劉宇軒，李家富，韋甜

（1.隨州市公安司法鑒定中心，湖北 隨州 441300；2.賽默飛世爾（中國）有限公司，上海 200000）

1 案 例

1.1 簡要案情

2010年10月9日凌晨，某鎮(zhèn)區(qū)加油站發(fā)生一起殺人案，老板汪某及妻子楊某被殘忍殺害于加油站臥室內(nèi)，室內(nèi)有翻動痕跡。經(jīng)現(xiàn)場勘驗提取到一名嫌疑人血跡，并檢出該嫌疑人常染色體DNA分型及YSTR分型數(shù)據(jù)。

1.2 破案經(jīng)過

案發(fā)后，當(dāng)?shù)鼐酵ㄟ^多種途徑偵查、比對，但一直未破獲。2016年下半年，該省公安廳啟動了全省命案積案攻堅工作，專案組運用Y-STR家系排查技術(shù)，采集了現(xiàn)場周邊4個鄉(xiāng)鎮(zhèn)在校男性學(xué)生血樣6000余份。經(jīng)Y-STR分型檢驗及比對，發(fā)現(xiàn)某鎮(zhèn)某村“李姓”家系26個Y-STR基因座分型與現(xiàn)場嫌疑人血跡的Y-STR分型差別僅有1～2個。專案組立即圍繞該村“李姓”家系開展了摸排工作。經(jīng)過詳細的家系調(diào)查和常染色體DNA比對，家系成員被一個個排除，排查陷入了困境。為了進一步判斷現(xiàn)場血跡與“李姓”家系的關(guān)系，運用YfilerTMPlatinum PCR擴增試劑盒（美國Thermo Fisher Scientific公司）再次檢驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)現(xiàn)場血跡與“李姓”家系成員在38個Y-STR基因座分型中，存在3～5個差異。依據(jù)該試劑盒提供的判別標準，即兩個對比樣本中，3個Y-InDel中有任意一個位點不同，可排除兩者是同一家系；3個Y-InDel相同，不排除是同一家系，需進一步依靠Y-STR分型差異數(shù)量進行排除；當(dāng)Y-STR不匹配數(shù)≤4時，判定兩者較大可能來自同一家系。我們認為不能排除作案人員是“李姓”或與“李姓”有某種親緣關(guān)系的可能性，據(jù)此制定了堅持“李姓”家系及同村李姓以外家系排查的偵查策略，發(fā)現(xiàn)同村“武姓”家系成員“武某華”的Y-STR分型與“李姓”家系成員“李某峰”及現(xiàn)場血跡的Y-STR分型高度相似（表1）。據(jù)此分析認為，嫌疑人極有可能是“武姓”家系中的一員，并與“李姓”存在某種關(guān)系。偵查人員立即對“武姓”家系展開了調(diào)查，經(jīng)常染色體STR檢驗，確定武某即是該案作案人，此案告破。

表1 YfilerTMPlatinum PCR試劑盒檢測結(jié)果Tab.1 Test results of YfilerTMPlatinum PCR kit

續(xù)表1Continued Tab.1

2 討 論

理論上，Y-STR分型只有排除意義，不可作為認定依據(jù)。尤其是當(dāng)比中家系與現(xiàn)場檢材Y-STR分型存在差別時，或完全比中某家系但排查許久沒有結(jié)果時，對比中家系的取舍將更難判斷。此類問題最常用的解決方法是增加Y-STR基因座，理論上，聯(lián)合使用的Y-STR基因座越多，群體中出現(xiàn)的單倍型種類就越多，鑒定能力就越大[1]。為達到足夠數(shù)量的Y-STR基因座，各地實驗室通常聯(lián)合應(yīng)用多個Y-STR試劑盒。但該策略會消耗更多的模板、花費更多的時間，也會使突變的可能性增大，導(dǎo)致家系判斷更為困難。此時亦可利用InDel[2]、SNP[3]等具有更低突變率的遺傳標記進行家系推斷。

本案中，我們應(yīng)用了YfilerTMPlatinum PCR試劑盒。該試劑盒采用六色熒光標記系統(tǒng)，共包含38個Y-STR基因座和3個中國特有的近零突變的Y-InDel位點[4]。38個Y-STR基因座同時擴增，減少了模板的消耗，也節(jié)省了檢案時間。另外，復(fù)合擴增體系中加入的Y-InDel位點，是該試劑盒的獨特之處。該體系中的3個Y-InDel相比Y-STR突變率更低，可以在后代中長久保留，不會丟失其突變特征。當(dāng)兩個對比樣本的3個Y-InDel中有任意一個位點不同，即可排除兩者是同一家系，提高了家系排除效力。

本案中，現(xiàn)場血跡與多名“李姓”家系成員在3個Y-InDel位點分型結(jié)果完全一致，Y-STR基因座中不匹配個數(shù)在3～5個，故“李姓”家系的可疑性不能排除。“李姓”家系中某些成員如“李某峰”和“武姓”家系中某些成員如“武某華”在3個Y-InDel位點分型相同，38個Y-STR基因座分型僅有1個不同，推測該村“李姓”“武姓”具有同源的可能性，如能進一步對兩家系進行Y-SNP及Y-InDel等低突變位點的檢驗，將有助于推斷兩家系的關(guān)系。

LIU等[5]認為：利用AmpF?STRTMYfilerTMPCR擴增試劑盒（美國AB公司）同一家系判別的標準為基因座不同數(shù)≤2且步長≤2；YfilerTMPlus PCR擴增試劑盒（美國Thermo Fisher Scientific公司）的判別標準為基因座不同數(shù)≤4且累計步長≤5。但隨著案件中使用的Y-STR基因座數(shù)增加，研究人員需要進一步研究如何合理地確定判別標準。YfilerTMPlatinum PCR擴增試劑盒提供的同一家系判別標準為3個Y-InDel位點分型相同的前提下，Y-STR基因座不同數(shù)≤4。此標準為該試劑盒給出的參考標準，但該判別標準效力，還需進一步研究。本案中也觀察到，該村“李姓”“武姓”部分成員僅一個位點不同，利用YfilerTMPlatinum PCR擴增試劑盒推斷可能為同一家系；采集的多名“李姓”成員與作案人“武某”Y-STR基因座分型不同數(shù)在3～5個，部分成員分型不同數(shù)大于4。提示我們在采集對比血樣時，應(yīng)同時采集多名家系成員，以免判斷錯誤。同時，當(dāng)出現(xiàn)對比家系位點不同數(shù)大于4時，也不能輕易排除，可以進一步挖掘該家系近親關(guān)系。