張 超, 李永仁, 郭永軍, 梁 健

大港原油對毛蚶部分抗氧化酶和代謝酶的影響研究

張 超, 李永仁, 郭永軍, 梁 健

(天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)科學(xué)系天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點實驗室, 天津 300384)

為研究港原油對毛蚶部分抗氧化酶和代謝酶的影響, 設(shè)置0.01、0.1、1、3 mg/L大港原油水溶液性成分(WSF), 采用暴露法研究毛蚶天津群體的鰓、斧足中超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)抗氧化酶等抗氧化酶及酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)、鈉/鉀泵(Na+/K+ATPase)、鈣泵(Ga2+/Mg2+ATPase)等代謝相關(guān)酶的活性變化, 測定丙二醛(MDA)含量, 采用整合生物標志物(Integrated biomarker response, IBR)進行分析。結(jié)果表明, 毛蚶鰓和斧足中SOD、CAT、GPX表現(xiàn)出一定的劑量-效應(yīng)關(guān)系, MDA含量呈先升高后降低的趨勢, 3 mg/L組表現(xiàn)出MDA累積; ACP、AKP、Na+/K+ATPase、Ga2+/Mg2+ATPase表現(xiàn)出一定劑量-效應(yīng)關(guān)系, 酸性磷酸酶較堿性磷酸酶響應(yīng)更迅速, Na+/K+ATPase較Ga2+/Mg2+ATPase更易受WSF影響; 鰓中酶類活性受WSF影響更明顯。鰓中SOD、GPX、MDA較斧足高, 而CAT則相反。斧足、鰓組織RIB值呈現(xiàn)先下降后上升趨勢, 與WSF濃度及暴露時間存在劑量-效應(yīng)關(guān)系和時間-效應(yīng)關(guān)系, 兩組之間存在差異性, 斧足累積RIB值高于鰓組織。

毛蚶; 原油; 抗氧化酶; 代謝酶

石油是一種構(gòu)成復(fù)雜的混合物, 主要成分為烴類物質(zhì), 如烷烴、芳烴和脂環(huán)烴等[1], 另外, 還含有苯系化合物、菲、蒽、芘及酚類等[2]多種毒性有機物, 對海洋生態(tài)系統(tǒng)極具破壞性。對海洋生物的影響包括物理作用和化學(xué)作用: 石油中難溶于水的部分可在與水表形成油膜, 隔絕水氣交換, 造成區(qū)域性缺氧[3-4]; 部分可與水形成穩(wěn)定的乳狀液, 其組分能低濃度溶入水中, 形成石油水溶液成分(water soluble fraction of oil, WSF)[5], 易隨水生動物呼吸黏附于體表和鰓, 造成呼吸障礙, 并誘發(fā)突變、致病、致畸等現(xiàn)象[6]。

貝類移動性差, 易受石油污染的長期影響, 造成石油烴在體內(nèi)累積, 抑制其免疫力, 增加疾病的易感性[7-8], 對貝類養(yǎng)殖造成危害并通過食物鏈進入人體, 危及健康[9], 因此, 關(guān)于海水經(jīng)濟動物對石油烴脅迫響應(yīng)的研究多有開展: 畢研軍[6]等研究了0#柴油慢性脅迫下縊蟶SOD、GPX、AKP的活性變化, 高翔[10]等研究消油劑處理燃料油對海水青鳉胚胎抗氧化酶活性的影響, 任加云[11]研究了石油烴暴露對四角蛤蜊和文蛤解毒指標的影響, 趙升[12]等研究了原油水溶性成分對紫貽貝的毒理效應(yīng)。自Beliaeff[13]等使用整合生物標志物(IBR)以來, 研究者引入IBR分析石油類污染物對水生生物的毒性效應(yīng): 蔣玫[14]等基于IBR研究0#柴油對黑鯛的毒性效應(yīng), 李磊[15]等基于IBR評價苯并芘對脊尾白蝦的毒性效應(yīng), 張林寶[16]等使用IBR研究0#柴油WSF對菲律賓蛤仔抗氧化功能的影響, Kim[17]等使用IBR研究了BaP對大西洋蝦肌肉組織的毒性效應(yīng),Song[18]等使用IBR研究了BaP、DDT對翡翠貽貝胚胎的影響。但缺少在脅迫下對代謝相關(guān)指標的分析及抗氧化、代謝綜合分析的研究。但未見石油污染對毛蚶(Lischke)相關(guān)酶指標影響的研究及IBR分析。

毛蚶, 俗稱毛蛤、毛蜆子, 屬軟體動物門, 雙殼綱, 列齒目, 蚶科, 毛蚶屬。多棲于低潮線以下至水深二十米的泥質(zhì)海底, 主要分布于日本、朝鮮和中國沿海, 以黃渤海資源尤為豐富, 是我國重要的海產(chǎn)經(jīng)濟貝類之一[19]。研究表明, 毛蚶對石油成分的富集能力強于多數(shù)海水經(jīng)濟生物[20], 本研究分析了毛蚶天津群體暴露于大港原油WSF, 其抗氧化、代謝及丙二醛等指標的變化特征, 旨在為毛蚶的養(yǎng)殖及石油污染凈化提供參考。

1 實驗方法

1.1 實驗材料

實驗用毛蚶為采自天津大神堂南部淺海(39°09′N, 117°59′E)的野生群體, 淡水清洗殼表, 于鹽度25、水溫16±3℃、pH 7.5的人工海水中暫養(yǎng)7 d, 選擇活力良好、體長在2.0 cm±0.5 cm的個體待用。

實驗用原油取自大港油田。按1︰9將大港原油與人工海水混合, 超聲分散4 h, 分液漏斗中靜置2 h, 取下層水相作為母液, 避光保存。紫外分光光度法測定石油母液濃度[21]。

1.2 實驗設(shè)計

設(shè)置4個WSF濃度梯度, 分別為0.01 mg/L, 0.1 mg/L, 1 mg/L, 3 mg/L, 1個對照組, 每組設(shè)3個重復(fù), 養(yǎng)殖箱規(guī)格為375 mm×255 mm×125 mm。每箱加海水5 L, 內(nèi)置毛蚶20只, 實驗期間不充氧、不投餌。為穩(wěn)定石油濃度, 每天換水2次且以封口膜封口。從實驗第1 d開始, 每2 d取樣1次, 至第9 d結(jié)束共取樣5次, 采樣時, 每組取毛蚶1只, 分離斧足及鰓組織, 0.86%生理鹽水沖洗, 裝入凍存管, –80℃凍存。

1.3 酶指標的測定

取組織樣本0.1 g, 加0.86%生理鹽水0.9 mL, 勻漿, 使用南京建成公司試劑盒測定斧足及鰓組織總蛋白、丙二醛(MDA)含量, 以及超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)、酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)、鈉/鉀泵(Na+/K+ATPase)、鈣泵(Ga2+/Mg2+ATPase)的活性。

1.4 數(shù)據(jù)處理

原始數(shù)據(jù)經(jīng)Microsoft excel 計算結(jié)果, 使用平均值±標準差(Means±SD)表示, 采用SPSS軟件進行單因素方差分析(ANOVA)和Duncan檢驗, 參考Beliaeff[13]等方法進行RIB計算。

2 實驗結(jié)果

2.1 抗氧化指標及脂質(zhì)過氧化物含量

大港原油對毛蚶鰓組織抗氧化指標的影響見圖1。與對照組比較, 0.01 mg/L組SOD、MDA差異不顯著(0.05), CAT 在1 d顯著下降(0.05), GPX在5 d顯著上升(0.05); 0.1 mg/L組SOD在5 d顯著上升(0.05), CAT在1 d顯著下降(0.05), 3 d、7 d顯著上升(0.05), GPX在5 d顯著上升(0.05), MDA差異不顯著(0.05); 1 mg/L組SOD在5 d、7 d顯著上升(0.05), CAT在1 d顯著下降(0.05), 3 d、7 d顯著上升(0.05), GPX在5 d顯著上升(0.05), MDA無顯著變化(0.05); 3 mg/L組SOD實驗期間顯著上升(0.05), CAT在1 d下降(0.05), 3 d、5 d顯著上升(0.05), GPX實驗期間與對照差異不顯著(0.05), MDA在5 d、9 d有顯著上升(0.05)。

鰓組織中, SOD在0.01 mg/L組持續(xù)抑制, 0.1 mg/L組、1 mg/L組1 d、3 d與對照組差異不顯著(0.05), 之后表現(xiàn)出誘導(dǎo)-抑制規(guī)律, 3 mg/L組呈誘導(dǎo)-抑制-誘導(dǎo)趨勢; 各實驗組CAT呈抑制-誘導(dǎo)趨勢, 3 mg/L組最為明顯; 各實驗組GPX在1 d、3 d均無顯著差異(0.05), 之后表現(xiàn)出誘導(dǎo)-抑制現(xiàn)象。各實驗組MDA在1 d、3 d均無顯著差異(0.05), 之后呈誘導(dǎo)-抑制趨勢, 1 mg/L組較其它實驗組變化最小。

大港原油對毛蚶斧足抗氧化指標的影響見圖2。與對照組比較, 0.01 mg/L組SOD差異不顯著(0.05), CAT在1 d有顯著上升(0.05), GPX在1 d、3 d、5 d、7 d顯著上升(0.05), MDA實驗期間差異不顯著(0.05); 0.1 mg/L組SOD、GPX、MDA實驗期間與對照差異不顯著(0.05), CAT在3 d出現(xiàn)顯著下降(0.05), 7 d、9 d顯著上升(0.05); 1 mg/L組SOD實驗期間與對照差異不顯著(0.05), CAT在3 d顯著下降(0.05), GPX在9 d顯著下降(0.05), MDA在3d出現(xiàn)顯著上升(0.05); 3 mg/L組SOD在3 d顯著上升(0.05), CAT在7 d、9 d顯著上升(0.05), GPX在1 d、3 d、7 d顯著上升(0.05), MDA在3 d、7 d顯著上升(0.05), 其余時間與對照差異不顯著(0.05)。

斧足中, SOD變化相對鰓組織不敏感, 低濃度組(0.01 mg/L、0.1 mg/L)在1 d、3 d、5 d無顯著變化(0.05), 之后被誘導(dǎo), 1 mg/L組5 d后被抑制, 3 mg/L組基本呈誘導(dǎo)趨勢; 各實驗組CAT均呈誘導(dǎo)-抑制-誘導(dǎo)趨勢; 3 mg/L組GPX未見明顯規(guī)律, 1 mg/L組呈誘導(dǎo)-抑制趨勢, 其它組均呈誘導(dǎo)趨勢。各實驗組MDA基本呈誘導(dǎo)-抑制趨勢, 但高濃度組(1 mg/L、3 mg/L)較低濃度組(0.01 mg/L、0.1 mg/L)誘導(dǎo)峰值后移, 表現(xiàn)出一定的劑量-效應(yīng)關(guān)系。

圖1 大港原油對毛蚶鰓SOD、CAT、GPX活性和MDA含量的影響

注: *表示與對照組差異顯著(0.05)

圖2 大港原油對毛蚶斧足SOD、CAT、GPX活性和MDA含量的影響

注: *表示與對照組差異顯著(0.05)

2.2 代謝酶活性

大港原油對毛蚶鰓組織代謝酶活性的影響見圖3。與對照組比較, 0.01 mg/L組ACP在5 d顯著上升(0.05), AKP在1 d顯著下降(0.05), Na+/K+ATPase在7 d出現(xiàn)顯著上升(0.05), Ga2+/Mg2+ATPase在9 d顯著上升(0.05); 0.1 mg/L組ACP在5 d顯著上升(0.05), AKP在1 d顯著下降(0.05), Na+/K+ATPase在1 d、7 d顯著上升(0.05)Ga2+/Mg2+ATPase在1 d顯著上升(0.05); 1 mg/L組ACP實驗期間與對照差異不顯著(0.05), AKP在3 d顯著上升(0.05), Na+/ K+ATPase在1 d、3 d、7 d顯著上升(0.05), Ga2+/Mg2+ATPase在1 d顯著上升(0.05); 3 mg/L組ACP在1 d、5 d、7 d顯著上升(0.05), AKP在3 d、5 d、7 d顯著上升(0.05), Na+/K+ATPase在1 d、5 d顯著上升(0.05), 7 d顯著下降(0.05), Ga2+/Mg2+ATPase在1 d、3 d、7 d顯著上升(0.05), 5 d、9 d顯著下降(0.05)。

圖3 大港原油對毛蚶鰓ACP、AKP、Na+/K+ ATPase、Ga2+/Mg2+ ATPase活性的影響

注: *表示與對照組差異顯著(0.05)

鰓組織中, 3 mg/L組ACP呈誘導(dǎo)趨勢, 且誘導(dǎo)峰值隨WSF濃度增加后移, 其他組呈誘導(dǎo)-抑制趨勢, 表現(xiàn)出一定的劑量-效應(yīng)關(guān)系; 3 mg/L組AKP呈誘導(dǎo)趨勢, 但第9 d與對照組差異不顯著(0.05), 其余各實驗組AKP無明顯規(guī)律; 各實驗組Na+/K+ATPase在1 d顯著誘導(dǎo), 之后逐漸波動至對照水平; 低濃度組Ga2+/Mg2+ATPase基本呈誘導(dǎo)趨勢, 高濃度組基本呈誘導(dǎo)-抑制趨勢。

大港原油對毛蚶斧足代謝酶活性的影響見圖4。與對照組比較, 0.01 mg/L組ACP在1 d、3 d顯著上升(0.05), AKP在9 d顯著上升(P<0.05), Na+/K+ATPase在5 d顯著上升(0.05), Ga2+/Mg2+ATPase實驗期間與對照差異不顯著(0.05); 0.1 mg/L組ACP在3 d顯著下降(0.05), 7 d顯著上升(0.05), AKP在1 d、7 d顯著上升(0.05), 3 d顯著下降(0.05), Na+/K+ATPase在3 d顯著下降(0.05), 5 d、9 d顯著上升(0.05), Ga2+/Mg2+ATPase在3 d、5 d顯著上升(0.05); 1 mg/L組ACP在9 d顯著上升(0.05), AKP在3 d、5 d顯著下降(0.05), 7 d顯著上升(0.05), Na+/K+ATPase在5 d顯著上升(0.05), Ga2+/Mg2+ATPase在1 d、5 d顯著上升(0.05); 3 mg/L組ACP在1 d顯著下降(0.05), 9 d顯著上升(0.05), AKP在1 d顯著上升(0.05), 5 d顯著下降(0.05), Na+/K+ATPase在7 d顯著下降(0.05), Ga2+/Mg2+ATPase在1 d、9 d顯著上升(0.05), 7 d顯著下降。

斧足中, 各實驗組 ACP基本呈誘導(dǎo)趨勢; 低濃度組AKP呈誘導(dǎo)趨勢, 高濃度組未見明顯規(guī)律; 高濃度組Na+/K+ATPase呈誘導(dǎo)趨勢, 低濃度組未見明顯規(guī)律; 0.01 mg/L組Ga2+/Mg2+ATPase實驗期間與對照組差異不顯著(0.05), 其他組在1 d被誘導(dǎo), 后期無明顯規(guī)律。

圖4 大港原油對毛蚶斧足ACP、AKP、Na+/K+ ATPase、Ga2+/Mg2+ ATPase活性的影響

注: *表示與對照組差異顯著(0.05)

2.3 整合生物標志物分析

大港原油對毛蚶的IBR見圖5—10。圖5—8中星狀圖多邊形面積即為RIB值, 結(jié)果見圖9—10?？寡趸笜朔矫? 不同取樣時間, 0.1 mg/L、1 mg/L、3mg/L組表現(xiàn)出強烈的抑制或誘導(dǎo), 0.01 mg/L組較對照組變化較小; 代謝酶活性方面, 各實驗組較對照組均有抑制或誘導(dǎo)趨勢。兩種組織中, 以斧足的測試指標覆蓋面積更大, 但相關(guān)指標變化較鰓組織小。

抗氧化指標方面, 鰓組織各實驗組RIB值均在5 d時最高, 斧足低濃度組(0.01 mg/L, 0.1 mg/L)RIB值在5 d最高, 高濃度組(1 mg/L, 3 mg/L)RIB峰值滯后; 代謝酶活性方面, 鰓組織RIB值較斧足變化大, 各實驗組峰值均在5 d及7 d出現(xiàn), 并隨WSF濃度增加而滯后。

抗氧化指標方面, 鰓組織累積RIB值較斧足低, WSF濃度低于1 mg/L時, 兩種組織累積RIB值與WSF濃度呈反相關(guān); 代謝酶活性方面, 兩種組織累積RIB值差異不大, 鰓組織累積RIB值與WSF濃度呈反相關(guān)。

3 討論

外源物質(zhì)通過影響或阻斷呼吸鏈、電子傳遞鏈和酶促反應(yīng)等體內(nèi)正常生理代謝, 影響生物生存、生長及繁衍[22-23]。WSF通過產(chǎn)生大量的氧自由基對機體產(chǎn)生氧化壓力, 導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化、酶失活等一系列氧化損傷[24]。石油可溶性組分通過I相代謝酶細胞色素P450酶系代謝成為更具極性的代謝中間產(chǎn)物進入生物體內(nèi), 這些代謝產(chǎn)物在Ⅱ相代謝酶催化下與內(nèi)源分子結(jié)合, 加快代謝產(chǎn)物排出體外的速度, 另一方面, 在代謝過程中產(chǎn)生的自由基誘導(dǎo)抗氧化酶類活性增加, 導(dǎo)致機體抗氧化酶等指標變化[25-27], 各類酶通過聯(lián)合作用組成機體的抗氧化酶防御系統(tǒng), 對積累的活性氧進行清除[28]。毛蚶作為濾食性軟體動物, 以非特異性免疫應(yīng)對外源物, 鰓作為其內(nèi)外交換的第一環(huán), 受WSF影響最為直接, 而肌肉組織對應(yīng)激的響應(yīng)較為滯后, 對這兩種組織的檢測研究, 可反映WSF對毛蚶機體的影響。

圖5 大港原油對毛蚶鰓抗氧化能力影響RIB星狀圖

圖7 不同時間下大港原油對毛蚶斧足抗氧化能力影響RIB星狀圖

圖8 不同時間下大港原油對毛蚶斧足代謝酶活性影響RIB星狀圖

圖9 大港原油脅迫下毛蚶鰓RIB值

圖10 大港原油脅迫下毛蚶斧足RIB值

3.1 抗氧化指標及脂質(zhì)過氧化物含量

生物體內(nèi)存在的抗氧化酶系統(tǒng), 主要包括SOD、CAT、GPX等。SOD清除體內(nèi)超氧陰離子自由基使之形成H2O2, 阻止脂質(zhì)過氧化[29-30]。H2O2通過氧化作用在機體內(nèi)生成過氧化物, 造成機體組織生物膜損傷、磷脂功能障礙、DNA斷裂等[31]。CAT介導(dǎo)H2O2生成H2O和O2, 降低氧化損傷。MDA為脂質(zhì)過氧化的終產(chǎn)物, 可間接反映機體受自由基攻擊的程度[32]。本研究中, 毛蚶鰓組織抗氧化酶總體表現(xiàn)出一定的劑量-效應(yīng)關(guān)系, 這與趙升[12]等對紫貽貝的相關(guān)研究結(jié)果相似, 其中, SOD和CAT較不敏感, 初期未見顯著性差異, 從5 d開始表現(xiàn)出正負誘導(dǎo)反應(yīng)和抑制反應(yīng), 且隨石油烴濃度的增加, 反應(yīng)越明顯; MDA先上升后下降, 3 mg/L組MDA在5d出現(xiàn)峰值, 可能與SOD在5 d活性降低有關(guān), 由此引發(fā)后續(xù)SOD活性持續(xù)上升, 但同期CAT活性出現(xiàn)下降, 造成MDA的累積并于9 d時顯著上升。蔣玫[14]等研究0#柴油對黑鯛的毒性效應(yīng)時發(fā)現(xiàn)鰓和肌肉中SOD、CAT、MDA呈現(xiàn)抑制誘導(dǎo)規(guī)律, 且MDA在肌肉中含量更高, 與本研究結(jié)果不完全相同, 可能與WSF濃度及實驗生物種類有關(guān)。GPX可抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)并部分替代CAT發(fā)揮作用[33], 本研究中, GPX表現(xiàn)出明顯劑量-效應(yīng)關(guān)系, 且3 mg/L組較其他組效應(yīng)強, 說明3 mg/L的石油烴濃度超出毛蚶的短期耐受極限。任加云[34]等研究石油烴對櫛孔扇貝酶活性影響時也發(fā)現(xiàn)其SOD、GPX低濃度誘導(dǎo)抑制, 高濃度抑制的現(xiàn)象。

3.2 代謝酶

磷酸酶在機體解毒、骨化及消化吸收轉(zhuǎn)運過程中發(fā)揮作用, 同時參與細胞調(diào)節(jié)[35], ACP是溶酶體的標志酶, 可破壞表面帶有磷酸酯的外源物, 以預(yù)防感染[36]; AKP與Ca2+的吸收、膜的吸收和轉(zhuǎn)運及維持細胞內(nèi)磷酸濃度有關(guān), 在代謝過程中起到調(diào)控、解毒作用, 還與貝類殼角蛋白等蛋白質(zhì)的分泌有關(guān), 對貝殼的形成有重要作用[37]。本實驗中, 毛蚶斧足ACP表現(xiàn)出明顯的劑量—效應(yīng)關(guān)系, 但鰓組織ACP變化規(guī)律不明顯, AKP在鰓組織響應(yīng)更迅速, 這與林芳[38]等對翡翠貽貝胚胎的相關(guān)研究結(jié)果類似, 但任加云[34]發(fā)現(xiàn)櫛孔扇貝在1 mg/L石油暴露下, AKP除在0.5 d被激活外其余時間均被抑制, 這可能與毛蚶作為底棲貝類對底質(zhì)高石油環(huán)境的長期適應(yīng)有關(guān)。

P型離子泵存在于細胞質(zhì)膜, 石油污染導(dǎo)致毛蚶體內(nèi)過氧化物增加, 影響細胞膜流動性及跨膜運輸系統(tǒng), 張愛君[39]等發(fā)現(xiàn)石油污染的牡蠣細胞核、線粒體腫脹。本實驗中, 毛蚶鰓組織和斧足兩種P型離子泵(Na+/K+ATPase和Ga2+/Mg2+ATPase)均表現(xiàn)出時間-效應(yīng)關(guān)系, 且最大值逐漸降低的趨勢, 這與孫忠訓(xùn)[40]等對斑馬魚鰓鈉/鉀ATP酶的研究結(jié)果類似。

3.3 綜合分析

本研究中, 鰓組織相比斧足對石油脅迫更敏感, 可能與組織結(jié)構(gòu)差異有關(guān)。斧足CAT活性更高, 對比兩者GPX、MDA的差異, 推測由于鰓組織中CAT活性不足以清除氧自由基產(chǎn)生的過氧化氫, 而使鰓組織GPX大量誘導(dǎo), 蔣玫等[14]對黑鯛的鰓和肌肉組織抗氧化指標的研究中也發(fā)現(xiàn)了類似效應(yīng)?？寡趸割惣癕DA在鰓組織中的累積RIB值較斧足低, 這與李磊[15]等研究BaP對脊尾白蝦的毒性效應(yīng)結(jié)果類似, 但蔣玫[14]等發(fā)現(xiàn)黑鯛各組織氧化應(yīng)激能力為肝臟、鰓、肌肉遞減, 推測因?qū)嶒瀯游锏姆N類、體型差異而導(dǎo)致, 例如小體型或低等的水生動物大量組織與水體均有接觸, WSF可經(jīng)多途徑侵入機體, 造成此類現(xiàn)象。

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Effects of Dagang crude oil on partial antioxidant enzymes and metabolic enzymes inLischke

ZHANG Chao, LI Yong-ren, GUO Yong-jun, LIANG Jian

(Tianjin Key Laboratory of Aqua-Ecology and Aquaculture, College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China)

To measure the activities of antioxidant enzymes, i.e., superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), and glutathione peroxidase (GPX), and metabolic enzymes, i.e., acid phosphatase (ACP), alkaline phosphatase (AKP), Na+/K+ATPase, and Ca2+/Mg2+ATPase, in the gill and muscle tissues of local bivalve, the Tianjin population ofLischke was used. The lipid oxidation degree (content of malondialdehyde [MDA]) was also measured. Exposure tests of four concentrations (i.e., 0.01, 0.1, 1, and 3 mg/L) of the water-soluble fraction (WSF) of Dagang crude oil were conducted. The integrated biomarker response index was used. Results showed that, under the influence of the WSF, the SOD, CAT, and GPX activities exhibited a dose–effect relationship. MDA initially increased and subsequently decreased. In both gill and muscle tissues, MDA accumulated in the 3 mg/L group. The ACP, AKP, and Ca2+/Mg2+ATPase activities showed a slight dose–effect relationship. ACP responded more rapidly than AKP. Na+/K+ATPase was more vulnerable than Ca2+/Mg2+ATPase. During the exposure tests, the WSF influenced the gill tissues more obviously than the muscle tissues. As a result, the gill exhibited higher SOD, GPX, and MDA activities than the axe foot. By contrast, the gill exhibited lower CAT activity than the axe foot. The RIBvalues of the muscle and gill tissues initially decreased and subsequently increased. Dose–effect and time–effect relationships between WSF concentration and exposure time were observed. Moreover, differences between the two groups were detected. The cumulative RIBvalues of muscle tissues were higher than that of gill tissues.

Lischke; crude oil; antioxidant enzymes; metabolic enzymes

Jul. 22, 2019

S912

A

1000-3096(2020)03-0113-10

10.11759/hykx20190722001

2019-07-22;

2019-11-26

國家重點研發(fā)計劃(2018YFD0901404); 天津市種業(yè)科技重大專項(17ZXZYNC00020); 天津市農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化與推廣項目(201602050);天津市現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系-水產(chǎn)-貝類養(yǎng)殖崗位(ITTFRS2017013); 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項資金(CARS49)

[National Key R&D Program of China, No. 2018YFD0901404; Tianjin major project of seed science and technology, No. 17ZXZYNC00020; Tianjin agricultural science and technology achievements transformation and promotion project, No. 201602050; Tianjin modern Agro-indurty technology research systen-aquaculture-shellfish breeding positions, No. ITTFRS2017013; Earmarked fund for modern Agro-indurty technology research systen, No. CARS-49]

張超(1990-), 男, 山西臨汾人, 碩士研究生, 主要從事海水養(yǎng)殖技術(shù)研究, E-mail: zchao2009@163.com; 李永仁,通信作者, 副教授, E-mail: lyr1018@163.com

(本文編輯: 趙衛(wèi)紅)