崔改華

(漯河市郾城區(qū)人民醫(yī)院病理科， 河南 漯河 462300)

宮頸癌發(fā)展中國家發(fā)病率較高，嚴(yán)重威脅婦女生命安全[1-2]。早期篩查可有效控制宮頸癌的進(jìn)一步發(fā)展，使患者生命質(zhì)量及生存率大大提高，所以提高女性的自我保護(hù)意識與定期體檢顯得尤為重要[3]。熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(heat shock transcription factor 1，HSF1)是熱休克蛋白表達(dá)的主要調(diào)控因子，控制著多種基因的表達(dá)，常以無活性單體的形式存在于細(xì)胞質(zhì)中。熱休克反應(yīng)是一種以基因表達(dá)變化為特征的防御適應(yīng)反應(yīng)，當(dāng)生物細(xì)胞處于高溫、感染等極端情況時就會觸發(fā)這種反應(yīng)[4-5]。當(dāng)發(fā)生熱休克反應(yīng)時HSF1會迅速活化并移入細(xì)胞核內(nèi)參與反應(yīng)，以此來加強(qiáng)自身抗損傷能力。本研究根據(jù)宮頸癌患者檢測現(xiàn)狀，探討HSF1對宮頸癌患者臨床病理特點(diǎn)與預(yù)后的影響，報道如下。

1 對象與方法

1.1 對象 選取2014年1月—2017年1月漯河市郾城區(qū)人民醫(yī)院診治的102例宮頸癌鱗癌患者為研究對象，國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)宮頸癌分期范圍為ⅠA～ⅡA期。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合衛(wèi)生部宮頸癌診療指南(2013年版)的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]。②年齡<75歲。③患者未接受過放射療法(放療)和化療。④患者及其家屬知情并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有嚴(yán)重腎臟等疾病者。②有精神、意識障礙者。③嚴(yán)重先天性心臟病患者。本研究經(jīng)院倫理委員會審核通過。患者年齡28～46(35.24±12.03)歲，病程1～3(2.04±0.47)a。

1.2 方法

1.2.1 樣本處理和免疫組織化學(xué)染色 HSF1主要表達(dá)于細(xì)胞核，樣本經(jīng)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%甲醛溶液充分固定，石蠟包埋、切片，使用常規(guī)0.3%Triton破膜，并使用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%過氧化氫阻止內(nèi)源性過氧化物酶活性增加。加入兔抗人HSF1克隆抗體(上海信裕生物科技有限公司)后4 ℃孵育，進(jìn)行DAB顯色，沖洗干凈后蘇木精復(fù)染，完成后進(jìn)行梯度乙醇脫水干燥操作，中性樹膠封片后進(jìn)行鏡檢。使用高倍鏡隨機(jī)觀察4個視野，并對HSF1進(jìn)行評價。

1.2.2 評價指標(biāo) ①HSF1表達(dá)評價[7]：對HSF1染色強(qiáng)度進(jìn)行分級和陽性細(xì)胞百分比評分，染色強(qiáng)度為無色：0分；淡黃色：1分；棕黃色：2分；棕褐色：3分。陽性細(xì)胞所占百分比評分標(biāo)準(zhǔn)為：>75%為4分，50%～75%為3分，25%～49%為2分，10%～24%為1分，0%～9%為0分，將染色強(qiáng)度分?jǐn)?shù)及陽性細(xì)胞所占百分比分?jǐn)?shù)相乘得出總HSF1表達(dá)分?jǐn)?shù)，共12分。②患者生存分析：采用隨訪、復(fù)診的方式對患者是否出現(xiàn)疾病轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)、死亡等情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并記錄隨訪時間、隨訪率、病死率等信息，隨訪時間為6個月。

2 結(jié)果

2.1 宮頸癌患者臨床特點(diǎn)及病理與HSF1表達(dá)的關(guān)系 HSF1表達(dá)水平在不同肌層浸潤程度、不同F(xiàn)IGO分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是否為陽性的患者中均有差異，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HSF1高表達(dá)多見于脈管癌栓陽性及病理分期G3，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。典型的HSF1表達(dá)免疫組化圖片見圖1。

2.2 宮頸癌患者隨訪生存情況分析 本研究102例宮頸癌患者中，隨訪成功78例，隨訪成功率為76.47%。隨訪期間發(fā)生3例疾病轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)，疾病轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)率為3.85%；發(fā)生2例宮頸癌患者死亡，6個月隨訪病死率為1.28%。

2.3 影響宮頸癌患者預(yù)后的logistic多因素回歸分析 建立非條件logistic回歸模型，以本研究資料為樣本，以宮頸癌患者預(yù)后狀況為應(yīng)變量，賦值1=預(yù)后不好(轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)或死亡)，0=好。以HSF1表達(dá)及前述單因素分析(表1)中P<0.01的指標(biāo)/因素為自變量。回歸過程采用逐步后退法，以進(jìn)行自變量的選擇和剔除，設(shè)定α剔除=0.01，α入選=0.05。 回歸結(jié)果：共有HSF1表達(dá)、肌層浸潤及FIGO分期等3個變量被保留入回歸方程(P<0.05，OR>1)。提示HSF1表達(dá)與肌層浸潤、FIGO分期等均是影響宮頸癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險因素(P<0.05)。見表2。

表1 宮頸癌患者臨床特點(diǎn)及病理與HSF1表達(dá)的關(guān)系比較

注：A：高表達(dá)(陽性)； B：低表達(dá)

圖1 免疫組化檢測HSF1在宮頸癌組織中的表達(dá)(×200)

表2 影響宮頸癌患者預(yù)后的logistic多因素回歸分析

3 討論

宮頸癌由于發(fā)病率高、病死率高，一直是臨床關(guān)注的重要惡性腫瘤之一。臨床上治療宮頸癌一般采用手術(shù)的方式，雖然部分患者無復(fù)發(fā)或無轉(zhuǎn)移的因素，但是仍有患者手術(shù)后出現(xiàn)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的現(xiàn)象，這也是宮頸癌復(fù)發(fā)或者轉(zhuǎn)移的尚未明確的難題之一[8]。研究[9-10]顯示，宮頸癌不同程度肌層浸潤可能是宮頸癌患者復(fù)發(fā)或者轉(zhuǎn)移的潛在因素，而引發(fā)宮頸癌不同程度浸潤可能才是導(dǎo)致宮頸癌患者術(shù)后發(fā)生轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的真正原因。目前臨床上宮頸癌復(fù)發(fā)或者轉(zhuǎn)移的標(biāo)記尚未完全確定，但HSF1用于不同惡性腫瘤浸潤程度的研究不斷開展。HSF1是一種調(diào)控真核生物熱休克反應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子，能夠?qū)㈤g質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行重新編程，從而促使惡性腫瘤的形成。HSF1激活時表現(xiàn)為重金屬污染、低pH值、高溫等，HSF1激活后會對蛋白質(zhì)造成損傷，而研究數(shù)據(jù)[11-12]表明，腫瘤細(xì)胞中HSF1表達(dá)顯著高于非腫瘤細(xì)胞中的HSF1表達(dá)。當(dāng)HSF1發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，蛋白質(zhì)受到損傷時，HSF1會進(jìn)一步發(fā)生腫瘤細(xì)胞的代謝紊亂，且進(jìn)一步破壞蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性，為腫瘤細(xì)胞的生存和增殖提供了良好的發(fā)育環(huán)境。目前有研究[13]顯示，HSF1表達(dá)越高，患者術(shù)后越有可能出現(xiàn)不良預(yù)后，因此進(jìn)行HSF1檢測與評價對分析宮頸癌患者病理特點(diǎn)及預(yù)后具有重要意義。本院根據(jù)HSF1特點(diǎn)及宮頸癌患者術(shù)后可能發(fā)生轉(zhuǎn)移或者復(fù)發(fā)的現(xiàn)狀組織研究并取得一定的效果。

宮頸癌患者癌組織HSF1高表達(dá)與癌細(xì)胞深肌層浸潤、FIGO分期中的ⅠB期呈顯著相關(guān)關(guān)系，而HSF1高表達(dá)多見于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性、脈管癌栓陽性及病理分期G3，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？赡茉蚴菍m頸癌除了細(xì)胞惡性增殖外，浸潤及轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的主要特征。而一般術(shù)后患者是否需要進(jìn)行補(bǔ)充治療等，主要依靠術(shù)后病理報告中復(fù)發(fā)風(fēng)險的評估，如腫瘤浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等[14],本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)HSF1高表達(dá)與腫瘤浸潤程度呈顯著相關(guān)關(guān)系，提示HSF1可能參與宮頸癌癌細(xì)胞浸潤。logistic多因素回歸結(jié)果分析顯示，HSF1表達(dá)是影響宮頸癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險因素。本研究中隨訪期間發(fā)生3例疾病轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)，疾病轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)率較低，同時發(fā)生1例宮頸癌患者死亡，6個月隨訪病死率為1.28%，宮頸癌患者術(shù)后病死率較低,其結(jié)果與多項(xiàng)研究[15]結(jié)果基本一致。本次研究存在一定不足，如選取的病例數(shù)量較少，較少的樣本提供的數(shù)據(jù)具有一定的片面性，且未長期對宮頸癌患者術(shù)后轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)情況和病死率進(jìn)行跟蹤調(diào)查，需要在今后的研究中不斷完善。

綜上所述，HSF1高表達(dá)與癌細(xì)胞深肌層浸潤及FIGO分期中ⅠB期密切相關(guān)，且HSF1表達(dá)是影響宮頸癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險因素，但對癌細(xì)胞浸潤肌體機(jī)制需進(jìn)一步論證。