究結(jié)果顯示，Pro-GRP在SCLC廣泛期和局限期的分類中表現(xiàn)出比NSE更高的敏感性[9-10]，與本研究結(jié)果一致。本研究結(jié)果還顯示，SCLC患者化療后血清Pro-GRP、NSE水平低于化療前（P＜0.001）。HOLDENRIEDER等[11]的研究結(jié)果顯示，在SCLC的治療監(jiān)測(cè)中，Pro-GRP比NSE更精確，并且測(cè)定Pro-GRP能更可靠地預(yù)測(cè)局限期SCLC患者的復(fù)發(fā)和預(yù)后。NISMAN等[12]的研究結(jié)果顯示，Pro-GRP與SCLC患者的2年生存期密切相關(guān)，可作為SCLC患者診斷和化療監(jiān)測(cè)的首選標(biāo)志物。有研究結(jié)果顯示，下調(diào)Pro-GRP的衍生物——GRP的表達(dá)可抑制SCLC生長(zhǎng)并促使腫瘤細(xì)胞凋亡[13]。GRP或可作為SCLC的自分泌生長(zhǎng)因子，Pro-GRP的生長(zhǎng)刺激特性也可能導(dǎo)致更具侵略性的腫瘤行為和患者更短的生存期。

本研究尚存在一定的局限性。首先，本研究為非隨機(jī)前瞻性研究，樣本量較小，因此結(jié)果可能不具有普遍性；其次，在對(duì)治療前后Pro-GRP水平的分析過(guò)程中，未對(duì)患者的治療方案等進(jìn)行更為詳細(xì)的分析，因此Pro-GRP用于治療監(jiān)測(cè)和判斷預(yù)后的有效性仍需要大樣本量的研究數(shù)據(jù)來(lái)加以證實(shí)。

綜上所述，Pro-GRP或可用于鑒別SCLC與NSCLC，其診斷SCLC的性能優(yōu)于NSE，對(duì)SCLC的治療監(jiān)測(cè)也有一定作用。