宋 羽，曲繼松，張麗娟，朱倩楠

(1.新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)作物品種資源研究所，烏魯木齊 830091；2寧夏農(nóng)林科學(xué)院種質(zhì)資源研究所，銀川 750002)

0 引 言

【研究意義】氮是植物體內(nèi)許多重要有機(jī)化合物的構(gòu)成成分，也是植物進(jìn)行光合作用起決定作用的葉綠素的組分，是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中消耗量和浪費(fèi)量最大的元素之一，被稱為生態(tài)系統(tǒng)中最為限制植物生長(zhǎng)發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)元素[1-3]。外源環(huán)境中的氮元素能夠影響植物光合生理特性[4-7]，葉綠素快速熒光動(dòng)力學(xué)技術(shù)被稱為研究植物光合功能的快速、無(wú)損傷探針，各種環(huán)境因素對(duì)植物光合作用的影響都能通過(guò)葉綠素?zé)晒鈪?shù)的變化反映出來(lái)，它可以監(jiān)測(cè)光合機(jī)構(gòu)的光合狀態(tài)，以一種快速、非侵入的方式發(fā)現(xiàn)各種脅迫條件下具有不同敏感性植物光合能力的變化[8]。研究氮素用量對(duì)設(shè)施韭菜氣體交換及葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響，對(duì)設(shè)施韭菜高效栽培有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】韭菜(Allium.tuberosumRottl.ex Spreng)屬百合科蔥屬多年生宿根性蔬菜，是中國(guó)的特產(chǎn)蔬菜，其風(fēng)味獨(dú)特、營(yíng)養(yǎng)豐富[9]。對(duì)韭菜的研究集中在栽培技術(shù)、形態(tài)發(fā)育規(guī)律、氮素營(yíng)養(yǎng)吸收及需氮規(guī)律等[10-14]?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】關(guān)于氮素用量對(duì)韭菜生物量積累速率及品質(zhì)的影響的研究報(bào)道較多，但對(duì)與光合生理方面的研究較少。研究不同氮素用量對(duì)設(shè)施韭菜、氣體交換及葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】設(shè)置氮素不同用量梯度處理,研究不同氮素用量對(duì)設(shè)施韭菜氣體交換及葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響，為設(shè)施韭菜優(yōu)質(zhì)高效栽培提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

試驗(yàn)地位于寧夏中衛(wèi)市沙坡頭區(qū)東園鎮(zhèn)韓閘村，地處寧夏引黃灌區(qū)西部，屬半干旱氣候，具有典型的大陸性季風(fēng)氣候和沙漠氣候特點(diǎn)；年平均降水量179.6 mm，多集中在6～8月，占全年降水量的60%，年平均蒸發(fā)量1 829.6 mm，為年平均降水量的10.2倍；年無(wú)霜期平均155 d；年日照時(shí)數(shù)2 870 h，年太陽(yáng)總輻射量24 572.2 kJ/cm2；年平均氣溫8.8℃，≥5℃積溫為3 300～3 800℃，≥10℃積溫為3 100～3 500℃。

供試韭菜為當(dāng)?shù)刂髟云贩N富韭10號(hào)。供試試驗(yàn)拱棚，寬度10 m，長(zhǎng)度80 m，脊高3.3 m，具保溫被，供試棚膜為聚乙烯棚膜。土壤基本理化性質(zhì)：有機(jī)質(zhì)量為11.4 g/kg、pH 值為7.75、全氮量為10.84 g/kg、全磷量為12.16 g/kg、全鉀量為18.95 g/kg、速效氮量為96.45 mg/kg、速效磷量為21.54 mg/kg、速效鉀量為143.27 mg/kg。

試驗(yàn)時(shí)間為2018年8月20日～2019年6月10日。隨機(jī)取組設(shè)計(jì)，每個(gè)小區(qū)10 m2，每個(gè)處理重復(fù)3次。表1

表1 試驗(yàn)處理設(shè)計(jì)Table 1 Test treatment design

1.2 方 法

1.2.1 氣體交換參數(shù)

凈光合速率、蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度、胞間CO2濃度等光合參數(shù)采用Li-6800光合測(cè)定儀測(cè)定，測(cè)定時(shí)溫室內(nèi)部光照強(qiáng)度為1 000±50 μmol/(m2·s)，CO2濃度為400±20 μmol/(m2·s)。測(cè)定葉片為每株韭菜最大1片完全展開(kāi)功能葉，每個(gè)處理小區(qū)測(cè)量5片葉片，隨機(jī)選擇。

1.2.2 葉綠素?zé)晒鈪?shù)

采用Li-6800光合測(cè)定儀測(cè)定韭菜葉片的熒光參數(shù)，測(cè)定前暗適應(yīng)15 min，利用配套軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，光下穩(wěn)態(tài)熒光、電子傳遞速率、光適應(yīng)下PSII反應(yīng)中心激發(fā)能捕獲效率、CO2同化的量子效率、非光化學(xué)淬滅系數(shù)和光化學(xué)淬滅系數(shù)直接從系統(tǒng)導(dǎo)出；測(cè)定時(shí)間為晴天10:00～12:00進(jìn)行，測(cè)定葉片為秧苗最高1片完全展開(kāi)功能葉，每個(gè)處理測(cè)量5片葉片，隨機(jī)選擇。

1.3 數(shù)據(jù)處理

每個(gè)樣本測(cè)量5次，結(jié)果取平均值。數(shù)據(jù)處理和作圖采用Excel2010軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 氮素用量對(duì)氣體交換的影響

研究表明,隨著氮素用量的不斷增加，設(shè)施韭菜的凈光合速率呈現(xiàn)先增大后減小的變化趨勢(shì)，其中處理U4的凈光合速率值最大，為14.40 μmol/(m2·s)，而處理U8的凈光合速率值最小，僅為8.80 μmol/(m2·s)，為處理U4的61.11%。通過(guò)相關(guān)非線性曲線方程y=-0.000 7x2+0.065 1x+12.68，當(dāng)?shù)赜昧繛?1.39 kg/(667m2·y)時(shí)，設(shè)施韭菜的凈光合速率將達(dá)到最大值。圖1

圖1 不同氮素用量下凈光合速率變化
Fig.1 Effects of nitrogen consumption on net photosynthetic rate of leek

韭菜葉片胞間CO2濃度在一定范圍內(nèi)(0～27.6 kg/(667m2·y)隨著氮素用量的增加而增加，當(dāng)?shù)赜昧砍^(guò)27.6 kg/(667m2·y)時(shí)，其值隨著氮素用量的增加而減??；當(dāng)?shù)赜昧繛?7.6 kg/(667m2·y)時(shí)，其胞間CO2濃度值最高，達(dá)到350.91 μmol/(m2·s)。由相關(guān)非線性曲線方程y=-0.008 0x2+0.799 8x+328.069 9，得出當(dāng)?shù)赜昧繛?2.99 kg/(667m2·y)時(shí)，設(shè)施韭菜的胞間CO2濃度達(dá)到最大值。圖2

圖2 不同氮素用量下胞間CO2濃度變化
Fig.2 Effects of nitrogen consumption on intercellular CO2concentration of leek

研究表明,當(dāng)?shù)赜昧吭?～36.8 kg/(667m2·y)時(shí)，隨著氮素用量的增加韭菜葉片蒸騰速率值逐漸增大，氮素用量為36.8 kg/(667m2·y)時(shí)，其蒸騰速率為8.769 mmol/(m2·s)。氮素用量超過(guò)36.8 kg/(667m2·y)之后，蒸騰速率逐漸降低。根據(jù)相關(guān)非線性曲線方程y=-0.000 9x2+0.132 0x+3.757 6，當(dāng)?shù)赜昧繛?3.73 kg/(667m2·y)時(shí)，韭菜葉片的蒸騰速率達(dá)到最大值。圖3

圖3 不同氮素用量下蒸騰速率變化
Fig.3 Effects of nitrogen application on transpiration rate

在氮素用量0～9.2 kg/(667m2·y)時(shí)隨著氮素用量增加而增加，大于9.2 kg/(667m2·y)之后，氣孔導(dǎo)度隨著氮素用量的增加而減小。氮素用量9.2 kg/(667m2·y)時(shí)氣孔導(dǎo)度值最大，為0.605 5 mol/(m2·s)，較處理U8高出264.54%。根據(jù)相關(guān)非線性曲線方程y= -0.000 014x2-0.000 816x+0.560 126，當(dāng)?shù)赜昧繛?3.40 kg/(667m2·y)時(shí)，韭菜葉片的氣孔導(dǎo)度達(dá)到最大值。圖4

圖4 不同氮素用量下氣孔導(dǎo)度變化
Fig.4 Effects of nitrogen application on stomatal conductance

圖5 不同氮素用量下光下穩(wěn)態(tài)熒光變化
Fig.5 Effects of nitrogen dosage on steady-state fluorescence under light.

2.2 氮素用量對(duì)葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響

研究表明,在氮素用量0～27.6 kg/(667m2·y)時(shí)，韭菜葉片光下穩(wěn)態(tài)熒光隨著氮素用量增加而增加，大于27.6 kg/(667m2·y)之后，隨著氮素用量的增加而減小。根據(jù)相關(guān)非線性曲線方程y= -0.000 018x2+0.002 476x+2.013 111，得出當(dāng)?shù)赜昧繛?1.63 kg/(667m2·y)時(shí)，韭菜葉片的光下穩(wěn)態(tài)熒光達(dá)到最大值。圖5

當(dāng)?shù)赜昧?～27.6 kg/(667m2·y)時(shí)其值變化為持續(xù)增加，在氮素用量為27.6 kg/(667m2·y)時(shí)，電子傳遞速率至最高，達(dá)到62.523，當(dāng)?shù)赜昧?7.6～64.4 kg/(667m2·y)時(shí)其值變化為持續(xù)減小，總體變化規(guī)律呈單峰曲線，相關(guān)非線性曲線方程y= -0.008 6x2+1.167 2x+17.558 3，根據(jù)一元二次方程的求得當(dāng)?shù)赜昧繛?1.22 kg/(667m2·y)時(shí)，韭菜葉片的電子傳遞速率達(dá)到最大值。圖6

圖6 不同氮素用量下電子傳遞速率變化
Fig.6 Effects of nitrogen dosage on electron transfer rate

光適應(yīng)下PSII反應(yīng)中心激發(fā)能捕獲效率變化規(guī)律亦呈單峰曲線，相關(guān)非線性曲線方程y= -0.039 5x2+5.483 9x+140.705 6，根據(jù)一元二次方程的求得當(dāng)?shù)赜昧繛?1.93 kg/(667m2·y)時(shí)，韭菜葉片的光適應(yīng)下PSII反應(yīng)中心激發(fā)能捕獲效率達(dá)到最大值，其推導(dǎo)值為331.042。圖7

圖7 不同氮素用量下光適應(yīng)下PSII反應(yīng)中心激發(fā)能捕獲效率變化
Fig.7 Effect of nitrogen dosage on excitation energy capture efficiency of PSII reaction

在CO2同化的量子效率方面，當(dāng)?shù)赜昧?～18.4 kg/(667m2·y)時(shí)，隨著氮素用量增加而增加。當(dāng)?shù)赜昧?8.4～36.8 kg/(667m2·y)時(shí)，其值差異不顯著，當(dāng)?shù)赜昧?6.8～64.4 kg/(667m2·y)時(shí)，隨著氮素用量增加而減小。根據(jù)相關(guān)非線性曲線方程y= -0.000 002x2+ 0.000 241x+ 0.037 469，得出當(dāng)?shù)赜昧繛?7.72 kg/(667m2·y)時(shí)，韭菜葉片的CO2同化的量子效率將達(dá)到推導(dǎo)最大值，為0.044 729 μmol/mol。圖8

圖8 不同氮素用量下CO2同化的量子效率變化
Fig.8 Effect of nitrogen dosage on variable fluorescence

隨著氮素用量的增加同樣呈現(xiàn)出先增加后減少的變化規(guī)律。當(dāng)?shù)赜昧?～27.6 kg/(667m2·y)時(shí)非光化學(xué)淬滅系數(shù)變化為持續(xù)增加，在氮素用量為27.6 kg/(667m2·y)時(shí)，電子傳遞速率至最高，達(dá)到0.588 4，當(dāng)?shù)赜昧?7.6～64.4 kg/(667m2·y)時(shí)其值變化為持續(xù)減小，總體變化規(guī)律呈單峰曲線，相關(guān)非線性曲線方程y= -0.000 045x2+0.006 738x+0.290 385，根據(jù)一元二次方程的求得當(dāng)?shù)赜昧繛?4.44 kg/(667m2·y)時(shí)，韭菜葉片的非光化學(xué)淬滅系數(shù)達(dá)到最大值。圖9

圖9 不同氮素用量下非光化學(xué)淬滅系數(shù)變化
Fig.9 Effect of nitrogen amount on non-photochemical quenching coefficient

光化學(xué)淬滅系數(shù)變化規(guī)律與與非光化學(xué)淬滅系數(shù)變化規(guī)律相似。當(dāng)?shù)赜昧?～36.8 kg/(667m2·y)時(shí)非光化學(xué)淬滅系數(shù)變化為持續(xù)增加，在氮素用量為36.8 kg/(667m2·y)時(shí)，電子傳遞速率至最高，達(dá)到0.050 3，當(dāng)?shù)赜昧?6.8～64.4 kg/(667m2·y)時(shí)其值變化為持續(xù)減小，相關(guān)非線性曲線方程y= -0.000 005x2+0.000 886x+0.009 863，根據(jù)方程求得當(dāng)?shù)赜昧繛?0.76 kg/(667m2·y)時(shí)，韭菜葉片的光化學(xué)淬滅系數(shù)達(dá)到最大值。圖10

圖10 不同氮素用量下光化學(xué)淬滅系數(shù)變化
Fig.10 Effect of nitrogen amount on photochemical quenching coefficient

3 討 論

光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物是植物生長(zhǎng)發(fā)育的物質(zhì)基礎(chǔ)。氮素則是植物體內(nèi)葉綠素和蛋白質(zhì)的重要組成元素，缺乏氮素會(huì)減少植物對(duì)光能的吸收并且降低PSⅡ反應(yīng)中心的活性[15]。將葉綠素?zé)晒庾鳛檠芯孔魑锶~片光合作用的探針，可反映出光反應(yīng)中光合機(jī)構(gòu)對(duì)光能的吸收、傳遞、分配、耗散等過(guò)程。

Chaerle 等[16]的研究發(fā)現(xiàn)，葉綠素?zé)晒鈩?dòng)力學(xué)指標(biāo)能準(zhǔn)確地反映出植物受脅迫的程度， 并以此來(lái)得出植物最佳生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)需求量，保證供給植物適宜的養(yǎng)分，葉綠素?zé)晒鈪?shù)(光下穩(wěn)態(tài)熒光、電子傳遞速率、光適應(yīng)下PSII反應(yīng)中心激發(fā)能捕獲效率、CO2同化的量子效率、非光化學(xué)淬滅系數(shù)和光化學(xué)淬滅系數(shù))的最適氮素用量在27.72～40.76 kg/(667m2·y)。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)施氮促進(jìn)葉綠素?zé)晒鈪?shù)變化與前人研究結(jié)果[17-20]一致。韭菜葉片凈光合速率、蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度、胞間CO2濃度等氣體交換參數(shù)隨著氮素濃度的增加均表現(xiàn)出先增加后減少的趨勢(shì)，這與關(guān)佳莉等[21]研究結(jié)果相一致。

4 結(jié) 論

4項(xiàng)光合參數(shù)(凈光合速率、胞間CO2濃度、蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度)的最適氮素用量為13.40～33.73 kg/(667m2·y)(即尿素施用量為29.14～73.33 kg/(667m2·y))，6項(xiàng)葉綠素?zé)晒鈪?shù)(光下穩(wěn)態(tài)熒光、電子傳遞速率、光適應(yīng)下PSII反應(yīng)中心激發(fā)能捕獲效率、CO2同化的量子效率、非光化學(xué)淬滅系數(shù)和光化學(xué)淬滅系數(shù))的最施氮素用量在27.72～40.76 kg/(667m2·y)(即尿素施用量為60.25～88.6 kg/(667m2·y))。因此，綜合光合參數(shù)與葉綠素?zé)晒鈪?shù)推薦寧夏地區(qū)設(shè)施韭菜氮素用量為27.72～33.73 kg/(667m2·y)(即尿素施用量為60.25～73.33 kg/(667m2·y))為宜。