劉鵬飛 馮笑山 周 博 楊言通 高笑玉

將子宮內(nèi)膜組織上皮性惡性腫瘤稱為子宮內(nèi)膜癌，其發(fā)病率也呈上升趨勢(shì)。近年來ESM-1新型內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子的發(fā)現(xiàn)，在腫瘤發(fā)展、轉(zhuǎn)移及血管生成中都具有重要作用[1]；人體諸多組織表達(dá)因子中，β-arrestin-2在惡性腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移中也發(fā)揮著作用。本組研究主要針對(duì)子宮內(nèi)膜癌中ESM-1及β-arrestin-2蛋白的表達(dá)進(jìn)行觀察，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院病理科2016年3月至2018年3月期間96例存檔石蠟標(biāo)本，其中子宮內(nèi)膜腺癌32例、子宮內(nèi)部不典型增生32例、正常子宮組織32例。所有選取標(biāo)本均在兩名病理專家的檢查下選定，術(shù)前，所有病例均無其它系統(tǒng)疾病，未行激素、化療及放療等治療。

1.2 方法

試劑：兔抗人ESM-1抗體、ESM酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、DAB試劑盒、β-arrestin-2抗體及免疫組化SP試劑盒。經(jīng)石蠟包埋、切片對(duì)標(biāo)本處理后，對(duì)ESM-1、β-arrestin-2表達(dá)采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)，為使所有切片顯色時(shí)間相同，采用DA同步浸染顯色法處理。嚴(yán)格按照試劑盒要求進(jìn)行相關(guān)操作。

結(jié)果判斷：ESM-1及β-arrestin-2陽性表達(dá)以胞質(zhì)或(和)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕褐色或棕黃色顆粒為依據(jù)。對(duì)每一例樣本觀察時(shí)，隨機(jī)觀察5個(gè)400倍視野，每個(gè)視野下計(jì)數(shù)100個(gè)腫瘤細(xì)胞，以半定量積分法判斷。依據(jù)染色強(qiáng)度、著色強(qiáng)弱依次評(píng)分：無色0分、淡黃色1分、棕黃色2分、棕褐色3分；以染色細(xì)胞占比對(duì)染色范圍評(píng)分：1分：陽性細(xì)胞占比25%及以下、2分：陽性細(xì)胞占比26%～50%、3分：陽性細(xì)胞占比51%～75%，4分：陽性細(xì)胞占比75%以上，陽性：染色強(qiáng)度與陽性細(xì)胞百分比評(píng)分乘積大于3。由兩名高年資病理科醫(yī)生對(duì)每張切片判斷結(jié)果進(jìn)行核準(zhǔn)。

1.3 觀察指標(biāo)

應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用%表示，用χ2檢驗(yàn)，采用線性趨勢(shì)性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 不同內(nèi)膜組織中ESM-1表達(dá)

ESM-1陽性表達(dá)率子宮內(nèi)膜癌組為75.00%、子宮內(nèi)膜不典型增生組為40.63%，正常子宮內(nèi)膜組為12.50%，顯示正常子宮內(nèi)膜組其陽性表達(dá)率均明顯低于子宮內(nèi)膜癌組及子宮內(nèi)膜不典型增生組(P<0.05)；子宮內(nèi)膜癌組陽性表達(dá)率明顯高于子宮內(nèi)膜不典型增生組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05；線性趨勢(shì)性檢驗(yàn)，ESM-1蛋白陽性表達(dá)隨著子宮內(nèi)膜病變程度的增加而升高(P<0.05)，見表1。

2.2 不同內(nèi)膜組織中β-arrestin-2表達(dá)

β-arrestin-2陽性表達(dá)率子宮內(nèi)膜癌組為78.13%、子宮內(nèi)膜不典型增生組為43.75%，正常子宮內(nèi)膜組為6.25%，顯示正常子宮內(nèi)膜組其陽性表達(dá)率均明顯低于子宮內(nèi)膜癌組及子宮內(nèi)膜不典型增生組(P<0.05)；子宮內(nèi)膜癌組其陽性表達(dá)率明顯高于子宮內(nèi)膜不典型增生組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05；線性趨勢(shì)性檢驗(yàn)，ESM-1蛋白陽性表達(dá)率隨著子宮內(nèi)膜病變程度的增加而升高(P<0.05)，見表2。

表1 不同內(nèi)膜組織中ESM-1表達(dá)(例，%)

注：*為與正常內(nèi)膜組相比，P<0.05；#為與子宮內(nèi)膜不典型增生組對(duì)比，P<0.05。

表2 不同內(nèi)膜組織中β-arrestin-2表達(dá)(例，%)

注：*為與正常內(nèi)膜組相比，P<0.05；#為與子宮內(nèi)膜不典型增生組對(duì)比，P<0.05。

2.3 ESM-1及β-arrestin-2蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系

ESM-1及β-arrestin-2在子宮內(nèi)膜癌不同分化組織患者中陽性表達(dá)差異不顯著，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；在不同臨床分期患者間，ESM-1及β-arrestin-2陽性表達(dá)存在明顯差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05；在淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移患者間，ESM-1及β-arrestin-2陽性表達(dá)差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05，見表3。

表3 ESM-1及β-arrestin-2蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系(例，%)

3 討論

女性生殖器官惡性腫瘤疾病中，子宮內(nèi)膜癌屬于常見惡性腫瘤，發(fā)生于子宮內(nèi)膜組織中，占女性生殖道惡性腫瘤的20%～30%，其中80%～90%為子宮內(nèi)膜腺癌，對(duì)女性健康帶來嚴(yán)重威脅[1]。當(dāng)前，關(guān)于子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機(jī)制及病因尚未完全明確，該病的發(fā)生、發(fā)展過程非常復(fù)雜。近年來，有研究證實(shí)，新生血管形成在腫瘤形成、生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移等過程中有密切關(guān)系，因此在對(duì)子宮內(nèi)膜癌研究中，從血管形成角度進(jìn)行研究是重要突破口之一。

ESM-1屬于新型內(nèi)細(xì)胞特異性分子，從人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞cDNA中克隆出。在正常人體肺血管內(nèi)皮、支氣管上皮及少部分腎臟中，ESM-1有一定表達(dá)[2-3]。諸多研究證實(shí)，惡性腫瘤患者中，ESM-1均呈陽性表達(dá)，如乳腺癌、甲狀腺癌、卵巢癌、肺癌、腎癌及惡性淋巴瘤中，且呈現(xiàn)出疾病越嚴(yán)重，ESM-1表達(dá)水平越高的特點(diǎn)[4]。β-arrestin-2屬于參與多信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及促進(jìn)受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的蛋白，對(duì)部分惡性腫瘤發(fā)生及轉(zhuǎn)移起作用[5-8]。有研究顯示，在諸多惡性腫瘤發(fā)展病理過程中，β-arrestin-2蛋白均有參與，且以促進(jìn)作用為主，尤其是在腫瘤遷移、增殖、轉(zhuǎn)移及親戚過程中表現(xiàn)尤為明顯，表明惡性腫瘤進(jìn)展中，與β-arrestin-2蛋白密切相關(guān)。羅雪慧等[9-11]研究顯示，β-arrestin-2對(duì)Akt-GSK3β信號(hào)通路有激活作用，對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞凋亡產(chǎn)生抑制作用，促使腫瘤轉(zhuǎn)移、發(fā)展。此外，還有研究證實(shí)，β-arrestin-2對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子分泌有促進(jìn)作用，對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生刺激作用，促使新生血管的產(chǎn)生，使子宮內(nèi)膜癌病情加重。臨床相關(guān)研究證實(shí)，在肺癌組織中，ESM-1的表達(dá)與TNM分期及是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在密切關(guān)系，但和肺癌組織學(xué)分類關(guān)系不大，提示在腺癌中ESM-1不僅存在高表達(dá)，并且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及其分期存在密切關(guān)系。從本次研究數(shù)據(jù)分析可知，子宮內(nèi)膜癌組織中是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期與ESM-1及β-arrestin-2表達(dá)有關(guān)，子宮內(nèi)膜癌組患者中，出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中ESM-1及β-arrestin-2呈高表達(dá)，且明顯干預(yù)無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，不同分期表達(dá)中，Ⅲ期+Ⅳ期患者中ESM-1及β-arrestin-2表達(dá)明顯高于Ⅰ期+Ⅱ期患者，而組織學(xué)分級(jí)中，患者兩項(xiàng)蛋白水平表達(dá)無明顯差異，進(jìn)一步證實(shí)了子宮內(nèi)膜癌患者組織中ESM-1及β-arrestin-2陽性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相關(guān)。本組研究的不足之處在于未能對(duì)子宮內(nèi)膜癌患者組織中ESM-1及β-arrestin-2表達(dá)與病死率之間的關(guān)系進(jìn)行研究，也是以后研究的一個(gè)重要方向。本次研究結(jié)果顯示，在子宮內(nèi)膜癌與子宮不典型增生患者中，ESM-1與β-arrestin-2蛋白陽性表達(dá)明顯高于正常子宮組織(P<0.05)，且子宮內(nèi)膜癌組兩項(xiàng)指標(biāo)陽性表達(dá)均高于子宮不典型增生組(P<0.05)，經(jīng)線性趨勢(shì)檢驗(yàn)，結(jié)果顯示，ESM-1與β-arrestin-2蛋白陽性表達(dá)隨著子宮內(nèi)膜病變程度的加重而升高，提示在子宮內(nèi)膜癌發(fā)展中，ESM-1與β-arrestin-2蛋白發(fā)揮著重要作用。

綜上所述，在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移過程中，ESM-1與β-arrestin-2蛋白均產(chǎn)生重要作用。