亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        田七內(nèi)生細(xì)菌篩選及其促生長特性初探

        2020-04-09 08:18:03黃柳彬滕崢黃穎樺楊翠鳳
        安徽農(nóng)學(xué)通報 2020年5期

        黃柳彬 滕崢 黃穎樺 楊翠鳳

        摘 要:以廣西百色少數(shù)民族地區(qū)藥用植物田七為研究對象,從中分離篩選出9株活性較高的內(nèi)生細(xì)菌,編號為TQ1~TQ9,通過促生長特性研究發(fā)現(xiàn),有6株菌株具有固氮能力,3株具有溶磷能力,6株具有解鉀能力,7株能產(chǎn)IAA,4株能產(chǎn)嗜鐵素,2株對芒果炭疽病菌具有拮抗作用。其中,TQ1和TQ9至少具備5種以上所測試的促生長特性,是潛在的有益菌株。研究結(jié)果為進(jìn)一步開發(fā)微生物菌肥或開展生物防治研究奠定了一定的基礎(chǔ)。

        關(guān)鍵詞:田七;內(nèi)生細(xì)菌;篩選;促生長特性

        中圖分類號 TQ464.3文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A文章編號 1007-7731(2020)05-0048-02

        田七又稱三七,是五加科人參屬多年生的草本植物,其地下莖供藥用,在廣西靖西被授予“田七之鄉(xiāng)”的稱號[1],是滇黔桂地區(qū)名貴藥用植物。植物促生長內(nèi)生菌是植物中的有益菌,能促進(jìn)植株增加產(chǎn)量或提升質(zhì)量。植物內(nèi)生細(xì)菌類群繁多,有固氮菌屬、根瘤菌屬、芽孢桿菌屬、假單孢菌屬、柄桿菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬、黃桿菌屬、有色桿菌屬、無色桿菌屬等,其中芽孢桿菌屬和假單孢桿菌屬在植物中最為常見[2]。歐陽桂爐[3]從中藥太子參中獲得了KTS-I-1(具有抗根腐病、解鉀功能)、TR-10J、PTS-2-1(具有溶磷功能)(具有溶磷功能)、ATS-1-1、ATR-2-3(具有固氮功能)的菌株,其所產(chǎn)生的促生長素促進(jìn)了玉米種子和太子參的發(fā)芽率、幼苗長、胚根長、幼苗干重和根干重增加,從而促進(jìn)了植物的生長發(fā)育。劉永紅等[4]研究了2種藥用阿魏植物內(nèi)生細(xì)菌及促生屬性,發(fā)現(xiàn)新疆阿魏有24株具有固氮潛力。23株能夠產(chǎn)生吲哚乙酸(IAA);而準(zhǔn)噶爾阿魏中共20株菌具有固氮潛力。目前發(fā)現(xiàn)黃芪、白術(shù)、人參、白首烏等名貴中草藥內(nèi)生和根際環(huán)境,均具有內(nèi)生菌株的分布和定殖[5-8]。當(dāng)前開發(fā)利用藥用植物內(nèi)生促生菌資源已有較多報道[9-12],而用于生產(chǎn)實踐的菌株有限,因此,開發(fā)利用藥用植物的內(nèi)生有益菌株仍值得今后不斷的深入研究。為此,筆者以廣西百色少數(shù)民族地區(qū)藥用植物田七為研究對象,從中分離篩選出活性較高的內(nèi)生細(xì)菌,并對菌株進(jìn)行了促生長特性的研究,以期開發(fā)具有促生長特性的有益菌株,為今后的微生物菌肥開發(fā)和生物防治研究奠定基礎(chǔ)。

        1 材料與方法

        1.1 試驗材料 選擇廣西靖西當(dāng)?shù)亻L勢良好田七植株,以當(dāng)天采集的新鮮植株用于試驗。

        1.2 培養(yǎng)基類型 試驗所用培養(yǎng)基主要有:LB固體培養(yǎng)基、固氮培養(yǎng)基、解磷培養(yǎng)基、解鉀培養(yǎng)基、蛋白胨水培養(yǎng)基、葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基、嗜鐵素(CAS)培養(yǎng)基,主要用于菌株的分離培養(yǎng)和固氮、溶磷、解鉀、產(chǎn)IAA、產(chǎn)嗜鐵素和拮抗實驗。

        1.3 試驗方法

        1.3.1 植株表面消毒 先用自來水沖洗干凈植物材料表面,再用無菌水沖洗1遍,接著用75%乙醇浸泡5min,然后用無菌水沖洗1遍,2.5%次氯酸鈉浸泡5min,無菌水沖洗4~5次。用無菌濾紙吸取多余水分,取最后1次清洗的水取100μL涂布于LB平板,若無菌生長,則表明分離到的細(xì)菌均為內(nèi)生細(xì)菌。

        1.3.2 內(nèi)生細(xì)菌的分離篩選 將表面消毒的植物材料放在無菌研缽中搗碎,加入無菌水或生理鹽水充分研磨,吸取汁液梯度稀釋后涂布于LB固體培養(yǎng)基上,挑取單菌落劃線純培養(yǎng)。

        1.3.3 菌株促生長特性的測定 利用阿須貝無氮培養(yǎng)基(Ashby)篩選固氮菌;Pikovaskaia′s培養(yǎng)基(PKO)篩選解磷菌;無鉀培養(yǎng)基篩選解鉀菌;金氏培養(yǎng)基B(King)篩選分泌生長素IAA的菌株;鉻天青(CAS)培養(yǎng)基篩選分泌嗜鐵素的菌株。連續(xù)傳代培養(yǎng)5次以上仍能保持特性的菌株鑒定為陽性優(yōu)勢菌株。

        2 結(jié)果與分析

        在分離獲得田七內(nèi)生細(xì)菌的基礎(chǔ)上,利用Ashby培養(yǎng)基、PKO培養(yǎng)基、無鉀培養(yǎng)基、金氏培養(yǎng)基B、CAS培養(yǎng)基分析篩選和驗證具有促生長特性的菌株,連續(xù)傳代培養(yǎng)5次以上仍能保持特性的菌株鑒定為陽性優(yōu)勢菌株,具體篩選結(jié)果見表1。由表1可知,從田七莖和葉片中分離獲得9株內(nèi)生細(xì)菌,其中具有固氮能力的菌株6株為TQ1、TQ2、TQ5、TQ6、TQ7和TQ9;3株可以產(chǎn)生溶磷透明圈,分別是菌株TQ1、TQ2、TQ9;6株可以產(chǎn)生解鉀透明圈,分別是菌株TQ1、TQ4、TQ5、TQ6、TQ7、TQ9;7株具有產(chǎn)IAA能力,分別是TQ1、TQ2、TQ4、TQ5、TQ6、TQ8和TQ9;4株產(chǎn)嗜鐵素:TQ1、TQ2、TQ6和TQ9;2株能對芒果炭疽病菌產(chǎn)生拮抗作用,分別是TQ1和TQ3。其中,菌株TQ1和TQ9具備實驗中所測定的所有促生長特征(拮抗實驗除外),是今后值得進(jìn)一步研究和開發(fā)的優(yōu)勢菌株;其次是菌株TQ4和TQ6,具備至少3種以上促生長特性,也是潛在的值得開發(fā)的有益菌株。

        3 討論與結(jié)論

        前人研究表明,藥用植物體內(nèi)和根際分布有對植株有益的促生長菌株,從藥用植物體內(nèi)或根際分離得到的有益菌株至少具備1種以上的促生長能力。鞏文峰[13]等從1株色季拉山長鞭紅景天根際分離溶磷菌并進(jìn)行了低溫適應(yīng)性分析,發(fā)現(xiàn)分離的PSB19菌具有較好的固氮、溶磷和產(chǎn)IAA的特性。胡青等[14]在黃芪內(nèi)生菌分離與特性研究中,其分離出的菌株也具有固氮、溶磷、產(chǎn)IAA等能力。蘇坤[15]對牛大力內(nèi)生細(xì)菌的促生作用研究中獲得了能夠產(chǎn)IAA的菌株13株,具有產(chǎn)鐵載體菌株7株,具有溶磷性菌株17株。其中,RH17-1和RH1-4對羅漢果斑枯病病原菌和苦玄參褐斑病病原菌的抑菌作用顯著。

        本研究從田七莖葉中分離得到9株內(nèi)生菌株,其中,具備6種促生長能力的菌株1株,具備5種促生長能力的菌株1株,具備4種促生長能力的菌株2株,具備3種促生長能力的菌株1株,具備2種促生長能力的菌株2株。在這些促生長特性菌株中,值得關(guān)注的是菌株TQ1,其不僅具備所有的促生長能力,還對芒果炭疽病菌有很好的拮抗作用,是值得開發(fā)應(yīng)用的潛在有益菌株;其次是菌株TQ9,其具備所有的促生長特征,而是否具備對病原菌的拮抗作用還有待進(jìn)一步研究和證實,也是值得開發(fā)和應(yīng)用的潛在菌株。

        參考文獻(xiàn)

        [1]徐良,秦言省,楊海菊,等.廣西靖西縣田七種植業(yè)發(fā)展的現(xiàn)狀與展望[J].廣西農(nóng)業(yè)生物科學(xué),2007(01):72-73.

        [2]邊軍昌,馮永輝,楊靜,等.中藥內(nèi)生菌的研究進(jìn)展[J].光明中醫(yī),2010,25(01):164-165.

        [3]歐陽桂爐.太子參根際促生菌的促生效應(yīng)研究[D].貴陽:貴陽醫(yī)學(xué)院,2015.

        [4]劉永紅,郭建偉,張永光,等.2種藥用阿魏植物內(nèi)生細(xì)菌及促生屬性比較[J].微生物學(xué)雜志,2018,38(05):51-59.

        [5]陽湖榮,陳飄雪,戴傳超.白術(shù)內(nèi)生細(xì)菌分離與促生活性[J].生態(tài)學(xué)雜志,2019,38(12):3680-3688.

        [6]潘曉曦,關(guān)一鳴,李美佳,等.人參內(nèi)生細(xì)菌GS-1的分離鑒定及對灰霉病菌的拮抗作用[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2019,47(15):148-150.

        [7]翟李欣,徐慧超,李偉,等.東北膜莢黃芪內(nèi)生細(xì)菌的分離及其活性代謝物分析[J].中國食品學(xué)報,2019,19(03):299-305.

        [8]顧曉潔,解卓學(xué),呂嘉東,等.白首烏內(nèi)生細(xì)菌分離鑒定及系統(tǒng)發(fā)育樹分析[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2018,20(06):52-56.

        [9]夏靜.鴉膽子內(nèi)生菌的生物多樣性及其抑菌活性初探[D].廣州:廣州中醫(yī)藥大學(xué),2012.

        [10]鹿璐.重樓內(nèi)生菌多樣性及其應(yīng)用研究[J].生物化工,2019,5(02):120-123,130.

        [11]鮑永毅,陳曉,牛明福,等.茵陳內(nèi)生細(xì)菌的分離鑒定與抑菌活性成分分析[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2019,31(11):1919-1927.

        [12]劉霞,黨峰峰,賀曉龍,等.陜北野生甘草內(nèi)生菌的分離及抑菌活性篩選[J].西北植物學(xué)報,2010,30(10):2110-2115.

        [13]鞏文峰,邢瑜琪,卓瑪曲措,等.一株色季拉山長鞭紅景天根際溶磷菌的分離、鑒定及其低溫適應(yīng)性分析[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報,2018,49(02):280-286.

        [14]胡青,諸葛增玉,任超.中藥黃芪內(nèi)生菌的分離鑒定及方法分析[J].中國獸醫(yī)雜志,2016,52(02):59-60,52.

        [15]蘇坤.牛大力內(nèi)生細(xì)菌的分離鑒定及其促生作用研究[D].南寧:廣西大學(xué),2018.

        (責(zé)編:張宏民)

        人妻丰满熟妇无码区免费| 日韩女优中文字幕在线| 日本免费一区二区精品| 国产亚洲精品综合一区| 人妻丝袜av中文系列先锋影音 | 国产精品一区二区黑丝| 国产午夜精品一区二区| 色狠狠色狠狠综合一区 | 99久久久无码国产精品9| 欧美xxxxx精品| 日本加勒比精品一区二区视频| 国产日韩精品欧美一区喷水| 日本高清aⅴ毛片免费| 久久久久亚洲AV片无码乐播| 日韩一级137片内射视频播放 | 色悠久久久久综合欧美99| 国产激情一区二区三区成人免费| 综合成人亚洲网友偷自拍| 性猛交ⅹxxx富婆视频| 久久久久国产一区二区三区| 日韩中文字幕精品免费一区| 精品老熟女一区二区三区在线| 五月丁香六月综合缴清无码| 日产精品久久久久久久蜜臀| 色二av手机版在线| 风流熟女一区二区三区| 内射人妻视频国内| 久久伊人影院| 日韩色久悠悠婷婷综合| 少妇激情av一区二区三区| 国内自拍视频一区二区三区| 丰满的人妻hd高清日本| 青青草国产成人99久久| 91亚洲精品久久久蜜桃| 最好看的亚洲中文字幕| 无码人妻av一二区二区三区| 亚洲人妻无缓冲av不卡| 日本在线一区二区三区视频| 国产又猛又黄又爽| 亚欧AV无码乱码在线观看性色| 国产精品不卡在线视频|