胡 穎，包玉潔，白玉盤，陸觀珠，成亞嬌，郭竹英，許 潔

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院a.感染科；b.檢驗(yàn)科，上海 201900)

Epstein-Barr 病毒（EB 病毒）是一種雙鏈DNA病毒，屬于γ 皰疹病毒亞科。全球流行病學(xué)調(diào)查顯示，其人群患病率為90%[1]。EB 病毒最初是通過感染人類口腔上皮細(xì)胞進(jìn)入人體，然后入侵人體B 淋巴細(xì)胞,并可在人體內(nèi)長(zhǎng)期潛伏感染[2]。按照EB 病毒感染人體的狀態(tài)，可分為急性原發(fā)性感染和既往感染[3]。EB 病毒急性原發(fā)感染多表現(xiàn)為傳染性單核細(xì)胞增多癥；而長(zhǎng)期慢性的EB 病毒感染則可表現(xiàn)為慢性活動(dòng)性EB 病毒感染，甚至可導(dǎo)致EB 病毒感染相關(guān)的惡性腫瘤發(fā)生[4]。成人EB 病毒感染患者的臨床表現(xiàn)各異[5]，其中EB 病毒感染所致的肝功能損傷尤以常見，約占不明原因肝臟損傷的0.85%[6]。近年來，成人EB 病毒感染的發(fā)病率增高。部分研究表明，成人EB 病毒感染患者多以發(fā)熱為首發(fā)癥狀，常合并咽部充血、淋巴結(jié)腫大、肝脾腫大等臨床表現(xiàn)[7]，可導(dǎo)致肝功能損傷，多呈自限性[8]，預(yù)后大多良好，但有少數(shù)患者可發(fā)展為慢性感染及腫瘤。有研究提示，EB 病毒感染患者體內(nèi)病毒的復(fù)制及抗病毒免疫反應(yīng)在不同年齡間存在差異[9]。本研究主要目的是研究成人EB 病毒感染的臨床特點(diǎn)及不同年齡患者間病毒相關(guān)抗體表達(dá)及免疫指標(biāo)的異同，以增進(jìn)臨床對(duì)成人EB 病毒感染的認(rèn)識(shí)，有助于EB 病毒感染的早期診斷和治療。

資料與方法

一、資料

收集上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院2017 年1 月至2019 年6 月間診斷的EB 病毒感染患者的臨床資料和實(shí)驗(yàn)室檢查數(shù)據(jù)，包括性別、年齡、基礎(chǔ)疾病以及血常規(guī)、肝功能、淋巴細(xì)胞亞群、EB 病毒衣殼抗原（virus capsid antigen，VCA）、抗EB 病毒VCA 抗體免疫球蛋白A（immunoglobulin A，IgA）、抗EB 病毒VCA 抗體免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）、EB 病毒DNA 檢測(cè)結(jié)果。在EB 病毒感染的診斷中，傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷依據(jù)《臨床診療指南傳染病分冊(cè)》診斷標(biāo)準(zhǔn)，其余診斷主要依據(jù)相關(guān)臨床表現(xiàn)及EB 病毒DNA 檢測(cè)陽(yáng)性。本研究的納入標(biāo)準(zhǔn)為，年齡≥18 周歲；血清EB 病毒VCA、抗EB 病毒VCA 抗體IgA、抗EB病毒VCA 抗體IgG 陽(yáng)性或EB 病毒DNA 陽(yáng)性者；同時(shí)排除臨床資料和實(shí)驗(yàn)室資料不完整的患者以及處于甲型、乙型、丙型、丁型、戊型病毒性肝炎急性期的患者。

另選取同期EB 病毒相關(guān)抗體及EB 病毒DNA均為陰性且臨床資料完整的49 名健康體檢者作為對(duì)照組。

二、方法

1.分組：根據(jù)WHO 對(duì)年齡劃分的標(biāo)準(zhǔn)[10]，將67 例EB 病毒感染患者分為青中年組[18～59 歲，19 例，平均年齡為（42.8±11.9）歲]和老年組[≥60 歲，48 例，平均年齡為（71.4±9.8）歲]。在67 例患者中，男性42 例（62.7%），女性25 例（37.3%）。將49 名健康體檢者按年齡分為青中年組[18～59 歲，30 名，平均年齡為（42.5±10.9）歲]和老年組[≥60 歲，19 名，平均年齡為（69.9±6.5）歲]。

2.血常規(guī)檢測(cè)：采用自動(dòng)血液分析儀（型號(hào)XE5000，希森美康醫(yī)用電子有限公司）檢測(cè)所有患者的血常規(guī)。

3.肝功能檢測(cè)：谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶采用乳酸脫氫酶法檢測(cè)，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶采用蘋果酸脫氫酶法檢測(cè)，谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶采用速率法檢測(cè)，堿性磷酸酶采用NPP 底物-AMP 緩沖液法檢測(cè)，血清總膽紅素、血清直接膽紅素、血清間接膽紅素采用重氮法檢測(cè)（試劑由貝克曼庫(kù)爾特有限公司提供，設(shè)備型號(hào)AU5811）。

4.EB 病毒檢測(cè)：采用熒光聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)法定性檢測(cè)EB 病毒DNA（試劑購(gòu)自湖南圣湘生物科技有限公司）；用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)EB病毒VCA、抗EB 病毒VCA 抗體IgA、抗EB 病毒VCA 抗體IgG[試劑購(gòu)自同昕生物技術(shù)（北京）有限公司]。用流式細(xì)胞儀檢測(cè)總T 淋巴細(xì)胞數(shù)、CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值、CD8+T 淋巴細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值、自然殺傷（natural killer,NK）細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值、B 淋巴細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值（試劑購(gòu)自碧迪醫(yī)療器械有限公司，設(shè)備型號(hào)BD FACSC antoⅡ）。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 25.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，服從正態(tài)分布的計(jì)量資料采用±s表示，均數(shù)比較采用t 檢驗(yàn)；不服從正態(tài)分布計(jì)數(shù)資料采用中位數(shù)（P25、P75）表示，中位數(shù)比較采用秩和檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用構(gòu)成比表示，采用卡方檢驗(yàn)。以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、一般資料

在本研究的67 例EB 病毒感染患者中，有高血壓者為20 例（19%）；有糖尿病者 為13 例（19.4%）；有惡性腫瘤性疾病者為19 例（28.4%），其中包括血液系統(tǒng)惡性腫瘤6 例，頭頸部惡性腫瘤5例，消化系統(tǒng)惡性腫瘤3 例，肺癌3 例，乳腺癌1 例，腎癌1 例。在青中年組中，有2 例（10.5%）患者伴發(fā)惡性腫瘤性疾病；在老年組中，有2 例（4.1%）患者伴發(fā)噬血細(xì)胞淋巴細(xì)胞組織增生癥，17 例（35.4%）伴發(fā)惡性腫瘤性疾病。青中年組與老年組間的惡性腫瘤構(gòu)成比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.15，P=0.042）。

二、伴隨臨床癥狀

67 例EB 病毒感染患者中，最常見的癥狀為發(fā)熱（37 例,55.2%），其次為淋巴結(jié)腫大（13 例,19.4%）、脾腫大（9 例，13.4%）、肝臟腫大（8 例，11.9%）、咽部充血（6 例，9.0%）、皮疹（5 例，7.5%）。青中年組有發(fā)熱患者16 例（84.2%），平均體溫為（38.3±1.1）℃，老年組則有21 例患者發(fā)熱（43.8%），平均體溫為（37.8±1.3）℃；青中年組咽部充血者為5 例（26.3%），老年組為1 例（2.1%）；青中年組出現(xiàn)皮疹者為4 例（21.1%），老年組為1 例（2.1%）；青中年組出現(xiàn)肝臟腫大者為6 例（31.6%），老年組為2 例（4.2%）。青中年組的發(fā)熱、咽部充血、皮疹、肝臟腫大癥狀較老年組多見，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2值分別為9.012、7.057、4.612、7.295，P<0.05）。青中年組出現(xiàn)淋巴結(jié)腫大者為5 例（26.3%），老年組為8 例（16.7%）；青中年組出現(xiàn)脾臟腫大者為3 例（15.8%），老年組為6 例（12.5%），2 組間的淋巴結(jié)腫大、脾腫大差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2分別為0.311、0.127，P>0.05）。

三、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)

EB 病毒感染青中年組與老年組間的血小板計(jì)數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而2 組間的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（見表1）。EB 病毒感染青中年組與老年組間的肝功能指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（見表1）。EB 病毒感染老年組與健康老年組相比，T 淋巴細(xì)胞總數(shù)絕對(duì)值、CD4+T 淋巴細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值、B 淋巴細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.05），CD8+T 淋巴細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值、NK 細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（見表2）。EB 病毒感染青中年組與健康青中年組比較，淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)值的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 均>0.05）（見表3）。

四、EB 病毒相關(guān)抗體

在EB 病毒感染青中年組中EB 病毒VCA 陽(yáng)性者為4 例（25.0%），老年組為12 例（41.4%）；青中年組EB 病毒VCA 抗體IgA 陽(yáng)性者為2 例（14.3%），老年組為10 例（32.3%）；青中年組EB 病毒VCA 抗體IgG 陽(yáng)性者為1 例（6.7%），老年組為2 例（5.1%）；青中年組EB 病毒DNA 陽(yáng)性者為13例（68.4%），老年組為30 例（61.2%），2 組之間EB 病毒VCA、抗VCA 抗體IgA、VCA 抗體IgG 及EB 病毒DNA 陽(yáng)性表達(dá)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 均>0.05）（見表4）。

表1 青中年組與老年組患者的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較[±s，M（P25，P75）]

表1 青中年組與老年組患者的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較[±s，M（P25，P75）]

ALT：谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase）；AST：天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase）；GGT：谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(glutamyl transpeptadase)；ALP：堿性磷酸酶（alkaline phosphatase）；TBIL：總膽紅素（total bilirubin）；DBIL：直接膽紅素（direct bilirubin）；IBIL：間接膽紅素（indirect bilirubin）

討 論

EB 病毒感染人體后可長(zhǎng)期潛伏感染[11]，在免疫抑制或其他刺激條件下可再次激活，引起相關(guān)臨床癥狀[12]。本研究發(fā)現(xiàn)，在成人EB 病毒感染患者中，男性構(gòu)成比較高，此結(jié)果與大多數(shù)研究結(jié)果相符[13]，其原因可能與男性的生活方式（如吸煙、飲酒）以及工作壓力大所導(dǎo)致的免疫功能下降有關(guān)。本研究中的成人EB 病毒感染患者患惡性腫瘤的百分比較高，這是由于EB 病毒感染與多種淋巴瘤和（或）白血病及上皮惡性腫瘤發(fā)生相關(guān)，包括鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）、淋巴瘤、胃癌[14]、移植后淋巴增殖性疾病[15]、子宮頸癌[16]、炎癥性腸病相關(guān)性結(jié)腸直腸癌[17]等，是世界范圍內(nèi)公認(rèn)的致腫瘤性病毒，且惡性腫瘤患者處于免疫功能失調(diào)狀態(tài)，更易導(dǎo)致EB 病毒的原發(fā)感染或者潛伏感染再激活。

一、青中年及老年EB 病毒感染者的臨床特點(diǎn)

成人EB 病毒感染患者的臨床表現(xiàn)多種多樣[18]。本研究中成人EB 病毒感染患者以發(fā)熱最為常見，并伴有淋巴結(jié)、肝脾腫大、咽部充血及皮疹等臨床癥狀，可能的原因是EB 病毒在人體B 細(xì)胞內(nèi)潛伏感染被激活后，誘發(fā)由CD8+T 淋巴細(xì)胞主導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng)[19]，對(duì)EB 病毒感染的細(xì)胞、器官、系統(tǒng)進(jìn)行攻擊，導(dǎo)致出現(xiàn)相應(yīng)的臨床癥狀，而青中年患者較老年患者癥狀明顯，主要原因可能如下。青中年人群免疫反應(yīng)較老年人活躍，能產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫活動(dòng)，進(jìn)而清除致病病原微生物，而隨著年齡的增長(zhǎng)，人體CD8+T 淋巴細(xì)胞的克隆性增殖增加[20]，導(dǎo)致老年人的抗原多樣性減少[21]，使免疫功能受損，最終導(dǎo)致老年人對(duì)病原體、疫苗反應(yīng)下降，所以老年EB病毒感染者臨床癥狀較青中年不明顯。

EB 病毒在人體長(zhǎng)期潛伏感染并表達(dá)多種潛伏基因與癌基因相互作用，促進(jìn)細(xì)胞G1/S 相變、抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)EB 病毒相關(guān)腫瘤發(fā)生[22],導(dǎo)致老年患者EB 病毒相關(guān)腫瘤患病率高。

二、導(dǎo)致不同年齡EB 病毒感染者組間免疫指標(biāo)差異的可能機(jī)制

病毒特異性CD4+T 淋巴細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值在EB病毒急性感染期急劇增加[11]，而老年患者的急性感染癥狀不明顯，并且老年腫瘤患者T 淋巴細(xì)胞總數(shù)及CD4+T 淋巴細(xì)胞數(shù)低于正常人[23]，可能是導(dǎo)致EB病毒感染老年組T 淋巴細(xì)胞及CD4+T 淋巴細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值低于健康人的原因。伴隨年齡增長(zhǎng)，人體B淋巴細(xì)胞數(shù)據(jù)及種類減少，所以EB 病毒感染老年組的B 淋巴細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值減少[24]，可能與年齡相關(guān)。

EB 病毒感染過程中產(chǎn)生多種抗體，其中抗VCA、抗VCA 抗體IgA 陽(yáng)性是新近感染的標(biāo)志[25]，而抗VCA 抗體IgG 的水平在病癥發(fā)作6 周達(dá)到峰值[26]，并可持續(xù)終生[27]，抗VCA 抗體IgG 陽(yáng)性及EB病毒DNA 陽(yáng)性是病毒復(fù)制的指標(biāo)。本研究顯示，在青中年組與老年組間上述EB 病毒感染指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與病毒在不同年齡體內(nèi)復(fù)制存在差異的研究結(jié)果不同[9]。所以EB 病毒復(fù)制是否存在年齡差異，有待進(jìn)一步探究。同時(shí)，抗EB 病毒VCA抗體IgG 血清陽(yáng)性可作為預(yù)測(cè)胃癌風(fēng)險(xiǎn)及預(yù)后的指標(biāo)[28]，血漿中EB 病毒DNA 的分析可用于鼻咽癌篩查[29]以及療效和預(yù)后的監(jiān)測(cè)[30]。目前二代測(cè)序技術(shù)可用于細(xì)胞內(nèi)EB 病毒的檢測(cè)，有利于EB 病毒感染的早期發(fā)現(xiàn)[31]。EB 病毒相關(guān)抗體的檢測(cè)及檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，更有利于EB 病毒相關(guān)疾病的早期發(fā)現(xiàn)及診治。

表2 EB 病毒感染老年組與健康老年組淋巴細(xì)胞亞群比較

表3 EB 病毒感染青中年組與健康青中年組淋巴細(xì)胞亞群比較

表4 青中年組與老年組患者EB 病毒相關(guān)抗原、抗體及EB 病毒DNA 比較[n（%）]

本研究為回顧性研究，鑒于成人EB 病毒感染的發(fā)病率增高，希望以此研究為基礎(chǔ)，今后開展更多的工作，提高臨床對(duì)成人EB 病毒感染的認(rèn)識(shí)，有助于成人EB 病毒感染早期診斷及治療。