馮典興, 岳宇微, 黃國(guó)堯, 孫大鵬

(沈陽(yáng)大學(xué) 遼寧省城市有害生物治理與生態(tài)安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 遼寧 沈陽(yáng) 110044)

死亡時(shí)間在刑事案件偵破中有著重要的作用.近年來(lái),利用蠅蛆的生長(zhǎng)發(fā)育資料推斷尸體死亡時(shí)間已被證明是有效的方法,成為法醫(yī)昆蟲學(xué)研究的熱點(diǎn)[1-2].通常,最先到達(dá)地面裸露尸體的種類是麗蠅和麻蠅.因此,在推斷死亡時(shí)間時(shí)主要依靠這些大型蠅類的發(fā)育資料.掩埋是一種常用的處理尸體的方式[3].對(duì)于土埋尸體,特別是掩埋較深時(shí),很難見到大型的蠅類,代替出現(xiàn)的是蚤蠅科、小糞蠅科和蠅科等小型的蠅類,其中蚤蠅是出現(xiàn)頻次最高的種類[4].

墓地柵蚤蠅D.funebris(Meigen)隸屬于雙翅目蚤蠅科,廣泛分布在韓國(guó)全羅北道地區(qū)[5-6].Buck[7]報(bào)道在豬的肝腎及蝸牛的腐肉上發(fā)現(xiàn)墓地柵蚤蠅幼蟲.Disney[8]在鴨和羊的尸體上發(fā)現(xiàn)該種.在我國(guó),該種在遼寧、內(nèi)蒙古、北京、甘肅等地分布,鄒天路等[9]在沈陽(yáng)地區(qū)地下30和60 cm的豬肉上發(fā)現(xiàn)墓地柵蚤蠅的成蟲及幼蟲,且為主要昆蟲種類.到目前為止,僅見鄒天路等對(duì)其幼期形態(tài)及其蟲齡進(jìn)行了鑒別[10],尚無(wú)幼蟲發(fā)育資料報(bào)道.鑒于該種蚤蠅在推斷土埋尸體埋后間隔時(shí)間(post-burial interval,PBI)方面具有重要作用,本研究以墓地柵蚤蠅為試驗(yàn)材料,研究溫度對(duì)墓地柵蚤蠅幼蟲生長(zhǎng)發(fā)育的影響,在推斷土埋尸體埋后間隔時(shí)間上具有一定應(yīng)用價(jià)值.

1 材料與方法

1.1 供試材料

墓地柵蚤蠅在遼寧沈陽(yáng)沈北新區(qū)一楊樹林內(nèi)地下30 cm和60 cm豬肉上采集,并在遼寧省城市有害生物治理與生態(tài)安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室連續(xù)飼養(yǎng).

1.2 試驗(yàn)方法

參考馮典興等的方法[11].將墓地柵蚤蠅的成蟲放入裝有豬肉的干凈培養(yǎng)瓶中,放入培養(yǎng)箱中正常繁育,將收集到的墓地柵蚤蠅卵放入干凈培養(yǎng)皿中進(jìn)行定時(shí)(間隔1 h)觀察,將初孵化幼蟲取出備用.

試驗(yàn)處理:在15、18、21、24 ℃4個(gè)溫度,相對(duì)濕度為75%條件下,每個(gè)溫度每隔8 h取樣一次,分別完成幼蟲體長(zhǎng)的測(cè)量;置于Olympus BX41實(shí)體顯微鏡下,用Olympus DP71顯微數(shù)碼攝像機(jī)錄取35～45 s的視頻,播放視頻將幼蟲充分伸至最長(zhǎng)時(shí)進(jìn)行截圖,以GIF格式保存,并使用Image-Pro Plus 6.0軟件打開,用測(cè)量工具測(cè)量體長(zhǎng)值,所得的數(shù)據(jù)以Excel形式輸出,利用Olympus三維重構(gòu)圖像處理系統(tǒng)完成蚤蠅幼蟲的活體測(cè)量;試驗(yàn)過(guò)程中記錄第一頭幼蟲離食及化蛹的時(shí)間,確定其最短取食期及發(fā)育歷期.

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS Statistics 17.0軟件進(jìn)行方差分析(ANOVA),平均數(shù)進(jìn)行Duncan’s多重比較,顯著水平P=0.01.

2 結(jié) 果

2.1 溫度對(duì)幼蟲發(fā)育的影響

墓地柵蚤蠅幼蟲在不同溫度下的平均取食期和平均發(fā)育歷期如表1所示. 隨著溫度升高, 幼蟲的取食期縮短,由(304.00±1.10) h(15 ℃)縮短到(89.60±1.05) h(24 ℃).發(fā)育歷期隨溫度升高也逐漸縮短,最短發(fā)育歷期為(137.70±1.89) h(24 ℃).

表1 溫度對(duì)墓地柵蚤蠅發(fā)育時(shí)間的影響Table 1 Effect of temperature on the development of D.funebris(Meigen) h

注:同一行中標(biāo)有相同字母表示差異不顯著(p<0.01).

2.2 溫度對(duì)幼蟲體長(zhǎng)的影響

不同溫度條件下,墓地柵蚤蠅幼蟲體長(zhǎng)變化均可分為增長(zhǎng)期和縮短期2個(gè)階段(圖1).在增長(zhǎng)期(也稱取食期),幼蟲體長(zhǎng)隨時(shí)間的推移逐漸增長(zhǎng),達(dá)最大值后進(jìn)入縮短期(也稱離食期),直至化蛹.墓地柵蚤蠅1齡幼蟲最大體長(zhǎng)為(1.35±0.29) mm(24 ℃),3齡幼蟲最大體長(zhǎng)值為(4.81±0.18) mm(24 ℃),在15～24 ℃條件下,達(dá)到最大體長(zhǎng)時(shí)間分別為320、288、168、104 h.

圖1 不同溫度條件下墓地柵蚤蠅幼蟲體長(zhǎng)的變化Fig.1 Time variation of body of larvae of D.funebris(Meigen) under different temperatures

利用SPSS Statistics 17.0軟件模擬墓地柵蚤蠅幼蟲體長(zhǎng)隨發(fā)育時(shí)間的變化關(guān)系.結(jié)果顯示,二次方程能很好地模擬幼蟲體長(zhǎng)隨發(fā)育時(shí)間的變化見表2,回歸方程統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)結(jié)果達(dá)到極顯著水平(p<0.01).

表2 不同溫度條件下墓地柵蚤蠅幼蟲體長(zhǎng)與發(fā)育時(shí)間的回歸關(guān)系Table 2 Regression relationship between the average larval body length of D.funebris and growth time in different temperatures

3 討 論

通常麗蠅、麻蠅等大型蠅類最先達(dá)到并定殖地面裸露尸體,根據(jù)其發(fā)育資料可以較為準(zhǔn)確地推斷尸體死亡時(shí)間,但對(duì)于掩埋尸體來(lái)說(shuō),體型微小的蚤蠅則常是出現(xiàn)頻率最高的蠅類,其發(fā)育資料在推斷尸體的埋后間隔時(shí)間方面發(fā)揮重要作用.墓地柵蚤蠅已在一些動(dòng)物尸體上收集到,在我國(guó)沈陽(yáng)地區(qū)地下30和60 cm肉塊上收集到了該種蚤蠅,且為優(yōu)勢(shì)種類[9].目前,該種缺乏發(fā)育資料,無(wú)法滿足未來(lái)法醫(yī)實(shí)踐的需要.鄒天路報(bào)道沈陽(yáng)地區(qū)土壤溫度較環(huán)境溫度低,地下30 cm土壤最高溫度出現(xiàn)在8月,為(21.04±1.28) ℃,且波動(dòng)幅度較小[9],因此,本研究開展了15～24 ℃條件下墓地柵蚤蠅幼蟲的生長(zhǎng)發(fā)育研究.

發(fā)育歷期和幼蟲體長(zhǎng)是兩個(gè)重要的日齡指標(biāo),受溫度影響較大.墓地柵蚤蠅幼蟲在不同溫度下生長(zhǎng)發(fā)育歷期隨溫度升高而縮短;幼蟲體長(zhǎng)在取食期迅速增長(zhǎng),至3齡達(dá)到最大體長(zhǎng),離食期又有所縮短.這與已報(bào)道的大頭金蠅Chrysomyiamegacephala(Fabricius)[12]、絲光綠蠅Luciliaserlcata(Meigen)[13]、棕尾別麻蠅Boettcheriscaperegrine[14]、紫綠蠅L.porphyrina、巨尾阿麗蠅Aldrichinagrahami、寬麗蠅Cauiphoranigrbarbis、蛆癥異蚤蠅M.scalaris(Loew)[15]、東亞異蚤蠅M.spiracularisSchmitz[16]以及角喙栓蚤蠅Dohrniphoracornuta(Bigot)[17]等常見的嗜尸性蠅類基本一致.

角喙栓蚤蠅與墓地柵蚤蠅幼蟲形態(tài)相似,很容易混淆.吳靜等[18]報(bào)道在15、18、21、24 ℃條件下,角喙栓蚤蠅幼蟲最短發(fā)育歷期分別為(616.70±2.31) h、(276.39±1.35) h、(186.40±2.33) h、(169.15±2.48) h,最大體長(zhǎng)值為(4.91±0.25) mm(21 ℃);本研究中墓地柵蚤蠅在相同溫度下的最短發(fā)育歷期分別為(674.00±2.41) h、(592.60±1.09) h、(288.30±1.67) h、(137.70±1.89) h,最大體長(zhǎng)值為(4.81±0.18) mm(24 ℃).二者發(fā)育歷期差異明顯,特別是在18 ℃條件下,相差316 h.與同屬的廣東柵蚤蠅Diplonevraperegrine(Wiedemann)發(fā)育資料進(jìn)行對(duì)比,在24 ℃條件下,廣東柵蚤蠅幼蟲發(fā)育歷期為(158.88±16.50) h,最大體長(zhǎng)值為(11.34±0.43) mm[19];墓地柵蚤蠅在相同溫度下的最短發(fā)育歷期縮短達(dá)21 h,最大體長(zhǎng)值相差約6.5 mm.因此,在利用法醫(yī)昆蟲的發(fā)育資料推斷死亡時(shí)間前必須對(duì)其種屬進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定,并在案發(fā)前建立起其發(fā)育資料.