常文龍 趙靜 蔡會欣 盧軍棟 李寶新 孫吉瑞 張浩

非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)是肺癌最主要的類型，約占到肺癌總數(shù)的80%以上。 由于肺癌早期臨床癥狀缺乏典型性，僅有少數(shù)病人在早期階段得到確診并通過手術(shù)切除得以控制，絕大多數(shù)病人臨床確診時已屬中晚期，失去了最佳手術(shù)時機，故病人遠(yuǎn)期生存差［1］。因此，積極尋找有效的診斷與病情監(jiān)測指標(biāo)，對改善病人預(yù)后具有重要價值。 本研究通過監(jiān)測NSCLC 病人血清中癌胚抗原(CEA)、細(xì)胞角蛋白19 片段抗原(CYFRA)21-1、組織多肽特異性抗原(TPS)、IL-33 的表達(dá)水平，旨在研究這些指標(biāo)在NSCLC 的發(fā)生及發(fā)展中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017 年1 月至2018 年1 月我院收治的150 例NSCLC 病人(100 例老年病人＋50 例非老年病人)為肺癌組，所有病人均經(jīng)影像學(xué)檢查、病理組織學(xué)檢查等確診。 100 例老年NSCLC 病人中男59 例，女41 例；年齡60 ～87 歲，平均(71.5±5.6)歲；病理分型：鱗癌55 例，腺癌45 例；臨床分期：Ⅰ期29例，Ⅱ期34 例，Ⅲ期21 例，Ⅳ期16 例。 50 例非老年NSCLC 病人中男30 例，女20 例；年齡33 ～59 歲，平均(53.2±4.9)歲；病理分型：鱗癌28 例，腺癌22 例；臨床分期：Ⅰ期14 例，Ⅱ期17 例，Ⅲ期11 例，Ⅳ期8 例。另選取同期收治的肺部良性病變病人50 例為良性組，健康體檢者50 例作為對照組。 良性組男30 例，女20例；年齡60～90 歲，平均(72.4±5.8)歲；病理類型：肺結(jié)核13 例，肺囊腫9 例，COPD 8 例，肺血管瘤7 例，肺錯構(gòu)瘤7 例，肺部炎性病變6 例。 對照組男32 例，女18 例；年齡60～88 歲，平均(72.0±6.4)歲。 所有研究對象均無急慢性感染疾病及自身免疫性疾病，無DM病史、肝炎病史、神經(jīng)系統(tǒng)疾病病史。 排除肝腎功能不全、近期接受過放化療、凝血系統(tǒng)異常、有精神障礙的病人。

1.2 方法 所有研究對象晨起采集空腹靜脈血3 mL，以3000 r/min 離心4 min，分離血清，Ep 管封存，置于－86℃低溫冰箱凍存待測。 使用羅氏E602 電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑檢測血清CEA、CYFRA21-1、TPS 水平；采用ELISA 法測定血清IL-33水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 20.0 軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析。 計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，2 組間比較采用獨立樣本t 檢驗，多組間比較采用F 檢驗；計數(shù)資料以百分率(%)表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平比較 肺癌組血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平均顯著高于良性組與對照組(P＜0.01)，且良性組血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平亦均顯著高于對照組(P ＜0.01)。 肺癌組中不同年齡亞組病人間血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 見表1。

表1 各組血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平比較

表1 各組血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平比較

注：與對照組比較，**P＜0.01；與良性組比較，△△P＜0.01

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2.2 老年NSCLC 病人血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平與病理分型的關(guān)系 肺腺癌病人的血清CEA 水平顯著高于肺鱗癌病人(P＜0.01)，血清CYFRA21-1、IL-33 水平均顯著低于肺鱗癌病人(P ＜0.01)；不同病理分型病人血清TPS 水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 見表2。

表2 老年NSCLC 病人血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平與病理分型的關(guān)系

表2 老年NSCLC 病人血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平與病理分型的關(guān)系

注：與鱗癌組比較，**P＜0.01

病理分型 CEA（ng/mL） CYFRA21-1（ng/mL） TPS（U/L） IL-33（pg/mL）腺癌組（n＝45） 32.44±9.23** 7.43±1.92** 327.54±69.94 48.37±9.23**鱗癌組（n＝55） 19.56±11.24 15.08±2.48 341.07±85.43 55.42±12.45

2.3 老年NSCLC 病人血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平與臨床分期的關(guān)系 Ⅰ＋Ⅱ期組血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平均顯著低于Ⅲ＋Ⅳ期組(P＜0.01)，見表3。

表3 老年NSCLC 病人血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平與臨床分期的關(guān)系

表3 老年NSCLC 病人血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平與臨床分期的關(guān)系

注：與Ⅲ＋Ⅳ期組比較，**P＜0.01

臨床分期 CEA（ng/mL） CYFRA21-1（ng/mL） TPS（U/L） IL-33（pg/mL）Ⅰ＋Ⅱ期組（n＝63） 11.38±7.48** 5.32±1.94** 252.44±72.56** 41.49±7.34**Ⅲ＋Ⅳ期組（n＝37） 50.24±9.26 20.41±2.35 437.23±84.18 75.38±15.72

2.4 老年NSCLC 病人血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系 有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病人血清CEA、CYFRA21-1 水平均顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P＜0.05)；有、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的血清TPS、IL-33水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 見表4。

表4 老年NSCLC 病人血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

表4 老年NSCLC 病人血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

注：與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者比較，*P＜0.05，**P＜0.01

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 CEA（ng/mL） CYFRA21-1（ng/mL） TPS（U/L） IL-33（pg/mL）有（n＝33） 29.34±8.24* 13.74±1.87** 345.26±72.37 54.24±11.24無（n＝67） 24.96±9.07 9.24±2.57 331.94±93.21 52.34±12.81

2.5 4 項指標(biāo)單獨檢測與聯(lián)合檢測對老年NSCLC 的診斷價值 4 項指標(biāo)單獨檢測時，TPS 的敏感度(88.00%)、準(zhǔn)確度(88.50%)最高；4 項指標(biāo)聯(lián)合檢測時的敏感度(100.00%)、準(zhǔn)確度(94.00%) 又高于TPS。 見表5。

表5 4 項指標(biāo)單獨檢測與聯(lián)合檢測對老年NSCLC 的診斷價值

3 討論

相關(guān)流行病統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，肺癌是全球發(fā)病率與死亡率最高的惡性腫瘤，5 年生存率僅為15%左右［2］。NSCLC 是肺癌的主要類型，其發(fā)生與職業(yè)接觸、環(huán)境污染、不良飲食、吸煙、缺乏鍛煉等多種因素有關(guān)，近年來發(fā)病率有明顯升高趨勢。 由于NSCLC 臨床發(fā)現(xiàn)多較晚，多數(shù)病人喪失了手術(shù)根治的機會，臨床轉(zhuǎn)歸較差，病死率高。 若能利用有效的篩查手段，早期發(fā)現(xiàn)、早期治療，有利于改善NSCLC 病人預(yù)后。 腫瘤標(biāo)志物是腫瘤和宿主機體間相互作用產(chǎn)生的存在于組織、細(xì)胞、體液中的物質(zhì)，主要用于惡性腫瘤的診斷、良惡性腫瘤的鑒別診斷、療效監(jiān)測以及預(yù)后評估中。 目前與NSCLC 關(guān)系密切的腫瘤標(biāo)志物及相關(guān)血清指標(biāo)較多，但多數(shù)指標(biāo)單獨檢測時敏感度和(或)特異度低。 已有研究證實，肺癌組織具有顯著特異性，通過聯(lián)合檢測相關(guān)血清標(biāo)志物，有利于早期診斷肺癌［3］。 本研究結(jié)果顯示，肺癌組血清CEA、CYFRA21-1、TPS、IL-33 水平均顯著高于良性組與對照組(P＜0.01)，且將CEA、CYFRA21-1、TPS 和IL-33 聯(lián)合起來檢測用于診斷NSCLC 的敏感度與準(zhǔn)確度達(dá)到了 100.00% 與94.00%，相對于各項指標(biāo)單獨檢測均有提高，與以往研究相符。

CEA、CYFRA21-1 及TPS 均是目前常用于肺癌診斷及監(jiān)測的腫瘤標(biāo)志物。 其中CEA 是一種酸性糖蛋白，在正常人體中含量極低，但在惡性腫瘤病人體內(nèi)，CEA 含量可隨癌細(xì)胞增殖數(shù)目的增加而明顯升高，對肺癌的診斷具有一定的價值。 據(jù)統(tǒng)計，肺癌病人中約有65%的病人存在血清CEA 高表達(dá)，且肺腺癌病人相對于肺鱗癌與小細(xì)胞肺癌病人的血清CEA 水平更高［4］。 本研究中，老年肺腺癌病人的血清CEA 水平顯著高于老年肺鱗癌病人，與上述研究一致。 CYFRA21-1 在正常支氣管鱗狀上皮中僅有少量表達(dá)，而在惡性鱗狀上皮中，因蛋白酶的激活加速了細(xì)胞角蛋白的分離降解，導(dǎo)致細(xì)胞角蛋白片段被大量釋放入血，使血清CYFRA21-1 水平異常升高。 既往報道顯示其主要表達(dá)于鱗癌細(xì)胞內(nèi)，而腺癌與小細(xì)胞肺癌也有表達(dá)［5-6］。本研究中，老年肺鱗癌病人的血清CYFRA21-1 水平顯著高于老年肺腺癌病人，與多數(shù)研究一致。 TPS 是一種癌胎性蛋白，在機體正常組織細(xì)胞中均有廣泛分布，但含量極低，而對于上皮來源的惡性腫瘤以及轉(zhuǎn)移瘤，TPS 呈高表達(dá)狀態(tài)，相較于其他腫瘤標(biāo)志物，其更能反映出腫瘤細(xì)胞的活性。 TPS 主要于細(xì)胞周期S 期與G2期合成，待細(xì)胞分裂數(shù)目減少后會迅速流出細(xì)胞外，故細(xì)胞分裂階段測得的TPS 含量顯著增加。 大量研究證實，TPS 水平高低可反映腫瘤細(xì)胞的分裂與增殖活性，能提高惡性腫瘤的確診率，并能反映化療效果，預(yù)示腫瘤復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，可用于NSCLC 的鑒別診斷以及預(yù)后的判斷［7］。 近年來，盡管肺癌的檢查手段逐漸增多，但準(zhǔn)確地進(jìn)行肺癌分期仍較困難。 肺癌的分期不僅與病人的預(yù)后直接相關(guān)，也關(guān)系到治療方案的選擇。 對于Ⅰ～Ⅱ期的NSCLC 病人，手術(shù)治療切除是最佳治療手段，但對于Ⅲ～Ⅳ期的病人則多不建議行手術(shù)治療，臨床往往采取的是放療或化療。 既往研究顯示，TPS 水平會隨肺癌分期的增加而顯著上升，其中Ⅲ～Ⅳ期病人的血清TPS 水平相對于Ⅰ～Ⅱ期病人顯著升高［8］。 本研究也得出了同樣的結(jié)論，即Ⅲ～Ⅳ期NSCLC 病人的血清CEA、CYFRA21-1、TPS 水平均顯著高于Ⅰ～Ⅱ期者。

機體免疫功能失調(diào)是肺癌形成與發(fā)展的重要機制，而細(xì)胞因子在免疫系統(tǒng)的維持和運轉(zhuǎn)上發(fā)揮著重要作用。 IL-33 為IL-1 家族成員之一，早期研究認(rèn)為其主要局限于感染、炎癥、變態(tài)反應(yīng)、自身免疫性疾病等領(lǐng)域，但近年來逐漸有研究發(fā)現(xiàn)其在肺癌等多種腫瘤的發(fā)生與發(fā)展過程中同樣發(fā)揮著重要作用［9］。 牛淑麗等［10］的研究顯示，NSCLC 惡性程度越高，病人體內(nèi)血清IL-33 水平上升越明顯，二者呈顯著正相關(guān)(r ＝0.31)。 肺癌惡性程度越高，肺部血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷越明顯，導(dǎo)致IL-33 分泌顯著增多，而異常增多的IL-33 與特異性受體ST2 結(jié)合后可進(jìn)一步刺激組織細(xì)胞生成其他炎癥細(xì)胞因子，使組織病變加速。 本研究結(jié)果顯示，肺癌組血清IL-33 水平相對于良性組及對照組均有顯著升高，提示IL-33 可能參與了NSCLC 的發(fā)生發(fā)展。 本研究通過進(jìn)一步分析血清IL-33 與臨床病理特征的關(guān)系得出，血清IL-33 水平與NSCLC 病人的病理分型、臨床分期均密切相關(guān)，其中鱗癌病人的血清IL-33 水平顯著高于腺癌，臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期者的血清IL-33 水平顯著高于Ⅰ～Ⅱ期者。 提示NSCLC 病人體內(nèi)血清IL-33 表達(dá)水平越高，腫瘤的惡性程度越高。

綜上所述，老年NSCLC 病人血清CEA、CYFRA21-1、TPS 和IL-33 均處于高表達(dá)狀態(tài)，且其水平高低與腫瘤惡性程度呈正相關(guān)，通過聯(lián)合檢測上述指標(biāo)對NSCLC 的早期診斷及病情監(jiān)測具有重要價值。