王麗， 朱兆云， 王京昆， 曾榕姍， 符德歡，朱高倩， 周培軍， 李雙良

（1.云南省藥物研究所，云南昆明 650111；2.云南白藥集團創(chuàng)新研發(fā)中心，云南昆明 650111；3.云南省中藥和民族藥新藥創(chuàng)制企業(yè)重點實驗室，云南昆明 650111；4.桂林醫(yī)學院，廣西桂林 541010）

烏頭藥用始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為下品[1]。烏頭屬植物多具有祛風除濕、散寒止痛的功效，可用于風寒濕痹、關(guān)節(jié)疼痛、心腹冷痛、寒疝作痛、麻醉止痛等[2]?！吨腥A人民共和國藥典》1990—2015 年版及《衛(wèi)生部藥品標準》第1 ～19冊中含有烏頭類的中成藥制劑約有340種，占比較大?？梢姙躅^屬植物有較高的藥用價值和開發(fā)前景。毛茛科烏頭屬植物全世界約有350種，我國約有167種，大多分布于云南北部、四川西部和西藏東部的高山地帶[3]。云南省成為烏頭屬植物的集中分布區(qū)域之一，約有66 種，25 變種，4 變形[4]。由于烏頭屬植物種類繁多，形態(tài)分類困難，藥材性狀相似，市場藥材難辨，品種使用混亂。本研究特選取滇產(chǎn)主流藥材黃草烏及同屬易混淆且文獻報道較少或未見報道的馬耳山烏頭和中甸烏頭進行生藥學比較，以期為澄清藥材混亂，以及進一步開發(fā)利用這3種滇產(chǎn)烏頭藥材提供鑒別依據(jù)，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 材料

1.1 藥材實驗藥材經(jīng)中國科學院華南植物園楊親二研究員鑒定，詳細信息見表1。

1.2 儀器TS-12A生物組織自動脫水機、BM-Ⅸ生物組織包埋機/包埋冷凍臺、QP-Ⅵ生物組織切片機、CS-IV 型生物組織攤片烤片機（湖北省孝感市宏業(yè)醫(yī)用儀器公司）；Nikon ECLIPSE E400 顯微鏡（日本尼康公司）。

1. 3 試劑無水乙醇（分析純，安徽安特生物化學有限公司）；石蠟（56～58 ℃，上海永華石蠟有限公司）；TO 型生物透明劑（廣西岑溪市松香廠）；番紅（上海三愛思試劑有限公司）；固綠（上海化學試劑站）；甘油（上海申博化工有限公司，批號:0605101）；中性樹膠（無錫市江原實業(yè)技貿(mào)總公司）；水合氯醛（上海善普化工科技有限公司）。

表1 3種烏頭藥材信息Table 1 The information of the three species of Aconitum materials

2 觀察內(nèi)容

2. 1 原植物鑒別通過觀察黃草烏、馬耳山烏頭、中甸烏頭原植物形態(tài)特征，發(fā)現(xiàn)其具有各自獨特的形態(tài)特征，可作為物種之間的區(qū)別點，主要表現(xiàn)在植物生長方式、葉及葉柄的長度等方面。3種烏頭屬植物形態(tài)特征比較見圖1、表2。

2. 2 性狀鑒別通過觀察黃草烏、馬耳山烏頭、中甸烏頭藥材性狀特征，包括形狀、表面顏色、須根疏密、側(cè)根多少、表面紋理等。發(fā)現(xiàn)3種烏頭藥材性狀特征存在一定的差異，主要表現(xiàn)在藥材表面顏色及側(cè)根數(shù)目等方面，其特征比較見圖2、表3。

2.3 顯微鑒別

2.3.1 塊根橫切面特征 相關(guān)文獻報道顯示，大多烏頭屬植物母根、子根的上、中、下段組織特征存在差異[5]。本研究針對黃草烏、馬耳山烏頭、中甸烏頭母根、子根的上、中、下段組織特征進行比較，觀察后生皮層、皮層細胞列數(shù)，石細胞多少，篩管群有無，形成層是否連續(xù)，維管束個數(shù)，木質(zhì)部導管排列形狀，髓部是否明顯等，結(jié)果發(fā)現(xiàn)3種烏頭在石細胞多少、篩管群有無、維管束個數(shù)等方面均存在差異。具體特征見圖3 ～8、表4。

表2 3種烏頭屬藥材植物形態(tài)特征Table 2 The appearance characteristics of the three species of Aconitum plants

圖2 3種烏頭藥材性狀圖Figure 2 The characteristics of the three kinds of Aconitum medicinal materials

2.3.2 塊根粉末特征 對3 種滇產(chǎn)烏頭塊根粉末進行水合氯醛及醋酸甘油制片后觀察，發(fā)現(xiàn)3種滇產(chǎn)烏頭塊根內(nèi)含物種類相同，均為后生皮層細胞、石細胞、淀粉粒、導管、纖維、薄壁細胞，僅在形狀或數(shù)量上有所不同，具體特征見圖9、表5。

表3 3種烏頭藥材性狀特征Table 3 The characteristics of the three kinds of Aconitum medicinal materials

3 討論

圖3 黃草烏母根上、中、下段橫切面特征圖（10×10）Figure 3 The cross-section characteristics of the upper，middle and lower sections of the mother roots of Aconitum vilmorinianum（10×10）

圖4 馬耳山烏頭母根上、中、下段橫切面特征圖（10×10）Figure 4 The cross-section characteristics of the upper，middle and lower sections of the mother roots of Aconitum delavayi（10×10）

本研究觀察了滇產(chǎn)3種烏頭藥材的原植物、性狀、顯微特征，結(jié)果表明，3 種烏頭無論植物形態(tài)特征、藥材性狀特征、橫切面組織構(gòu)造及粉末特征均存在差異。黃草烏為藤本、葉柄與葉片近等長，馬耳山烏頭為藤本或直立草本、葉柄比葉片長，中甸烏頭為直立草本、葉柄比葉片短；黃草烏側(cè)根少、黃褐色，馬耳山烏頭側(cè)根少、深褐色，中甸烏頭側(cè)根多、棕褐色；黃草烏、中甸烏頭、馬耳山烏頭子根、母根的上、中、下段維管束個數(shù)及排列、形成層環(huán)的形狀、篩管群的有無、淀粉粒形狀特征及數(shù)量均存在差異。本研究所列出3 種烏頭的鑒別點，可用于藥材的品種鑒定，澄清藥材品種混亂。

圖5 中甸烏頭母根上、中、下段橫切面特征圖（10×10）Figure 5 The cross-section characteristics of the upper，middle and lower sections of the mother roots of Aconitum piepunense（10×10）

圖6 黃草烏子根上、中、下段橫切面特征圖（10×10）Figure 6 The cross-section characteristics of the upper，middle and lower sections of the subroots of Aconitum vilmorinianum（10×10）

目前，烏頭類藥材生藥鑒定已報道20 余種[5-12]。本研究對滇產(chǎn)3 個物種生藥特征進行了初步鑒別，其中中甸烏頭為首次報道。烏頭類藥材種類繁多，為進一步完善烏頭屬植物的生藥學相關(guān)資料，烏頭屬未見報道物種還需進一步研究開發(fā)。

圖7 馬耳山烏頭子根上、中、下段橫切面特征圖（10×10）Figure 7 The cross-section characteristics of the upper，middle and lower sections of the subroots of Aconitum delavayi（10×10）

圖8 中甸烏頭子根上、中、下段橫切面特征圖（10×10）Figure 8 The cross-section characteristics of the upper，middle and lower sections of the subroots of Aconitum piepunense（10×10）

表4 3種烏頭藥材橫切組織特征Table 4 The cross-cutting characteristics of the three kinds of Aconitum materials

圖9 3種烏頭藥材粉末特征（10×40）Figure 9 The powder characteristics of the three Aconitum species（10×40）

表5 3種烏頭藥材粉末特征Table 5 The powder characteristics of the three Aconitum species