趙東旭，孟福強(qiáng)，李叔偉，姜 宇

（哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司，哈爾濱 150000）

1 材料與方法

1.1 供試材料

哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司重組禽流感病毒H5+H7亞型三價(jià)滅活疫苗（H5 N1Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2）。

抗體監(jiān)測試劑：禽流感H5N1 Re-11株和Re-12以及H7N9 Re-2株抗原及陽性血清，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所提供，1%紅細(xì)胞懸液，由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司質(zhì)量管理部提供（SPF級公雞紅細(xì)胞）。

1.2 試驗(yàn)雞群

廣東清遠(yuǎn)某黃羽肉雞養(yǎng)殖場，飼養(yǎng)量20 000只黃羽肉雞，正常免疫雞群19 000只，1 000只不免疫重組禽流感病毒H5+H7亞型三價(jià)滅活疫苗。

1.3 免疫劑量及方法

首免：15日齡，免疫劑量0.3mL·羽-1，頸部皮下注射。二免：45日齡，免疫劑量0.5mL·羽-1，肌肉注射。三免：75日齡，免疫劑量0.5 mL·羽-1，肌肉注射。

1.4 血樣采集

免疫前先測定基礎(chǔ)抗體的15日齡黃羽肉雞，于29日齡（首免后2周）、36日齡（首免后3周）、43日齡（首免后4周）、52日齡（二免后1周）、59日齡（二免后2周）、66日齡（二免后3周）、73日齡（二免后4周）、82日齡（三免后1周）、89日齡 （三免后2周）、97日齡（三免后3周）、104日齡（三免后4周）、111日齡（三免后5周）、118日齡（三免后6周）分別每組采集10份血樣，離心制備血清并按照國家標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞血凝抑制實(shí)驗(yàn)（HI）進(jìn)行抗體檢測。

1.5 檢測試劑和檢測方法

試驗(yàn)均用國家標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞血凝抑制試驗(yàn)（HI）進(jìn)行抗體檢測，待檢血清HI抗體滴度≥4 log2時(shí)為抗體合格。

2 試驗(yàn)結(jié)果

免疫后各毒株抗體效長規(guī)律（log2）見附表。對于120日齡出欄的黃羽肉雞選擇H5+H7亞型三價(jià)滅活疫苗進(jìn)行3次免疫，首免是15日齡，二免是45日齡，三免是75日齡，選擇在不同日齡對雞群進(jìn)行抗體監(jiān)測，首次免疫14 d后抗體滴度達(dá)到5 log2以上，59日齡也就是二免14日齡后，H5N1 Re-11、H5N1 Re-12、H7N9 Re-2抗體滴度均＞7 log2，對雞群有很好的保護(hù)作用。

附表 免疫后各毒株抗體效長規(guī)律（log2）

3結(jié)論

對于120日齡出欄的黃羽肉雞，選擇15、45、75日齡進(jìn)行3次免疫，首次免疫后14日齡H5 Re-11、H5 Re-12、H7 Re-2抗體滴度＞4 log2，對雞群有保護(hù)力，2次免疫后28日齡H5 Re-11、H5 Re-12、H7Re-2抗體滴度＞7 log2，說明對黃羽有較好的保護(hù)力。2019年高致病性禽流感發(fā)生率較高，死亡率低，尤其是對于黃羽肉雞來說，死亡率不高，養(yǎng)殖戶不能引起足夠的重視，這就會對于雞的生長性能帶來嚴(yán)重的影響，從而給黃羽肉雞養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴(yán)重的損失。尤其是在冬季建議慢速型的黃羽肉雞出欄之前免疫3次禽流感疫苗，這樣對于慢速型黃羽肉雞整個(gè)生長周期都會有很好的保護(hù)作用。