黃全勇 林文耀/金宇保靈生物藥品有限公司 010030

余鋒 周細(xì)練 劉勁超 曹登博/江西省南昌市智弘牧業(yè)有限公司 330000

疾病是制約現(xiàn)代化養(yǎng)豬業(yè)的重大因素之一，特別是口蹄疫、豬瘟、偽狂犬和藍(lán)耳病等烈性傳染病，給養(yǎng)殖業(yè)帶來了嚴(yán)重的困擾。近年來，隨著非洲豬瘟在中國的蔓延以及多方面的原因，中國的生豬產(chǎn)業(yè)面臨著嚴(yán)峻考驗(yàn)。在防治疾病方面，免疫預(yù)防依然是豬場最常用的方式。影響免疫效果的因素有很多，而血清學(xué)抗體檢測就是檢驗(yàn)豬場免疫效果的重要手段。通過血清學(xué)抗體檢測可以實(shí)時監(jiān)測群體免疫狀況，了解豬群免疫水平，及時發(fā)現(xiàn)問題及潛在風(fēng)險，從而能夠更好地指導(dǎo)豬場制定科學(xué)的疫病防控計劃。

本文對某規(guī)?；i場進(jìn)行了口蹄疫、豬瘟、偽狂犬以及藍(lán)耳病的血清學(xué)抗體檢測，現(xiàn)將結(jié)果和數(shù)據(jù)統(tǒng)計如下。

1 材料方法

1.1 豬場背景該豬場現(xiàn)存欄母豬1000頭，采取一點(diǎn)式飼養(yǎng)模式，自繁自養(yǎng)，全進(jìn)全出。仔豬21d斷奶，70日齡轉(zhuǎn)入育肥舍，保育豬后期出現(xiàn)豬群掉隊(duì)不好養(yǎng)現(xiàn)象。

1.2 疫苗免疫程序豬場口蹄疫使用的是豬口蹄疫O、A二價滅活疫苗（金OA）、豬瘟使用豬瘟活疫苗（傳代細(xì)胞源）、偽狂犬使用豬偽狂犬病耐熱保護(hù)劑活疫苗（C株）、藍(lán)耳病使用豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗（NVDC-JXA1株）。

豬瘟免疫程序：母豬、公豬3次/年；后備豬15周首免，24周二免；仔豬4周首免，8周二免，免疫劑量均為1頭份/次。

口蹄疫免疫程序：母豬、公豬3次/年；后備豬配種前30d加免一次；仔豬8周首免，12周二免，免疫劑量均為1頭份/次。

偽狂犬免疫程序：母豬、公豬3次/年；后備豬配種前免疫兩次；仔豬出生1～3天噴鼻，7周首免，13周二免，免疫劑量均為1頭份/次。

藍(lán)耳病免疫程序：母豬、公豬3次/年；后備豬配種前免疫兩次；仔豬3周免疫，免疫劑量均為1頭份/次。

1.3 樣品采集采樣按照隨機(jī)采樣原則，仔豬2周、4周、7周、10周、13周、16周、20周、24周各10份血樣；后備母豬10份血樣；1～2胎次母豬、3～4胎次、5-6胎次、6胎以上各9份血樣；公豬17份血樣。血樣采集完成，靜置分層后分離血清，送實(shí)驗(yàn)室檢測。

1.4 檢測方法

1.4.1 樣品保存方法收到樣品后 48h內(nèi)檢測可存在于4℃，否則保存于-20℃冰箱。

1.4.2 檢驗(yàn)過程應(yīng)用 ELISA 試劑盒方法檢測特定抗體或抗原。在酶標(biāo)儀上檢測各孔指定波長OD值，根據(jù)試劑盒相應(yīng)要求計算出對應(yīng)的檢測結(jié)果。

口蹄疫（FMD）抗體檢測試劑盒、藍(lán)耳病病毒（PRRSV）抗體檢測試劑盒、豬偽狂犬GE抗體試劑盒由金邁詩公司生產(chǎn)；豬瘟病毒（CSFV）抗體檢測試劑盒由IDEXX 公司生產(chǎn)；豬偽狂犬GB抗體試劑盒由biochek 生產(chǎn)，操作方法以及結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)參照試劑盒說明書。

2 結(jié)果與分析

2.1 口蹄疫抗體檢測結(jié)果與分析

表1 口蹄疫抗體檢測結(jié)果

由表1可知，整個豬群O型＞ 1 ∶ 64抗體達(dá)到 90%以上，完全超過國家規(guī)定的O型1 ∶ 4抗體有70%的保護(hù)率的標(biāo)準(zhǔn)。對于A型來言，張永光研究員發(fā)現(xiàn)，由于A型的免疫原型好1 ∶ 32抗體水平也有70%保護(hù)率，而本場A型1 ∶ 32以上的陽性率也遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過90%。由此說明口蹄疫疫苗免疫有效，能完全實(shí)現(xiàn)保護(hù)，且保護(hù)效果很好。經(jīng)產(chǎn)母豬陽性率能達(dá)到100%，整齊度高，遠(yuǎn)超國家標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 豬瘟抗體檢測結(jié)果與分析

表2 豬瘟抗體檢測結(jié)果

由表2可知，種豬群抗體陽性率達(dá)到98%以上，高于國家制定的種豬群抗體陽性率達(dá)到90%的要求。商品豬群抗體陽性率達(dá)到76%以上，也符合國家制定的商品豬群抗體陽性率達(dá)到70%的要求。由免疫程序得知，豬瘟4周首免，8周二免，而7周抗體平均阻斷率較高，可能是批次間差異，或者是疫苗與母源抗體共同起作用的結(jié)果。從表2得知，13周陽性率較低，變異系數(shù)較大，可能是批次個體間差異或者藍(lán)耳病干擾導(dǎo)致。后備母豬有個別豬瘟免疫不合格，建議補(bǔ)免，豬瘟抗體合格后方可進(jìn)入生產(chǎn)群。6胎以上母豬群抗體數(shù)值下降，很有可能和體況健康狀態(tài)有關(guān)，也有可能是因?yàn)槊庖叽螖?shù)過多產(chǎn)生免疫麻痹。

2.3 藍(lán)耳病抗體檢測結(jié)果與分析

表3 藍(lán)耳病抗體檢測結(jié)果

從免疫程序得知該豬場一年免疫3次藍(lán)耳病疫苗，而由表3可知，種豬抗體值普遍較低，種豬群處于非常危險的處境，得知疫苗免疫失敗，效果不理想。豬群在10周齡出現(xiàn)陽轉(zhuǎn)，S/P均值大于2，抗體值較高，且一直持續(xù)到24周齡說明藍(lán)耳病壓力很大，此階段病毒血癥明顯。后續(xù)了解到該豬場20～40kg豬群出現(xiàn)死淘率較高等豬群不好養(yǎng)現(xiàn)象，更是印證該場藍(lán)耳病活躍的事實(shí)。PRRS是豬場危害較重的傳染病之一，多發(fā)于夏秋季節(jié)。對于本場藍(lán)耳病來說，除了用常規(guī)的替米考星等藥物防控，還是應(yīng)該以疫苗免疫為主，建議使用新型藍(lán)耳病嵌合病毒活疫苗（PC株），因?yàn)樗坏鉀Q了藍(lán)耳病疫苗交叉保護(hù)性差的缺點(diǎn)，更是利用反向遺傳技術(shù)，將經(jīng)典株（SP株）的部分基因與變異株（GD株）的部分基因重組成嵌合病毒疫苗，免疫后既能防控經(jīng)典毒株的感染，也能防控變異毒株的感染。另外PC株還加入了一段鑒別基因，通過檢測能區(qū)分野毒和疫苗毒，可為豬場藍(lán)耳病病毒的控制與凈化增添新的手段。

2.4 偽狂犬抗體檢測結(jié)果與分析

表4 偽狂犬GE、GB抗體檢測結(jié)果

由表4可知，該豬場偽狂犬GE抗體陽性率為0，說明該場是偽狂犬陰性場，偽狂犬病毒不會對該場造成危害，種豬群GB抗體陽性率是100%，說明疫苗起到了有效的保護(hù)。由表4可知，從2周到10周GB抗體滴度持續(xù)下降，其主要原因是母源抗體隨時間在不斷降低。7周和10周GB抗體陽性率維持在90%以上，抗體滴度呈現(xiàn)下降趨勢，13周齡時，抗體滴度回升。結(jié)合該豬場7周齡首免偽狂犬疫苗，13周齡二免疫苗程序，建議偽狂犬一免疫時間向后推遲2周，二免時間可以維持不變。

3 小結(jié)

規(guī)模養(yǎng)殖是時代發(fā)展的必然趨勢，面對當(dāng)前豬場疾病的復(fù)雜多變，很多臨床診斷也愈發(fā)困難，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，血清學(xué)檢測更是成為了當(dāng)下規(guī)?；B(yǎng)殖場不可缺少的疾病監(jiān)測和診斷的手段。如何有效的利用疫苗免疫和血清學(xué)檢測來預(yù)防傳染性疾病就成為了養(yǎng)豬人一直思考的問題，定期對豬場進(jìn)行抽血采樣，檢測不同階段豬群的抗體水平，合理調(diào)整豬群的免疫程序，不乏是一種明知的手段。