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        Omi/HtrA2與Livin對子癇前期及子癇患者胎盤凋亡的影響

        2020-04-06 03:11:40趙小環(huán)李紅芳許會英孫高高
        中國計劃生育學雜志 2020年9期
        關鍵詞:子癇線粒體胎盤

        趙小環(huán) 李紅芳 樊 虹 許會英 孫高高

        甘肅省蘭州市第一人民醫(yī)院(730050)

        子癇前期-子癇是妊娠期特有的疾病,發(fā)病機制仍不明確,胎盤部位細胞凋亡異??赡苁瞧湓蛑籟1]。絲氨酸蛋白酶Omi/HtrA2是線粒體促凋亡因子,在腫瘤中研究較多,在子癇前期-子癇中的凋亡作用尚無報道。Livin基因是凋亡抑制蛋白(IAPs)家族成員之一,其抑制凋亡的作用可能與受精卵著床、胎盤的生長發(fā)育有關。本研究檢測Omi/HtrA2與Livin在子癇前期-子癇患者胎盤組織中的表達,探討其在子癇前期及子癇發(fā)生發(fā)展中的作用。

        1 對象與方法

        1.1 選擇對象

        選擇2017-2018年本院婦產科住院的子癇前期20例、子癇前期重度32例、子癇8例共60例孕產婦(觀察組)。診斷標準依據相關診斷標準[2]。子癇前期重度中有2例發(fā)生胎盤早剝、3例伴有胸水及心包積液、1例發(fā)生LEELP綜合征。排除其它產科并發(fā)癥和合并癥的正常晚期妊娠20例為對照組。本研究通過本院倫理委員會審批。

        1.2 胎盤組織的采集及處理

        在兩組孕婦剖宮產或陰道分娩胎盤娩出5min內,避開梗死及鈣化區(qū),取胎盤母體面中央2cm×2cm×1cm組織10%中性甲醛溶液固定,石蠟包埋待用。采用免疫組織化學鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化酶連接法(SP法)檢測胎盤組織滋養(yǎng)細胞及間質細胞中的Omi/HtrA2與Livin的表達。鼠抗人Omi/HtrA2單克隆抗體、兔抗人Livin多克隆抗體及SP免疫組化試劑盒均購自武漢博士德生物技術開發(fā)公司。

        1.3 結果判定及分析

        每個標本隨機選取2張切片,光學顯微鏡下每張切片隨機觀察3個視野,陽性部位呈棕黃色。并將圖像輸入Image-Pro Plus圖像分析系統(tǒng),分別測得兩組胎盤組織中最小灰度值(OD值)。

        1.4 統(tǒng)計學處理

        2 結果

        2.1 一般情況

        子癇組與對照組年齡(27.9±6.2歲、27.2±4.0歲)、孕周(37.2±2.6周、39.2±1.2周)和產次(1.2±0.4次、1.7±0.6次)等比較無差異(P>0.05)。

        2.2 Omi/HtrA2、Livin在胎盤組織表達

        Omi/HtrA2在胎盤組織中表達呈棕色顆粒,陽性染色主要定位于胎盤滋養(yǎng)細胞及間質細胞的細胞質中,在各組胎盤組織中均有表達,但OD值觀察組(150.46±26.59)高于對照組(132.11±18.43)(t=2.049,P<0.05)(圖1、圖2、圖3)(封三),且子癇前期重度(161.17±19.45)高于子癇前期(136.79±26.57)(t=-3.833,P<0.01);Livin染色呈棕黃色至深棕色顆粒,陽性染色主要位于胎盤合體滋養(yǎng)細胞和間質細胞的細胞核中(圖4、圖5、圖6)(封三),觀察組OD值(116.07±22.40)低于對照組(136.73±20.81)(t=-2.216,P<0.05),但子癇前期(109.36±22.44)與子癇前期重度(122.17±28.12)比較無差異(t=-1.680,P>0.05)。

        2.3 不同子癇程度患者孕產情況比較

        子癇前期與子癇前期重度組間收縮壓、舒張壓、孕周、新生兒體重等均有差異,但產婦年齡、產后出血量及新生兒1 min Apgar評分無差異。 見表1。

        表1 子癇不同程度孕婦孕產情況比較

        3 討論

        目前認為凋亡信號傳導有細胞表面死亡受體途徑、線粒體啟動途徑和內質網途徑三條通路。越來越多研究顯示線粒體在介導細胞凋亡的過程中發(fā)揮了極為重要作用,位于線粒體內外膜間隙的凋亡相關分子的釋放是線粒體介導的凋亡過程中關鍵。

        Omi/HtrA2是定位于真核生物線粒體中的絲氨酸蛋白酶,是寡聚絲氨酸蛋白酶HtrA家族成員之一,在內質網合成后儲存在線粒體膜間隙。正常情況下對細胞有保護作用,當細胞受到刺激發(fā)生應激反應而線粒體膜通透性增加時,Omi/HtrA2分子從線粒體釋放并進入細胞質,解除了XIAP對caspase9的抑制,導致下游caspase3活化,進而DNA斷裂發(fā)生凋亡[3-8]。Omi/HtrA2除了caspase依賴性的凋亡通路外,還通過自身的酶切作用與IAPs 結合后直接剪切Livin、C-IAP1、C-IAP2和XIAP,消除IAPs抑制細胞凋亡的作用[9]。Omi/HtrA2是線粒體促凋亡因子,但在妊娠方面的研究報道很少。本研究發(fā)現,Omi/HtrA2主要在胎盤滋養(yǎng)細胞及間質細胞細胞質中表達,觀察組明顯高于對照組,且重度組更高。分析認為因缺血、缺氧等影響,Omi/HtrA2分子從線粒體釋放入細胞質,通過凋亡信號轉導通路引起大量滋養(yǎng)細胞凋亡,從而抑制滋養(yǎng)細胞侵襲能力,使滋養(yǎng)細胞浸潤過淺,胎盤淺著床;同時胎盤缺血缺氧引起血管內皮細胞損傷,胎盤功能發(fā)生障礙,尤其發(fā)展到子癇前期重度,血壓增高明顯,血管痙攣加重,并伴有其它器官受損及實驗室指標異常。因此,對子癇前期重度患者入院時應積極給予藥物降壓、鎮(zhèn)靜對癥治療。但由于胎盤滋養(yǎng)細胞凋亡,胎盤功能不良,胎兒長期慢性缺氧、生長受限,新生兒體重偏低。子癇前期與子癇前期重度比較,收縮血壓、舒張血壓、孕周、新生兒體重均有差異,對子癇前期重度孕婦應給予積極治療,以降低不良妊娠結局的發(fā)生[10]。

        Livin是IAPs家族中的一種凋亡蛋白,存在于胚胎、胎盤和一些惡性腫瘤組織中,Livin凋亡抑制作用可能與受精卵的著床、胎盤的生長發(fā)育等有關。Livin在凋亡過程中的作用是多方面的。在Fas/Caspase-8誘導的死亡受體途徑中,Livin直接抑制該途徑中的核心Caspases-3蛋白酶活性;而在另一條細胞色素c/凋亡激活因子-1(Apaf-1)作用的線粒體途徑中,Livin通過與凋亡相關蛋白(SMAC)結合而中和SMAC的Caspase活化蛋白的活性,使多種 Caspases未能活化而發(fā)揮抗凋亡作用[1]。Straszew ski-Charezl[11]等研究發(fā)現妊娠初期和晚期胎盤組織中有Livin表達,認為其作用機制是阻斷Fas介導的滋養(yǎng)細胞凋亡。郭秀香等[12]研究發(fā)現,ICP組胎盤組織中滋養(yǎng)細胞、蛻膜細胞及間質細胞Caspase-3表達增高,Livin表達降低且表達呈負相關性,推測Caspase -3和Livin基因可能是ICP胎盤細胞凋亡的重要調控基因之一。本研究發(fā)現,Livin在觀察組和對照組胎盤滋養(yǎng)細細胞、蛻膜細胞和間質細胞中均有表達,且觀察組低于對照組,但子癇前期重度與子癇前期未見差異,與王曉兵[1]研究基本一致。提示子癇前期及子癇患者胎盤組織中Livin蛋白低表達,推測Livin通過死亡受體途徑及線粒體途徑等不同信號轉導通路引起了胎盤大量滋養(yǎng)細胞的凋亡,從而引起胎盤功能不良,缺血缺氧,引起子癇前期臨床表現甚至子癇發(fā)生,故認為Livin在子癇前期-子癇的疾病發(fā)生發(fā)展中有一定作用。

        通過本研究認為,凋亡因子Omi/HtrA2、Livin參與了胎盤的凋亡,在子癇前期-子癇疾病的發(fā)生發(fā)展中有重要作用,但二者參與凋亡的方式是否有關還需進一步研究。

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