張 靖，韓 樹，劉曉慶，何玉瑤，趙 赫，楊艷平，鐘利群

（北京中醫(yī)藥大學東直門醫(yī)院 北京 100700）

辨證論治是中醫(yī)臨床醫(yī)學的靈魂[1]，而證候則是辨證論治的核心和精髓。證候作為臨床上確定治法、譴藥處方的重要依據(jù)，在日常診療中占有重要地位。但是，由于證候通常由醫(yī)師個人確定，其準確與否往往取決于醫(yī)師的學識及綜合判斷能力，這就導致證候的辨識不可避免地存在一定程度的主觀性和不確定性。加之證候反映的是疾病過程中某一階段或某一類型的病理特點[2]，具有時空性和動態(tài)性。證候的這種復雜多變的特性使得我們至今難以準確地揭示其真正的內涵，大大制約了中醫(yī)學診療特色的發(fā)揮。

中風病作為一個高發(fā)病率、高死亡率、高復發(fā)率的疾病[3，4]，其預防、治療和康復一直是國內外學者十分關注的課題。為了找到安全有效的治療藥物，學者們進行了大量的臨床實驗研究。但是，傳統(tǒng)的辨證方法已難適應這些群體化研究的要求，研究的臨床價值受到質疑，在這種情況下有學者提出了“群體辨證”的概念[5]。為了找到科學有效的群體辨證方法，研究者們不斷探索，但始終無法確定一套公認的可靠方案。直到復雜科學和網(wǎng)絡生物學的出現(xiàn)使這一困境有了緩解的曙光。在未來階段，網(wǎng)絡生物學技術有望幫助我們打破傳統(tǒng)的證候研究模式，從微觀層面深入闡明證候實質，為中風病的辨證分型提供新的依據(jù)。

本文將重點闡述網(wǎng)絡生物學技術特別是組學技術在證候研究中的應用價值，以期為中風病證候研究提供新的思路。

1 完善證候研究的必要性

1.1 證候在中醫(yī)個案研究中具有不可替代性，但它同時又存在不確定性

1.1.1 證候是中醫(yī)理論的核心，其個體性、動態(tài)性特點體現(xiàn)了中醫(yī)學的診療特色

郭蕾等[6]認為，證候具有“內實外虛”“動態(tài)時空”和“多維界面”的特征?！皟葘嵧馓摗敝皩崱笔侨后w在某一特定病變過程中所具有的共性規(guī)律，對于證候的診斷起著決定性作用；“虛”是指患者表現(xiàn)出的個性化癥狀信息，對干預原則和方法具有一定的影響作用?！皠討B(tài)時空”是指證候的演變而言，它隨著時間和空間范圍的改變而發(fā)生變化?！岸嗑S界面”則可以理解為證候是由多種要素組成的。這些特征說明了中醫(yī)學重視個性化診療和關注疾病的動態(tài)變化，而這恰恰是中醫(yī)學不同于現(xiàn)代醫(yī)學的診療優(yōu)勢所在?，F(xiàn)代醫(yī)學沒有證候的說法，只有疾病亞型，而這些亞型并沒有性質上的不同，因而對治法的選擇不會產(chǎn)生太大的影響。而中醫(yī)學的證候有別于現(xiàn)代醫(yī)學的疾病和疾病亞型，是一種在疾病背景下獨立存在的病理生理整體反應狀態(tài)，對選方用藥有直接的指導意義[7]，這一概念反映了中醫(yī)學依據(jù)疾病的病因、病性、病勢、病位及不同病程階段選擇不同治法的診療特色。因此，證候是中醫(yī)個性化診療的核心和基礎，證候研究在中醫(yī)現(xiàn)代化進程中的重要性不容忽視。

1.1.2 證候的模糊性和隱匿性使宏觀辨證和治療效果受到制約

證候由一系列具有內在聯(lián)系的癥狀與體征構成，而在中醫(yī)日常診療中，我們通過“四診”所獲取的癥狀、體征信息往往具有模糊性。例如望診中舌質的顏色、聞診中語聲的高低、問診中“口渴”與“口不渴”、切診中脈象的有力或無力等都沒有一個清晰的界定，只能由醫(yī)師根據(jù)經(jīng)驗進行大致的判斷，尚缺少統(tǒng)一的量化標準，使臨床診斷的準確性受到局限。此外，在某些疾病的早期，患者還沒有表現(xiàn)出相應的癥狀和體征，運用中醫(yī)的“四診”可能無法獲得可供診斷的信息，這種情況下可能會延誤患者的病情[8]。證候的這種模糊性和隱匿性使宏觀的辨證論治受到制約，因此從微觀角度對證候進行量化和客觀化勢在必行。

1.2 群體辨證是中醫(yī)臨床研究的必然要求，但尚未找到科學有效的方法

長期以來，臨床試驗研究是評價中醫(yī)藥臨床療效及其安全性的重要手段。中風病是臨床上的多發(fā)病、難治病，學者們一直在努力尋找安全有效的治療方案，因而進行了大量的臨床研究，其中不乏論證強度相對較高的隨機對照試驗（RCT）。然而，這些RCT 研究雖然屬于群體研究，但它們大多仍是在個體化辨證的基礎上進行的，依然存在不確定性。例如，在采集臨床四診信息特別是問診信息時，經(jīng)常存在信息遺漏或者患者表達不清的情況，導致資料采集和證型判定仍存在主觀性；尚無一個統(tǒng)一的辨證分型標準，且現(xiàn)有的分型尚不能囊括臨床上所有患者，導致研究者們在前期辨證分型時缺乏標準參照，從而使一些研究在納入對象時選擇放棄使用中醫(yī)標準，不考慮辨證的概念，而是依據(jù)西醫(yī)的疾病進行納入，使研究缺乏科學性，降低了療效證據(jù)的可信度和臨床應用價值。

鑒于尚未標準化、客觀化的證候體系給群體研究帶來的困難，一些研究者們開始尋找與群體研究相適應的辨證方法來解決這些難題，如有學者采用文獻調研、專家調研、臨床流行病學調查等方法綜合制定出符合中醫(yī)基礎理論和臨床實際的中醫(yī)辨證量表，使數(shù)據(jù)更加精確，辨證更加客觀化[9]；還有人采用系統(tǒng)評價、橫斷面研究等多種途徑獲得特定疾病的證候名稱和分布，并結合文獻整理和臨床醫(yī)師的診療經(jīng)驗對證候術語進行篩選和調整[10]；李可建[5]正式明確了“群體辨證”的概念，提出將某一疾病群體作為研究對象，探析其證候分布規(guī)律和證候特點，并將其作為確定臨床試驗措施的重要依據(jù)。這些理論和實踐的成果對于中風病證候研究的影響已初步顯現(xiàn)，例如有研究者[11]采用橫斷面研究、回顧性研究的方式，利用證候量表進行了中風證候的動態(tài)演變研究，揭示了中風病患者群體的證候演變規(guī)律。但是遺憾的是，這些研究受到樣本量和觀察時間的限制，往往只能闡釋單證候的動態(tài)演變。

隨著科學技術的進步，數(shù)據(jù)挖掘技術及現(xiàn)代統(tǒng)計學方法被應用于群體辨證。數(shù)據(jù)挖掘方法如關聯(lián)規(guī)則、聚類分析、決策樹、支持向量機、貝葉斯網(wǎng)絡、人工神經(jīng)網(wǎng)絡等使大規(guī)模的數(shù)據(jù)處理成為可能，有助于發(fā)現(xiàn)大樣本群體中證候的整體分布規(guī)律。但是，面對錯綜復雜的定量與定性結合、主觀與客觀結合、確定與模糊結合、線性與非線性結合的海量的中醫(yī)數(shù)據(jù),任何一種數(shù)據(jù)挖掘方法都沒法做到面面俱到，因此目前仍缺少獲得界內公認的符合中醫(yī)特點的一套挖掘方法[12]。對于中醫(yī)證候這個高維性、高階性、非線性的復雜系統(tǒng)，想要探究它的真正內涵，必須找到一套與這種復雜性相適應的新方法，而組學技術和網(wǎng)絡生物學的發(fā)展為微觀角度的證候研究帶來了機遇。

2 網(wǎng)絡生物學為中醫(yī)證候研究帶來機遇

2.1 網(wǎng)絡生物學技術簡述

復雜網(wǎng)絡是描述復雜系統(tǒng)的有力工具，長于在功能復雜性中發(fā)掘普適規(guī)律[13]。近年來隨著生物信息技術的發(fā)展，生物學與復雜網(wǎng)絡相結合，形成了一門新興的學科—網(wǎng)絡生物學。網(wǎng)絡生物學這一概念是Barabasi 等在2004年提出的[14]，認為通過建立網(wǎng)絡模型，可以將復雜生物系統(tǒng)的相互作用抽象表達成網(wǎng)絡，通過對復雜網(wǎng)絡拓撲結構和特性的分析來揭示生物系統(tǒng)的原理和本質，認識生命活動規(guī)律[15-17]。高通量測序技術、芯片技術以及基因組學、代謝組學、轉錄組學、蛋白組學等組學技術的日益成熟、新的計算方法的開發(fā)、公共數(shù)據(jù)庫的建立大大促進了網(wǎng)絡生物學的發(fā)展[18]。

下面將簡單闡述網(wǎng)絡生物學的幾個重要方法學概念：

2.1.1 網(wǎng)絡建立方法

（1）蛋白-蛋白相互作用網(wǎng)絡（protein-protein interaction，PPI）

蛋白-蛋白相互作用網(wǎng)絡中，每個節(jié)點代表1個蛋白質，每條邊代表2個蛋白質，它們具有物理上或者在功能上的相互作用關系[18]。這些相互作用關系可以通過公用數(shù)據(jù)庫獲得，常用的蛋白質相互作用網(wǎng)絡數(shù)據(jù)庫 有 STRING[19]、HPRD[20，21]、BioGRID[22]、In-tAct[23]、DIP[24]等，其中STRING（http://string-db.org）數(shù)據(jù)庫目前已收錄了超過5000 多個物種、2000 多萬種蛋白和20 多億個相互作用的數(shù)據(jù)[25]，這些蛋白質相互作用既包括直接的物理作用，也包括共表達相關性。通過分析這種網(wǎng)絡，有利于我們更好地理解蛋白質的功能及其相互作用關系。

（2）基因共表達網(wǎng)絡（co-expression network，CEN）

在基因共表達網(wǎng)絡中，每個節(jié)點代表1個基因，每條邊代表2 個基因具有相似的表達模式[18]。基因芯片數(shù)據(jù)是基因表達數(shù)據(jù)的主要來源之一[26]，其數(shù)據(jù)可從GEO[27]，ArrayExpress[28]，Ensemble[29]等公用數(shù)據(jù)庫中獲得?；蚬脖磉_網(wǎng)絡大多是以基因間表達譜數(shù)據(jù)的相關性為基礎而實現(xiàn)構建的,其構建主要分為兩個步驟，即對所有基因進行相似性度量和通過閾值的選擇確定共表達網(wǎng)絡的邊[26]。

（3）代謝網(wǎng)絡（metabolic network，MN）

代謝網(wǎng)絡是由生物體內所有的代謝反應或途徑，以及相關的調節(jié)過程所構成的復雜網(wǎng)絡系統(tǒng)。在代謝網(wǎng)絡中，每個節(jié)點代表1 個代謝物，每條邊代表2 個代謝物之間存在生物化學反應[18]。隨著基因組測序技術的迅速發(fā)展，完整的基因序列信息、高通量的實驗技術和生物工程理論的基礎使得我們能利用已知生物體的一系列生化反應，將從細菌到人類等不同生物的代謝網(wǎng)絡完整地重建出來[30]。目前許多生物代謝網(wǎng)絡已經(jīng)構造完成并且可以通過在線互聯(lián)網(wǎng)絡獲得相關的信息，其中比較著名和常用的代謝反應數(shù)據(jù)庫有KEGG[31]、HMDB[32]、SMPDB[33，34]等。這些數(shù)據(jù)庫可以幫助我們準確、批量地獲取網(wǎng)絡構建所需的信息，已成為代謝網(wǎng)絡研究的重要工具。

2.1.2 GO功能分析和KEGG通路分析

網(wǎng)絡生物學中，為了了解重要節(jié)點的生物學功能，通常要進行通路分析和功能分析。通路分析通常指KEGG（kyotoencyclopedia of genes and genomes）通路分析，功能分析通常指GO（gene ontology）功能分析。GO（gene ontology）是基因本體聯(lián)合會（Gene Onotology Consortium）建立的數(shù)據(jù)庫，目的在于建立對基因和蛋白質功能進行限定和描述，可以適用于各個物種，并且隨著研究不斷深入而更新的語言詞匯標準。GO 注釋分為分子生物學功能（molecular function，MF）、生物學過程（biological process，BP）和細胞組分（cellular component，CC）三大類，主要用于描述基因產(chǎn)物的功能[35，36]；KEGG 是一個綜合數(shù)據(jù)庫，是日本京都大學生物信息學中心的Kanehisa 實驗室在1995年建立的，它是一個綜合數(shù)據(jù)庫，大致分為系統(tǒng)信息、基因組信息、化學信息和健康信息4 大類，共包含了18 個主要的數(shù)據(jù)庫。其中的Pathway 數(shù)據(jù)庫是一個代謝通路集合的數(shù)據(jù)庫，包含新陳代謝、遺傳信息加工、藥物開發(fā)等7個方面的分子間相互作用和反應網(wǎng)絡[31]。通過對網(wǎng)絡重要節(jié)點的GO 和KEGG 富集分析，我們可以將重要節(jié)點顯著富集的通路認為是受調控的通路，將重要節(jié)點顯著富集的GO terms 認為是其參與的生物學過程[18]。

2.2 網(wǎng)絡生物學適用于中醫(yī)證候研究

2.2.1 網(wǎng)絡生物學的整合性、復雜性特點與中醫(yī)證候相適應

證候是一個非線性的“內實外虛”“動態(tài)時空”和“多維界面”的復雜巨系統(tǒng)[6]，想要揭示其證候的內涵，需要采用與證候復雜性相適應的復雜性科學理論及思維方法。而網(wǎng)絡生物學具有從整體和系統(tǒng)出發(fā)研究復雜體系的特征，它可以整合多種組學信息，實現(xiàn)從基因到細胞、組織、個體的多方向、多層次的研究，解析生命過程的復雜性，最終揭示生命活動的本質規(guī)律[37]。網(wǎng)絡生物學方法的引入為科學、合理地闡明證候實質提供了便利，促進證候的客觀化、定量化，從何推動中醫(yī)現(xiàn)代化研究的進程。目前，證候與網(wǎng)絡生物學的結合已經(jīng)取得了初步成果，如李稍等[38]提出了“證候生物分子網(wǎng)絡標志”的構想，建立了可以更好地理解病證方關系的“表型網(wǎng)絡-生物分子網(wǎng)絡-藥物網(wǎng)絡”研究框架，并且以寒證和熱證為案例研究，為系統(tǒng)生物學方法與中醫(yī)藥的結合開辟了一條新路。

2.2.2 中醫(yī)學的“證”與現(xiàn)代醫(yī)學的“表型”具有一定的共通性

表型是現(xiàn)代醫(yī)學概念，它是指有機體的某一特定的物理外觀或成分。從疾病角度而言，它能夠反映不同患者間差異，與臨床預后相關。表型是基因型和環(huán)境共同作用的結果。機體內存在的許多分子生物過程、機體所處的環(huán)境改變均會影響疾病的表型；部分基因結構的改變也能引起復雜疾病、影響疾病表型的改變。且具有同種基因型的生物在不同環(huán)境下可表現(xiàn)出不同的表型，具有相同基因型的生物可因基因表達譜和表達程度不同而呈現(xiàn)不同表型[39]。中醫(yī)學理論亦十分重視環(huán)境、先天體質等因素對疾病的影響。即使是同一疾病，當表現(xiàn)為不同證候時，它對人體造成的損傷可能是不同的。不僅如此，證候時一個動態(tài)演變的過程，隨著環(huán)境等因素的變化，證候表現(xiàn)也會不斷發(fā)生改變。在現(xiàn)代醫(yī)學中，對臨床表型的研究是為了發(fā)現(xiàn)具有個性化特征的患者組別，為個體化治療提供有力的支撐，這與中醫(yī)學辨證的目的也存在一致性。因此從某種程度上看，現(xiàn)代醫(yī)學的表型概念與中醫(yī)學的證的概念存在共通之處，表型的復雜性和個體化特征與中醫(yī)辨證論治的診療特色相契合。這提示我們或許可以從現(xiàn)代醫(yī)學的表型概念入手，透過復雜生命和疾病體系的外在表型，揭示證候的內在本質。而網(wǎng)絡生物學可以通過基因組學、轉錄組學、蛋白質組學、代謝組學等技術開展大規(guī)模的表型分析，提取反映人體系統(tǒng)特性的各類生物信息，有效地追蹤基因型、環(huán)境因素和表型之間的聯(lián)系[40]，將為我們的表型和證候研究提供有力的工具。

2.2.3 網(wǎng)絡生物學的整體性特點有利于組學數(shù)據(jù)的整合分析

近些年來研究者們已利用組學技術進行了一系列挖掘中醫(yī)證候本質的實驗研究，發(fā)現(xiàn)了一些與特定證候相關的生物標記物。但是，這些研究大多采用的是單一的組學技術，對生物標記物的分析也是孤立的。而證是一個復雜的巨系統(tǒng)，由多種要素構成，單一的生理、生化指標無法全面地揭示其科學內涵。數(shù)據(jù)分析未融入到整體代謝中，對人體病例變化的反映是片面的，也就難以全面深入地解析中醫(yī)證候的整體性特征和系統(tǒng)機制[41]。

而根據(jù)網(wǎng)絡生物學的思想，人體可以看作一個連通的網(wǎng)絡，基因、RNAs、蛋白質以及代謝物等生物分子相互聯(lián)系，以網(wǎng)絡為框架，構建生命有機體[18]。網(wǎng)絡生物學技術能夠通過檢測某一病證患者不同時間點的代謝組和蛋白質組成分，獲取生物標記物及相關通路，從網(wǎng)絡中獲得特定模塊和關鍵節(jié)點，揭示病變過程中體內物質的代謝狀況，從而從整體角度辨析證候的個體特征與變化規(guī)律[16]。同時，將網(wǎng)絡生物學技術與大數(shù)據(jù)結合，還可以很好地整合多種組學技術所產(chǎn)出的海量數(shù)據(jù)，建立有效的分析平臺，促進數(shù)據(jù)分析向更加系統(tǒng)化的方向發(fā)展。

3 中風病證候未來研究方向展望

3.1 繼續(xù)開展中風證候的組學研究

組學技術是網(wǎng)絡生物學方法的重要組成部分，它可以在某個特定時間對機體各個層面生命活動物質進行定性、定量分析，發(fā)現(xiàn)其中的特性與規(guī)律，從整體上評價由各種因素所致的生命體功能變化[42]。因此，利用以高通量系統(tǒng)論為指導的組學方法探索中風病證候實質，尋找證候及其分型的物質基礎，實現(xiàn)宏觀、微觀層面的證候分型仍是今后中風病證候研究的重要方向。尤其是近年來新興的代謝組學，它具有“終點放大”的特征，在中醫(yī)藥關鍵科學問題研究中具有突出優(yōu)勢。與蛋白組、基因組相比，代謝組包含的信息量更大，能夠更正確地反映細胞的功能水平[43]。未來我們將通過這些組學技術，挖掘中風病證相關的特定共性組分，對證候加以量化，做到證候與生物標記物的結合，從而促進證候的定量化和客觀化。

3.2 構建中風病證候網(wǎng)絡模型

證候網(wǎng)絡模型的建立是深入探索證候本質的重要手段，是對傳統(tǒng)中醫(yī)理論和現(xiàn)代實驗生物學研究的補充，它不僅可以用來預測中醫(yī)證候的基因型到臨床的表型的過程，還可預測病證的演變[37]。從組學研究的角度來看，基因組學、轉錄組學、代謝組學等在研究內容和方法上均存在差異，因此需要各種組學信息進行整合分析，并利用統(tǒng)計學方法構建科學可靠的證候網(wǎng)絡模型，通過計算模型獲得規(guī)律性認識，從而能夠預測中風證候的形成過程，揭示中風證候的本質。

3.3 建立生物信息數(shù)據(jù)庫和網(wǎng)絡分析平臺

隨著二代測序、三代測序的快速發(fā)展，如何整合多種組學技術所產(chǎn)出的海量數(shù)據(jù)，建立有效的網(wǎng)絡分析平臺是我們亟需解決的問題[18]。未來我們將利用網(wǎng)絡生物學對中風病證研究中不同來源、不同性質的數(shù)據(jù)進行整合，并結合數(shù)據(jù)挖掘技術進行病證數(shù)據(jù)的挖掘，構建現(xiàn)代生物學信息庫。這一數(shù)據(jù)庫除了具有信息管理和查詢的基本職能外，還能夠幫助進行數(shù)據(jù)分析和病證信息預測。并且今后隨著信息技術的進步和網(wǎng)絡生物學的深入研究，中醫(yī)證候數(shù)據(jù)的整合也將朝著更加智能化的方向發(fā)展[37]。

3.4 優(yōu)化中風病證候的動態(tài)演變研究

由于中風病起病急，變化快，研究中風證候的動態(tài)演變、把握患者的病情變化對于選方用藥有重要意義。因此近年來，學者們致力于研究中風病病程中不同時點的證候動態(tài)演變規(guī)律，如2008年鐘利群等[11]評估了中風急性期患者服用化瘀解毒湯后在入院后1-3天、4-7 天、8-10 天及11-14 天四個時相的證候量表分值變化，證實了中藥化瘀解毒湯良好的臨床療效；王平平等[44]對缺血性中風患者發(fā)病3 天、14 天、28 天、90天4個時點的單證候動態(tài)演變與預后的關系進行了分析，發(fā)現(xiàn)不同時點不同單證候演變對中風的預后影響不同；皮立宏等[45]研究了經(jīng)rt-PA 溶栓后的急性腦梗塞患者入院時、溶栓后24 h、溶栓后48 h 的3 個時間點的單證候動態(tài)演變，找到了溶栓后更具針對性的中醫(yī)治療策略。

上述研究均采用證候診斷量表，較好地解決了醫(yī)師經(jīng)驗化辨證的主觀性問題，對臨床有很大的指導作用。但是，由于樣本量和觀察時間的限制，這些研究都只闡釋了單證候的動態(tài)演變。而隨著網(wǎng)絡生物學技術的進步及大數(shù)據(jù)時代的到來，我們除了可以用數(shù)據(jù)挖掘技術代替?zhèn)鹘y(tǒng)的統(tǒng)計方法，使研究過程更加便利之外，或可將網(wǎng)絡生物學方法應用其中，開展大樣本、多中心、多證候、多時相的研究，使結果更客觀、具有更廣泛的指導意義。

3.5 結合臨床科研信息共享平臺，開展真實世界研究

不同于傳統(tǒng)的RCT 研究，真實世界研究不局限于隨機分組，而是提倡臨床數(shù)據(jù)來源于真實的臨床實踐環(huán)境，具有大樣本、多維度的優(yōu)勢，它將成為未來中醫(yī)臨床科研的必由之路[46]。而臨床科研信息共享系統(tǒng)[47]將成為真實世界研究的一個重要平臺，不僅使數(shù)據(jù)的來源更廣泛、質量更可靠、管理更方便，而且能夠使數(shù)據(jù)的處理更快捷、更規(guī)范。筆者所在團隊利用臨床科研信息共享系統(tǒng)，選取山東濰坊市中醫(yī)院7170名缺血性中風病住院患者的中醫(yī)臨床電子病歷（EMR）開展了一項真實世界研究。對診斷、癥狀及證候數(shù)據(jù)進行規(guī)范化處理后，我們構建了具有相同癥狀的患者相似性網(wǎng)絡，使用高效的社區(qū)檢測算法BGLL 確定患者亞群，然后對病例數(shù)量多的7 個亞群的中醫(yī)證候進行了分析，最終發(fā)現(xiàn)了與疾病表型特征相一致的證候特征，如其中的M3 亞群證候以風證、火證為主，“火”性炎上、“風”為陽邪，易襲陽位，而這一亞群中的患者恰恰較多地合并甲狀腺、眼科和耳鼻喉等病位偏上的疾病。以癥狀表型為基礎劃分患者亞群，得到證候與疾病表型相一致的結論，這在一定程度上證實了這種真實世界與復雜網(wǎng)絡相結合的研究方法具有合理性。未來我們可以嘗試將網(wǎng)絡生物學方法應用到真實世界研究，從微觀層面探索中風病證候的內在規(guī)律，為中風證候的客觀化尋找證據(jù)支持。

3.6 中風證候研究的多學科介入

學科的交叉與融合是現(xiàn)代科學技術發(fā)展的重要形式，而中醫(yī)證候又是一個多因素組成的復雜系統(tǒng)，因此，多學科的介入和合作將是中醫(yī)證候研究發(fā)展的必然趨勢[48]。除網(wǎng)絡生物學外，未來我們還將把生物信息學、數(shù)理學、數(shù)據(jù)挖掘技術、計算機科學等學科的理論方法和研究模式也引入到中風證候研究中，利用這些先進的信息技術手段，推動大樣本、多中心的研究，打破傳統(tǒng)的證候研究方式，創(chuàng)新思維模式，從新的視角揭示證候的微觀實質，為中風證候研究提供可靠的臨床依據(jù)，實現(xiàn)中風病辨證分型的客觀化，從而推動中醫(yī)現(xiàn)代化進程（圖1）。

圖1 中風證候未來研究方向

在當今時代，傳統(tǒng)的辨證方法仍適用于中醫(yī)日常診療，但顯然已難滿足群體化研究的需要，故而將群體辨證引入中醫(yī)現(xiàn)代化研究是大勢所趨。網(wǎng)絡生物學的產(chǎn)生和發(fā)展為群體辨證開辟了一條新路，使證候研究進入到大樣本、數(shù)據(jù)化、系統(tǒng)化的時代。目前，網(wǎng)絡生物學技術在中風的證候研究中已有應用，并且取得了不錯的成果。未來隨著高通量技術、組學技術、基因測序等的不斷進步，生物基因信息庫的不斷完善，會有越來越多的新方法用于中風研究，推動研究走出傳統(tǒng)的固有模式，逐步實現(xiàn)證候的客觀化、科學化，加快中醫(yī)藥現(xiàn)代化進程。