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        白菜凍干粉降糖作用的初步藥效學(xué)研究

        2020-05-13 11:59:32劉鈺瑩段玉樺湯凌燕陳曉青凌智群
        蔬菜 2020年5期
        關(guān)鍵詞:血糖值高糖高脂

        劉鈺瑩,王 宏,段玉樺,湯凌燕,陳曉青,黃 文,凌智群*

        (1.江漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院,湖北 武漢 430056;2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院,湖北 武漢 430070)

        《食療本草》:“菘菜,治消渴”,“菘菜”是指十字花科蕓薹屬白菜類(lèi)蔬菜中的青菜(Brassica chineninL.)和結(jié)球白菜(B.pekinensisRupr.)[1-2]。文獻(xiàn)顯示在地中海飲食中,十字花科蔬菜(其中包含white cabbage)在防治慢性疾病如糖尿病、肥胖等中扮演著重要的角色[3-4]。

        糖尿病屬于中醫(yī)“消渴病”的范疇,中醫(yī)藥在治療消渴病方面有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和療效。糖尿病前期是介于糖尿病與正常糖代謝之間的一種狀態(tài),中醫(yī)學(xué)提倡“防未病”理念,在糖尿病前期這個(gè)階段若能及時(shí)運(yùn)用具有中醫(yī)特色的干預(yù)措施,如藥食同源的食療,不僅能夠減少糖尿病進(jìn)一步發(fā)展以及相關(guān)不良作用的產(chǎn)生,還能減輕社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[5]。鑒于國(guó)內(nèi)沒(méi)有大白菜、卷心菜等白菜類(lèi)蔬菜對(duì)糖尿病前期血糖影響的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道,本文初步探討自制白菜類(lèi)作物凍干粉(Chinese Cabbage Freeze-Dried Powder,CCFDP)對(duì)高糖高脂飼料飼養(yǎng)小鼠血糖、血脂的影響。

        1 材料和方法

        1.1 試驗(yàn)材料

        1.1.1 材料與試劑

        新鮮白菜類(lèi)蔬菜:市售白菜;無(wú)特定病原體(Specific Pathogen Free,SPF)級(jí)試驗(yàn)動(dòng)物雄性昆明小鼠(華中科技大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,許可證號(hào):SCXK(鄂)2016-0009)。

        總膽固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、高密脂蛋白(HDL-C)、低密脂蛋白(LDL-C)試劑盒(酶標(biāo)儀法):均來(lái)自南京建成生物工程研究所;高糖高脂滅菌全價(jià)飼料(萬(wàn)千佳興生物科技有限公司,產(chǎn)品批號(hào):190001104),配方如下:基礎(chǔ)料(47.71%),蔗糖(14.31%),豬油(10.50%),蛋黃粉(20.04%),膽固醇(1.43%),膽酸鈉(0.286%),酪蛋白(0.954%),進(jìn)口魚(yú)粉(4.77%);普通維持飼料(華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心);其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

        1.1.2 試驗(yàn)儀器

        OneTouch Verio Flex血糖儀和血糖試紙(強(qiáng)生中國(guó)醫(yī)療器材有限公司);萬(wàn)分之一電子計(jì)數(shù)天平(梅特勒-托利多儀器上海有限公司)。

        1.2 試驗(yàn)方法

        1.2.1 CCFDP的制備方法

        CCFDP制備程序依次為:新鮮白菜類(lèi)蔬菜去掉蟲(chóng)癭腐爛葉→清洗干凈→切成丁條狀→粉碎成粉末漿→快速冷凍至白菜粉漿中心溫度為-20 ℃以下→真空冷凍干燥→產(chǎn)品4 ℃密閉干燥保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物條件和分組

        SPF級(jí)雄性昆明小鼠,體重18~22 g,室溫(20±2)℃,相對(duì)濕度45%~55%,光照時(shí)間7:00—19:00,自由飲食和飲水。適應(yīng)環(huán)境5 d后,測(cè)其空腹血糖和餐后2 h的血糖,篩掉血糖過(guò)高或過(guò)低的小鼠,且剩余合格小鼠餐后2 h血糖值沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

        將合格的90只小鼠隨機(jī)分為6組:正常對(duì)照組、高糖高脂飼料飼養(yǎng)造模對(duì)照組、造模+同時(shí)口服灌胃CCFDP低劑量水溶液組(150 mg/(kg·d))、造模+同時(shí)口服灌胃CCFDP高劑量水溶液組(1 500 mg/(kg·d))、造模+造模15 d后再同時(shí)口服灌胃CCFDP低劑量水溶液組(150 mg/(kg·d))、造模+造模15 d后再同時(shí)口服灌胃CCFDP高劑量水溶液組(1 500 mg/(kg·d)),見(jiàn)表1。各口服灌胃CCFDP組每天口服灌胃1次,正常對(duì)照組及造模對(duì)照組灌胃等體積生理鹽水。

        1.2.3 血糖采集和測(cè)定

        在連續(xù)口服灌胃CCFDP水溶液45 d或30 d后的第2天,在各組小鼠餐后2 h,取小鼠的尾端靜脈血檢測(cè)血糖值。其后,摘眼球采血后脫臼處死,4 ℃靜置1 h后3 000 r/min離心5 min,收集血清,-20 ℃貯藏備用。并在采樣后2 d內(nèi),參照試劑盒說(shuō)明書(shū)指導(dǎo)檢測(cè)血清中T-CHO、TG、HDL-C、LDL-C等指標(biāo)。

        表1 造模及口服灌胃方法

        1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        試驗(yàn)結(jié)果采用X±SD表示,采用Excel進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,比較組間差異,P<0.01為具有極顯著差異,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 CCFDP對(duì)高糖高脂飼料飼養(yǎng)小鼠餐后2 h血糖的影響

        表2中數(shù)據(jù)顯示:與正常對(duì)照組相比,高糖高脂飼料飼養(yǎng)造模對(duì)照組小鼠餐后2 h血糖值顯著升高,符合糖尿病前期血糖值的范圍要求。造模+同時(shí)高、低口服灌胃CCFDP水溶液45 d組小鼠餐后2 h血糖值顯著低于造模組;造模+造模15 d后再同時(shí)口服灌胃CCFDP高、低劑量30 d組的餐后血糖值與造模小鼠餐后值有顯著差異。數(shù)據(jù)結(jié)果還提示:口服灌胃CCFDP水溶液,不僅可以降低糖尿病前期血糖值,而且可以使得造模給藥小鼠血糖值比正常對(duì)照組小鼠血糖值還低,與造模前小鼠(正常小鼠,7周前)餐后血糖值相似,在6.0~7.3 mmol/L左右的區(qū)間范圍。

        2.2 CCFDP對(duì)高糖高脂飼料飼養(yǎng)小鼠餐后2 h血脂的影響

        表2中數(shù)據(jù)顯示:與正常對(duì)照組相比,高糖高脂飼料飼養(yǎng)造模對(duì)照組小鼠餐后2 h血清T-CHO、TG、HDL-C、LDL-C值升高顯著。與造模對(duì)照組比較,造模+同時(shí)高、低口服灌胃CCFDP水溶液45 d組小鼠餐后2 h血清TG值顯著降低,相應(yīng)的低劑量組LDL-C值顯著降低;造模+造模15 d后再同時(shí)口服灌胃CCFDP高、低劑量30 d組的餐后血清LDL-C值與造模小鼠餐后值顯著降低,相應(yīng)的高劑量組TG值顯著降低,T-CHO、HDL-C這2個(gè)指標(biāo)變化不明顯。從表2中數(shù)據(jù)來(lái)看,低劑量口服CCFDP 30 d對(duì)TG沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)影響,高劑量口服CCFDP 45 d對(duì)LDL-C沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)影響,因此可以說(shuō)明:在一定的給藥濃度范圍內(nèi)能影響血清TG、LDL-C值。

        3 結(jié)論與討論

        餐后血糖是早期診斷糖尿病的重要指標(biāo),代表著葡萄糖負(fù)荷后的血糖水平,也對(duì)預(yù)防糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生有著重要作用。本次試驗(yàn)造模所采用的方法是通過(guò)長(zhǎng)時(shí)間高糖高脂飼料飼養(yǎng)引起小鼠的血糖升高,模擬平時(shí)飲食偏愛(ài)高熱量高甜度的人群習(xí)慣,因而導(dǎo)致早期糖尿病血糖變化。盡管試驗(yàn)結(jié)果顯示150 mg/(kg·d)CCFDP同時(shí)口服灌胃45 d或1 500 mg/(kg·d)CCFDP在高糖高脂飼料飼養(yǎng)15 d后再同時(shí)口服灌胃30 d都能有效降低高糖高脂飼料飼養(yǎng)小鼠的餐后血糖值以及血清總甘油三酯和低密脂蛋白,但似乎沒(méi)有量效關(guān)系,提示其作用機(jī)理可能與傳統(tǒng)的降糖化合物的作用機(jī)制不同[8-10],相關(guān)機(jī)制尤其是涉及鈉-葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2的研究還有待進(jìn)一步深入研究。此外,CCFDP對(duì)總膽固醇血清值似乎沒(méi)有影響,可能是因?yàn)樵贑CFDP水溶液中纖維素的溶解性低所致。

        表2 各組小鼠的餐后2 h血糖值以及血清T-CHO、TG、HDL-C、LDL-C值 mmol/L

        綜上所述,低劑量CCFDP能顯著降低高糖高脂飼料飼養(yǎng)小鼠的餐后血糖,對(duì)于早期糖尿病餐后血糖有一定的防治效果,為糖尿病早期防治提供參考。若能對(duì)藥食同源白菜類(lèi)蔬菜中化學(xué)成分如膳食纖維、維生素、多酚類(lèi)化合物、硫代葡萄糖苷等諸多成分的活性或活性協(xié)同作用進(jìn)一步深入系統(tǒng)研究,無(wú)論在種植還是在后期加工的過(guò)程中,都可以為構(gòu)建類(lèi)似中藥全程質(zhì)量控制體系標(biāo)準(zhǔn)提供一定的數(shù)據(jù)參考和理論基礎(chǔ)。

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