尹鳳雷 尹 娟 趙 芳 張 睿 劉 靜 張 薇 李淑晨 王 娟

骨髓增殖性腫瘤(myeloproliferative neoplasms，MPN)是克隆性造血干細(xì)胞疾病的一種，患者臨床表現(xiàn)以多種血細(xì)胞質(zhì)及量異常表達(dá)，出血傾向以及髓外造血等[1]。臨床尚未明確MPN病理機(jī)制，但分析可能與基因突變、細(xì)胞因子以及炎癥等有關(guān)[2]。血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase，NSE)是神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的重要標(biāo)志物；血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)則是血管新生的重要參與因子；基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)則是細(xì)胞外基質(zhì)降解與重塑平衡的調(diào)控因子，與多種腫瘤遷移、擴(kuò)散能力有關(guān)[3]。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2019年2月在我院治療的MPN患者40例(MPN組)，其中真性紅細(xì)胞增多癥(PV)患者14例、原發(fā)性血小板增多癥(ET)患者15例、原發(fā)性骨髓纖維化(PMF)患者11例，男性25例、女性15例，年齡(54.51±8.03)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①診斷符合WHO2008版診斷標(biāo)準(zhǔn)；②均為初治患者；③患者及家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并有其他惡性腫瘤、急慢性感染、糖尿病、結(jié)締組織病、肝腎功能障礙等。同時(shí)選取健康體檢者50例作為對照組，其中男性30例、女性20例，年齡(53.15±9.25)歲。2組性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

抽取2組受檢人員靜脈血各5 ml，選用廣州吉迪儀器有限公司生產(chǎn)的JIDI-6D低速大容量離心機(jī)進(jìn)行3500 r/min，5 cm半徑12 min離心，取上清選用電化學(xué)發(fā)光法檢測2組人員NSE表達(dá)水平，試劑盒由瑞士羅氏公司生產(chǎn)；選用ELISA法檢測2組人員VEGF、MMP-9表達(dá)水平，試劑盒由南京信帆生物技術(shù)有限公司提供，操作參照相應(yīng)說明書。

1.3 治療方法

MPN組患者給予300 WU IFN-α2b肌肉注射，每周進(jìn)行3～6次，持續(xù)治療6～8周。必要時(shí)可酌情給予患者口服20～50 mg/kg羥基脲，每周2次，持續(xù)治療6～8周。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 MPN組和對照組血清NSE、VEGF、MMP-9水平比較

MPN組患者血清NSE、VEGF、MMP-9明顯高于對照組，差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 MPN組和對照組血清NSE、VEGF、MMP-9水平比較

2.2 不同類型MPN患者治療前血清NSE、VEGF、MMP-9水平比較

PV、ET和PMF患者治療前血清VEGF比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；PV患者治療前NSE和MMP-9明顯高于ET和PMF患者(P<0.05)；ET患者治療前MMP-9明顯高于PMF患者(P<0.05)。見表2。

表2 不同類型MPN患者治療前血清NSE、VEGF、MMP-9水平比較

注：a為與PV比較，P<0.05；b為與ET比較，P<0.05。

2.3 MPN患者治療前后血清NSE、VEGF、MMP-9水平比較

MPN患者治療后血清NSE、VEGF、MMP-9明顯低于治療前，差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 MPN組治療前后血清NSE、VEGF、MMP-9水平比較

2.4 不同類型MPN患者治療后血清NSE、VEGF、MMP-9水平比較

PV、ET和PMF患者治療后血清NSE、VEGF和MMP-9比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

表4 不同類型MPN患者治療后血清NSE、VEGF、MMP-9水平比較

3 討論

NSE是糖無氧酵解及有氧氧化通路的重要催化酶，主要存在于神經(jīng)元及神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞內(nèi)[4]。近些年的研究顯示[5]，NSE異常表達(dá)是多種腫瘤疾病的危險(xiǎn)因素，并且與患者疾病分期及預(yù)后密切相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)[6]，非神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，如非小細(xì)胞肺癌、淋巴瘤以及多發(fā)性骨髓瘤患者血清NSE表達(dá)水平顯著高于健康人群。還有研究發(fā)現(xiàn)[7]，40%左右的T細(xì)胞白血病/淋巴瘤患者存在血清NSE高表達(dá)情況。本組研究中，MPN組患者血清NSE表達(dá)水平明顯高于對照組，表明MPN患者存在明顯NSE高表達(dá)情況，其糖酵解途徑大量激活。本組研究還發(fā)現(xiàn)，PV患者治療前NSE明顯高于ET和PMF患者，提示NSE高表達(dá)還與MPN類型密切相關(guān)，或可成為MPN類型鑒別的參考指標(biāo)。有研究發(fā)現(xiàn)[8]，PV患者NSE水平顯著高于ET和PMF患者，并且與患者血紅蛋白、血小板計(jì)數(shù)呈正相關(guān)，該學(xué)者分析認(rèn)為NSE介導(dǎo)的糖酵解、氧化途徑活化是MPN細(xì)胞代謝的重要影響因素，并因此影響MPN發(fā)生、發(fā)展及類型。

VEGF是人體內(nèi)的一種強(qiáng)促血管新生因子，可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移，是血管生成的重要介質(zhì)[9]。本組研究中，MPN組患者血清VEGF水平明顯高于對照組，表明VEGF與MPN密切相關(guān)。高表達(dá)的VEGF可與其受體相互作用，并誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞大量增殖、遷移，并借助自分泌或旁分泌促進(jìn)血管新生，為腫瘤細(xì)胞增殖提供充分營養(yǎng)。有研究顯示[10]，VEGF高表達(dá)可抑制免疫細(xì)胞活性，并損傷其功能，進(jìn)而降低機(jī)體免疫功能對腫瘤細(xì)胞的監(jiān)測及殺傷能力。本組研究還發(fā)現(xiàn)，PV、ET和PMF患者治療前血清VEGF比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明不同類型的MPN患者血清VEGF表達(dá)水平相似，提示VEGF水平與MPN類型無相關(guān)。

MMP-9是MMPs家族的重要成員，對血管基膜具有較強(qiáng)降解能力，是血管新生、動(dòng)脈粥樣硬化斑塊生成、破裂的重要參與因子[11]。本組研究中，MPN組患者血清MMP-9表達(dá)水平明顯高于對照組，提示MMP-9是MPN發(fā)生、發(fā)展的參與因子之一。分析MMP-9作用MPN的機(jī)制可能與促使患者M(jìn)MPs及其抑制劑平衡破壞，并參與血管新生，并影響腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移等有關(guān)。本組研究還發(fā)現(xiàn)，PV患者治療前MMP-9明顯高于ET和PMF患者，提示PV可能更具侵襲性。

IFN-α2b是T細(xì)胞合成的一種干擾素，可通阻止造血干細(xì)胞由G0期向G1、S期轉(zhuǎn)化，并以此抑制造血干細(xì)胞增殖能力[12]。IFN-α2b還可抑制巨核細(xì)胞/血小板源性纖維生成因子表達(dá)，并阻滯骨髓纖維化進(jìn)程[13]。羥基脲則是惡性黑色素瘤、慢性粒細(xì)胞白血病等腫瘤疾病的常用藥物之一[14]。本品可有效選擇性阻滯DNA合成，同時(shí)干擾嘌呤、嘧啶堿基合成。但羥基脲毒性較強(qiáng)，被世界衛(wèi)生組織歸屬于3類致癌物清單中[15]，因此本研究僅對必要患者進(jìn)行給藥。本組研究中，治療后MPN患者血清NSE、VEGF、MMP-9明顯低于治療前，但不同疾病分類患者治療后血清NSE、VEGF和MMP-9比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明IFN-α2b可顯著抑制NSE、VEGF、MMP-9表達(dá)，并改善患者癥狀。

本研究通過分組實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)NSE、VEGF、MMP-9高表達(dá)與MPN密切相關(guān)，臨床或可通過檢測這3個(gè)指標(biāo)來診斷MPN。此外，不同MPN類型患者NSE水平也存在一定差異，提示NSE還可用于鑒別MPN的類型。由于本組研究取樣數(shù)量較小，研究還存在一定不足。

綜上所述，MPN患者血清NSE、VEGF、MMP-9水平明顯升高，其中NSE和MMP-9水平與MPN類型有一定關(guān)系。