劉衛(wèi)寶，余訊，徐靜靜，詹曉北*，張洪濤，朱莉

1(糖化學(xué)與生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(江南大學(xué))，江蘇 無(wú)錫，214122)2(江南大學(xué) 生物工程學(xué)院，江蘇 無(wú)錫，214122) 3(南京醫(yī)科大學(xué)附屬無(wú)錫第二醫(yī)院影像科，江蘇 無(wú)錫，214002)

腸道微生物在人體中扮演著重要的角色。人體腸道中存在著約100萬(wàn)億個(gè)微生物，超過(guò)人體自身細(xì)胞的10倍以上[1]。腸道菌群、宿主、外界環(huán)境3者保持著動(dòng)態(tài)平衡，但一些因素，如飲食、藥物代謝、年齡等發(fā)生改變，就會(huì)打破平衡，從而導(dǎo)致一些疾病[2]。因此，腸道微生物的調(diào)控越來(lái)越引起人們的關(guān)注。益生元物質(zhì)的發(fā)酵利用是調(diào)控腸道微生物的有效策略，目前被廣泛認(rèn)可的益生元有果膠低聚糖、菊粉、低聚半乳糖、低聚葡聚糖等[3]。由于植物多糖來(lái)源廣泛，毒副作用小，所以越來(lái)越多的植物多糖被研究者開(kāi)發(fā)為益生元物質(zhì)[4]。

已有研究表明，許多植物多糖對(duì)腸道微生物的生長(zhǎng)和代謝具有積極的影響。它們經(jīng)過(guò)口腔、胃和小腸，但卻不能被降解，最后到達(dá)大腸結(jié)腸而被腸道微生物發(fā)酵利用，通過(guò)改善腸道菌群結(jié)構(gòu)和增加短鏈脂肪酸[5]等代謝產(chǎn)物促進(jìn)人體健康[6]。例如，四君子湯多糖可以調(diào)節(jié)人腸道中微生物的豐度，其降解產(chǎn)物可以增加乙酸和總酸的含量[7]；桑椹多糖與糞便培養(yǎng)物發(fā)酵48 h后，糞便培養(yǎng)物的pH從7.12降至6.14，并且總SCFA、乙酸、丙酸和丁酸含量都顯著增加[8]。此外，鐵皮石斛多糖[9]、大麥葡聚糖[10]和靈芝多糖[11]等都具有相似的功能。

黃芪(AstragaluspropinquusSchischkin)是我國(guó)的一種特色食材、藥材，含有多糖、苷類、氨基酸和黃酮等多種化學(xué)成分。其中多糖是重要的有效成分之一。已有研究表明，黃芪多糖具有抗氧化[12]、抗心血管疾病[13]、增強(qiáng)免疫力[14]等多種功效。同時(shí)黃芪多糖作為植物多糖，也可能具有一定的益生活性。但對(duì)于黃芪多糖益生活性的研究多集中于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)成本高，實(shí)驗(yàn)繁瑣，實(shí)驗(yàn)周期也較長(zhǎng)，并且鮮有研究涉及黃芪多糖對(duì)腸道微生物的益生作用研究。課題組從黃芪中獲得一種水溶性黃芪粗多糖，并基于人體糞便體外發(fā)酵，利用實(shí)驗(yàn)室建立的模擬人體腸道平臺(tái)系統(tǒng)，采用人體糞便體外發(fā)酵來(lái)研究人體腸道微生物對(duì)黃芪多糖的代謝及益生活性物質(zhì)分析，為開(kāi)發(fā)黃芪多糖作為益生元物質(zhì)提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

黃芪飲片，北京同仁堂(產(chǎn)地：蒙古)；填料DEAE Fast Flow，美國(guó)GE公司；木瓜蛋白酶，阿拉??；菊粉，比利時(shí)Cosucra公司；其他試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

3K15 型冷凍高速離心機(jī)，美國(guó) Sigma 公司; LC-1200 型高效液相色譜，美國(guó) Agilent 公司; ICS5000離子色譜儀，美國(guó)戴安公司；NEXUS傅里葉變換紅外光譜儀，美國(guó)尼高力儀器公司；AV-500 MHz全數(shù)字化核磁共振波譜儀，德國(guó)布魯克公司；7890A氣相色譜儀，美國(guó)Agilent公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 黃芪多糖的分離純化

黃芪飲片在60 ℃烘箱中干燥后粉碎成粉末，石油醚超聲30 min以除去脂類。自然揮干石油醚后采用傳統(tǒng)熱水浸提的方法[經(jīng)試驗(yàn)得出最佳提取條件為：料液比1∶50(g∶mL)，浸提溫度80 ℃，浸提時(shí)間2.5 h]得到糖溶液，濃縮至100 mL后加入5倍體積乙醇醇沉。沉淀復(fù)溶于去離子水中，按1.5 g/L的比例加入木瓜蛋白酶，60 ℃水浴2 h后于95 ℃下滅酶30 min。然后用Savage法去蛋白，其中V(氯仿)∶V(正丁醇)=4∶1，V(Savage試劑)∶V(樣液)=5∶1，充分振蕩后離心小心取上清液，重復(fù)操作直至中間無(wú)蛋白層出現(xiàn)。再次加入5倍體積乙醇醇沉，沉淀依次用丙酮和無(wú)水乙醇洗滌2次，復(fù)溶于去離子水中，使用截留分子質(zhì)量為3 500 Da的透析袋，于自來(lái)水和去離子水中分別透析2 d，凍干得黃芪粗多糖(Astragaluscrude polysaccharide, APS)。

稱取50 mg APS，溶于10 mL去離子水中，過(guò)0.45 μm濾膜后經(jīng)DEAE Fast Flow(80 cm×1.5 cm)離子交換柱純化，用水、0.1、0.2和0.3 mol/L的NaCl依次洗脫，每管收集5 mL洗脫液，并利用苯酚硫酸法測(cè)定每管的吸光度(A490),繪制洗脫曲線。收集主要洗脫組分，透析除鹽后凍干得到純化后黃芪多糖(APS-1和APS-2)。

1.3.2 黃芪多糖的總糖和蛋白含量測(cè)定

分別利用苯酚硫酸法[15]和考馬斯亮藍(lán)G-250法[16]分別測(cè)定總糖和蛋白含量。得率按公式(1)計(jì)算，總糖和蛋白含量按公式(2)計(jì)算：

(1)

式中：m1，提取液中總糖質(zhì)量或APS-1、APS-2的質(zhì)量，g；m2，黃芪粉的質(zhì)量，g。

(2)

式中：m1，測(cè)定的APS、APS-1、APS-2中的總糖或蛋白的質(zhì)量，g；m2，APS、APS-1、APS-2的質(zhì)量，g。

1.3.3 黃芪多糖的分子質(zhì)量和單糖組成分析

利用高效凝膠過(guò)濾色譜(high perfomance size exclusion chromatography, HPGFC)法測(cè)定APS-1和APS-2的分子質(zhì)量，由葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品(Mw：3.65、21、55.5、123.5和326.6 kDa)得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。色譜條件如下：LC-1200 型高效液相色譜儀; RID檢測(cè)器; Superose12(1.0×30 cm)色譜柱; 流動(dòng)相0.01 mol/L NaOH; 流速0.5 mL/min; 柱溫30 ℃；進(jìn)樣量20 μL。

配制單糖混合標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mg/mL(鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、果糖、核糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸)。稱取5 mg APS-1和APS-2，分別加入300 μL 2 mol/L的三氟乙酸，100 ℃下降解12 h，氮?dú)獯蹈?，加?00 μL甲醇，吹干，重復(fù)操作3次以除去三氟乙酸，然后定容至25 mL。使用離子色譜儀(脈沖安培檢測(cè)器)進(jìn)行色譜分析。采用CarboPac PA20色譜柱，進(jìn)行梯度洗脫，程序如表1所示。

表1 離子色譜的洗脫程序

1.3.4 黃芪多糖的FT-IR分析

取干燥的APS-1和APS-2 1～2 mg，利用KBr壓片的方法[17]，在400～4 000 cm-1內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

1.3.5 黃芪多糖的1H-NMR分析

取干燥的APS-1和APS-2樣品50 mg溶于0.5 mL D2O中，在AV-500 MHZ核磁共振波譜儀上進(jìn)行NMR實(shí)驗(yàn)獲得1H譜。

1.3.6 培養(yǎng)基

采用PHAM等[18]的方法，稍作修改，具體配方如下：胰蛋白胨2 g，酵母浸粉2 g，NaCl 0.1 g，K2HPO40.04 g，KH2PO40.04 g，MgSO4·7H2O 0.01 g，CaCl2·6H2O 0.01 g，NaHCO32 g，吐溫-80 2 mL，氯化血紅素0.025 g，L-半胱氨酸鹽酸鹽0.5 g，膽汁鹽0.5 g，刃天青0.25 g，VK10.002 g(過(guò)濾除菌)溶于1 L去離子水中，115℃滅菌20 min。

1.3.7 糞便接種物

新鮮的糞便來(lái)自3個(gè)健康的志愿者(1男2女)，志愿者均遵循正常飲食(中國(guó)飲食)，沒(méi)有消化系統(tǒng)疾病，并且至少3個(gè)月沒(méi)有接受抗生素治療。將糞便樣品收集到無(wú)菌小瓶中，糞便樣品按一定比例(根據(jù)DNA含量計(jì)算[19])混合后，以1∶10(g∶mL)加入pH 7.3磷酸鹽緩沖液，均質(zhì)化，并通過(guò)4層無(wú)菌紗布過(guò)濾最終獲得人體糞便接種物[8]。

1.3.8 體外發(fā)酵

實(shí)驗(yàn)組：APS 5 g/L作為唯一碳源(由于APS-1和APS-2的量很少，不足以用于發(fā)酵，并且兩者由黃芪粗多糖得到，所以采用APS來(lái)進(jìn)行體外發(fā)酵實(shí)驗(yàn)也可以代表黃芪多糖)；陰性對(duì)照組：不加任何碳源；陽(yáng)性對(duì)照組：5 g/L菊粉作為唯一碳源。并以10%的接種量加入糞便接種物。在37 ℃的厭氧環(huán)境下培養(yǎng)48 h，分別在發(fā)酵0、12、24和48 h時(shí)取樣，12 000 r/min離心5 min后，移取發(fā)酵上清液測(cè)定pH值，所有樣品在-40 ℃保存用于后續(xù)檢測(cè)。

1.3.9 SCFA含量的測(cè)定

取發(fā)酵液1 mL，加入10 μL 2-甲基丁酸(1 mol/L)作為內(nèi)標(biāo)，緩緩加入250 μL濃HCl，混勻，加入1 mL乙醚，渦旋1 min，靜置，待有機(jī)相和水相分層。取有機(jī)相，加入無(wú)水Na2SO4，渦旋，過(guò)0.22 μm有機(jī)濾膜，取5 μL做氣相。色譜條件如下：儀器，Agilent-7890A；色譜柱，HP-INNOWAX；檢測(cè)器溫度250 ℃；進(jìn)樣口溫度220 ℃；流速1.5 mL/min；分流比1∶20；加熱程序60～190 ℃，4 min；進(jìn)樣量5 μL。

1.4 數(shù)據(jù)分析

所有實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次,結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD)。采用SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析(ANOVA)，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃芪多糖的分離純化

APS經(jīng)DEAE Fast Flow色譜用水和不同濃度的NaCl洗脫，洗脫曲線見(jiàn)圖1，洗脫后得到2個(gè)吸光度值較高的洗脫峰，分別命名為APS-1和APS-2，凍干備用。

圖1 DEAE Fast Flow色譜柱的洗脫曲線

2.2 黃芪多糖的總糖和蛋白含量測(cè)定

根據(jù)苯酚硫酸法和考馬斯亮藍(lán)G250法分別測(cè)得APS、APS-1和APS-2的總糖和蛋白含量。結(jié)果如表2所示，APS和APS-2均含有30%左右的蛋白，APS-1則不含有蛋白。

表2 黃芪多糖的得率、總糖和蛋白含量 單位：%

2.3 黃芪多糖的分子質(zhì)量和單糖組成分析

分子質(zhì)量和單糖組成的結(jié)果顯示，APS主要由鼠李糖、半乳糖和葡萄糖組成，摩爾比為1∶2.62∶21.32。APS-1的分子質(zhì)量為38.4 kDa，主要由半乳糖和葡萄糖組成，摩爾百分比為1∶49.76。APS-2的分子質(zhì)量為5.2 kDa，主要由鼠李糖、半乳糖和葡萄糖組成，摩爾百分比為1∶2.99∶16.26。

LI等[20]采用水提醇沉法從甘肅蘭州的黃芪中獲得一種分子質(zhì)量為36 kDa的水溶性黃芪多糖，其僅由葡萄糖組成。李宏全等[21]應(yīng)用微波萃取技術(shù)從蒙古黃芪中提取了一種新雜聚黃芪多糖，分子質(zhì)量為10 kDa，單糖組成及分子摩爾比為鼠李糖∶葡萄糖∶半乳糖∶阿拉伯糖=1.19∶72.01∶5.85∶20.95。LIAO等[22]運(yùn)用熱水浸提的方法從一種蜂蜜加工的黃芪中獲得黃芪多糖(HAPS)，并應(yīng)用HPGFC和PMP柱前衍生后的超高效液相色譜四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜(UPLC/ESI-Q-TOF-MS)分析了HAPS的相對(duì)分子質(zhì)量為1 695.7 kDa，單糖組成及摩爾比為甘露糖∶葡萄糖∶木糖∶阿拉伯糖∶葡萄糖醛酸∶鼠李糖=0.06∶28.34∶0.58∶0.24∶0.33∶0.21。本研究獲得的APS-1和APS-2分子質(zhì)量和單糖組成與以往研究存在差異，這可能是提取方法和黃芪產(chǎn)地的不同所導(dǎo)致的。

2.4 黃芪多糖的FT-IR分析

由圖2可知，APS-1在3 420.1 cm-1處的吸收峰屬于—OH的伸縮振動(dòng)，在2 918.9 cm-1處的吸收峰是由于γ—CH2和C—H的伸縮振動(dòng)，1 647.4 cm-1的吸收峰歸因于羧基的C—O鍵的振動(dòng)，1 412.6和1 384.1 cm-1的吸收峰屬于δ—CH2的彎曲振動(dòng)，1 154.6和1 080.4 cm-1的吸收峰歸因于C—O—C和C—O的伸縮振動(dòng)，1 019.6 cm-1的吸收峰表明存在吡喃糖環(huán)，931.4和849.5 cm-1的吸收峰屬于α-型糖苷鍵[23]，即APS-1以α-型吡喃糖苷鍵為主。APS-2在3 412.4 cm-1處的寬吸收峰是—OH的特征伸縮振動(dòng)[24]，在2 925.5 cm-1處的吸收峰是由于γ—CH2和C—H的伸縮振動(dòng)[25]，1 647.9和1 570.7 cm-1的吸收峰歸因于羧基的C—O鍵的存在[26]，1 418.8和1 384.6 cm-1的吸收峰屬于δ—CH2的彎曲振動(dòng)[27],1 151.3和1 078.9 cm-1的吸收峰歸因于C—O—C和C—O的伸縮振動(dòng)，1 026.9 cm-1的吸收峰表明存在吡喃糖環(huán)。另外，896.6和864.3 cm-1處的峰表明APS-2中存在相應(yīng)的α-D-吡喃糖苷和β-D-吡喃糖苷變形模式[23]。綜上，APS-1以α-型糖苷鍵為主，APS-2同時(shí)包含α-型糖苷鍵和β-型糖苷鍵。

圖2 APS-1和APS-2的紅外光譜圖

2.5 黃芪多糖的1H-NMR分析

采用1H-NMR進(jìn)一步鑒定APS-1和APS-2的糖苷鍵構(gòu)型,通常δ4.5～5.5 ppm之間為異頭質(zhì)子(H-1)共振區(qū)，其中α-型吡喃糖1H的化學(xué)位移大于5.0 ppm，而小于5.0 ppm則表明為β-型吡喃糖。

圖3-a為APS-1的1H-NMR譜圖，異頭質(zhì)子H-1區(qū)域共有4個(gè)共振峰信號(hào)，分別在δ5.40、δ5.22、δ4.96和δ4.65 ppm處出現(xiàn)，表明APS-1中同時(shí)存在α-型吡喃糖和β-型吡喃糖，但α-型吡喃糖的比例遠(yuǎn)高于β-型吡喃糖。結(jié)合APS-1的紅外光譜中未出現(xiàn)β-型吡喃糖的特征吸收峰的結(jié)果，表明APS-1主要以α-型糖苷鍵為主。如圖3-b所示，異頭質(zhì)子H-1的化學(xué)位移有大于5.0 ppm，也有小于5.0 ppm，說(shuō)明APS-2同時(shí)包含α-型吡喃糖和β-型吡喃糖，且兩者所占比例相差不大。

a-APS-1的1H譜圖;b-APS-2的1H譜圖

FU等[28]采用沸水浸提法從來(lái)自甘肅定西的黃芪中獲得一種分子質(zhì)量為301 kDa的水溶性黃芪多糖，其單糖組成及摩爾比為鼠李糖∶木糖∶葡萄糖∶半乳糖=1∶4∶5∶1.5，并同時(shí)含有α-型糖苷鍵和β-型糖苷鍵。李宏全等[21]分析了一種從蒙古黃芪中獲得的新雜聚黃芪多糖的1H-NMR圖譜，結(jié)果表明其主要構(gòu)型為α-吡喃構(gòu)型。LIAO等[22]運(yùn)用1H-NMR分析了一種來(lái)自蜂蜜加工的黃芪制劑的黃芪多糖(HAPS)，結(jié)果顯示其同時(shí)含有α-型糖苷鍵和β-型糖苷鍵，且存在糖醛酸和乙?；?。不同黃芪多糖包含不同的糖苷鍵構(gòu)型，這也可能是黃芪的產(chǎn)地不同或者提取方法不同所引起的。

2.6 pH和總糖含量的變化

發(fā)酵培養(yǎng)基的pH變化可以反映發(fā)酵過(guò)程的產(chǎn)酸量,如圖4所示。

圖4 不同處理組在人體糞便體外發(fā)酵過(guò)程中的pH變化

發(fā)酵48 h，陰性對(duì)照組的pH從7.52變化到7.07；APS組的pH從7.49降低至5.88(P<0.05)；菊粉(陽(yáng)性對(duì)照)組的pH從7.37降為5.21(P<0.05)。另外，在發(fā)酵的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)APS和菊粉組的pH都較陰性對(duì)照組低很多。結(jié)果與之前的研究一致，例如添加鐵皮石斛多糖發(fā)酵時(shí)觀察到pH明顯降低，發(fā)酵48 h后pH由6.59降為4.70[9]。pH與蘆薈多糖[6]類似，但低于桑椹多糖[8]。

不同處理組在不同發(fā)酵時(shí)間點(diǎn)培養(yǎng)基中總糖含量的變化見(jiàn)表4。由表可知，發(fā)酵12h后，APS組中90%以上的總糖已被消耗，由此說(shuō)明APS可以被人類腸道微生物利用。

表4 不同處理組在人體糞便發(fā)酵過(guò)程中的總糖含量變化

注：值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=3)。不同時(shí)間點(diǎn)數(shù)據(jù)后的不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)

2.7 短鏈脂肪酸(short-chain fatty acids, SCFA)的產(chǎn)生

腸道微生物可以利用不宜被消化的碳水化合物，并產(chǎn)生有益于人體健康的短鏈脂肪酸(SCFA)。在人體糞便發(fā)酵APS和菊粉(陽(yáng)性對(duì)照)的過(guò)程中SCFA濃度的變化見(jiàn)圖5。發(fā)酵48 h后，在APS組中，總SCFA的濃度從(3.85±0.06)mmol/L增加到(73.98±0.08)mmol/L，其中乙酸濃度由(2.96±0.04)mmol/L增加至(43.94±0.02)mmol/L，丙酸由(0.72±0.01)mmol/L增加到(23.74±0.02)mmol/L，丁酸從(0.18±0.01)mmol/L增加到(6.30±0.04)mmol/L。在菊粉組(陽(yáng)性對(duì)照)中，總SCFA的濃度從(3.35±0.04)mmol/L增加至(67.27±0.22)mmol/L，乙酸濃度由(2.43±0.01)mmol/L增至(37.27±0.01)mmol/L，丙酸濃度從(0.71±0.02)mmol/L增至(28.20±0.12)mmol/L，丁酸的濃度從(0.21±0.01)mmol/L增加到(1.80±0.09)mmol/L。在陰性對(duì)照組中，總SCFA的濃度從(2.57±0.03)mmol/L增加到(26.32±0.09)mmol/L，乙酸的濃度從(1.87±0.01)mmol/L增至(17.13±0.02)mmol/L,丙酸濃度由(0.49±0.01)mmol/L增加到(5.39±0.03)mmol/L，丁酸濃度從(0.20±0.01)mmol/L增加到(3.79±0.04)mmol/L。由此可知，APS組和菊粉組(陽(yáng)性對(duì)照)中SCFA的產(chǎn)生相比于陰性對(duì)照組都顯著增加(P<0.05)。其中，菊粉組(陽(yáng)性對(duì)照)中丙酸的產(chǎn)生高于APS組，但APS組中乙酸和丁酸的產(chǎn)生都高于菊粉組(陽(yáng)性對(duì)照)。結(jié)果表明，APS可以在體外被腸道微生物降解利用產(chǎn)生豐富的SCFA，具有較好的益生活性。

乙酸是腸道中重要的脂肪酸，也是評(píng)價(jià)益生效應(yīng)的重要指標(biāo)[29]。如圖5-A所示，APS組中乙酸的產(chǎn)量顯著高于菊粉組(陽(yáng)性對(duì)照)和陰性對(duì)照組(P<0.05)，并且是該發(fā)酵過(guò)程生成最多的SCFA，發(fā)酵液pH的降低可能主要是由于乙酸的產(chǎn)生。如圖5-D所示,在發(fā)酵48 h后，APS組的總SCFA的產(chǎn)量高于菊粉組，而APS組的pH卻低于菊粉組，這可能是由于發(fā)酵還產(chǎn)生了其他未檢測(cè)的酸性物質(zhì)，如乳酸等。丙酸是一種葡萄糖異生物，能夠抑制肝臟中膽固醇和脂肪酸的合成，進(jìn)而引起血脂水平下降[30]。并且通過(guò)降低乙酸和丙酸的比例能夠降低血脂和一些心血管疾病的產(chǎn)生[6]。由圖5-B可知，APS組中丙酸的產(chǎn)量顯著低于菊粉組(陽(yáng)性對(duì)照)，乙酸和丙酸的比例高于菊粉組(陽(yáng)性對(duì)照)，由此可以推斷，APS的降血脂功能可能低于菊粉。丁酸是結(jié)腸上皮細(xì)胞的重要底物，并且在細(xì)胞增殖和分化的調(diào)節(jié)中也起主要作用，還有研究表明丁酸可以促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡和強(qiáng)化結(jié)腸黏膜各種功能[31-32]。本研究中，如圖5-C所示，APS組丁酸的產(chǎn)量顯著高于菊粉組(陽(yáng)性對(duì)照)(P<0.05)，這在一定程度上表明APS在促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡和強(qiáng)化結(jié)腸黏膜功能方面可能具有相應(yīng)的潛力。

圖5 不同處理組在人體糞便發(fā)酵過(guò)程中的SCFA濃度變化

3 結(jié)論

本研究通過(guò)對(duì)黃芪粗多糖的分離純化而獲得APS-1和APS-2，并應(yīng)用HPLC、IC、FT-IR和1H-NMR等結(jié)果的分析了解到APS-1主要以α-型糖苷鍵為主，APS-2含有α-型糖苷鍵和β-型糖苷2種構(gòu)型。然后在體外利用人體糞便發(fā)酵黃芪粗多糖(APS)，結(jié)果顯示，APS發(fā)酵降低了培養(yǎng)基的pH，總糖含量隨發(fā)酵時(shí)間增加而降低，乙酸、丙酸和丁酸等短鏈脂肪酸的產(chǎn)生顯著增加。推斷APS在體外人體糞便發(fā)酵過(guò)程中可以被腸道微生物分解利用，產(chǎn)生豐富的SCFA等代謝產(chǎn)物，有益于人體腸道健康，研究結(jié)果表明APS具有較好的益生活性。