余德基 周鳳英 陳思穎

臨床血液培養(yǎng)的開展可為臨床醫(yī)師對(duì)敗血癥、菌血癥進(jìn)行有效判定,隨著各類抗菌藥物的不斷被研發(fā)問世,臨床上抗菌藥物、免疫抑制劑應(yīng)用率的提高,加之侵入性操作的增加,導(dǎo)致患者自身機(jī)體所具備的免疫力降低,感染率提高,發(fā)生敗血癥、菌血癥的患者數(shù)量明顯增加［1］。血流感染屬于嚴(yán)重的全身感染性疾病,其是指機(jī)體血液受到病原微生物入侵,從而導(dǎo)致血流感染的發(fā)生,包括細(xì)菌血癥、病毒血癥以及真菌血癥,具備較高的發(fā)病率及病死率［2］。有資料報(bào)道稱［3］,受到地區(qū)差異的影響,血培養(yǎng)病原菌分布具備較大差異,且病原菌的耐藥譜也不盡相同,因此通過分析監(jiān)測(cè)血培養(yǎng)病原菌的分布情況與耐藥情況,對(duì)治療方案的制定可提供有效參考。本研究回顧性分析江門市中心醫(yī)院2018 年1 月～2019 年6 月15352 例門診和住院患者血培養(yǎng)分離菌株資料,探討江門市中心醫(yī)院患者血流感染病原菌的分布及耐藥情況,為抗菌藥物的合理應(yīng)用提供參考?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集江門市中心醫(yī)院2018 年1 月～2019 年6 月門診和住院患者15352 份送檢血培養(yǎng)標(biāo)本資料,將同一病例中所分離的重復(fù)病原菌以及出現(xiàn)污染的微球菌、棒狀桿菌等進(jìn)行剔除。

1.2 方法 研究儀器和試劑包括法國梅里埃BacT/ALERT 3D 全自動(dòng)血培養(yǎng)儀,質(zhì)譜儀MS,Vitek 2 Compact,Atb expression 及其配套試劑,所需質(zhì)控菌株購自廣東省臨床檢驗(yàn)中心。M-H 瓊脂培養(yǎng)基購自廣州迪景,藥敏紙片購自英國 Oxoid 公司。按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》,對(duì)收治的患者在其接受抗生素治療之前的發(fā)熱初期以及寒戰(zhàn)高熱期靜脈血進(jìn)行采集,采集后按照醫(yī)囑分別將其注入至需氧瓶以及厭氧瓶內(nèi),在血培養(yǎng)儀內(nèi)對(duì)血培養(yǎng)瓶開展培養(yǎng),若需氧瓶出現(xiàn)陽性報(bào)警的情況,則將其分別向哥倫比亞血平板、中國藍(lán)平板、巧克力平板以及沙保羅瓊脂平板進(jìn)行接種；如果有厭氧瓶出現(xiàn)陽性報(bào)警,則將其接種于血瓊脂平板,再放入到厭氧袋內(nèi),并將厭氧袋放入到二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。全部平板的培養(yǎng)溫度均控制為35oC,培養(yǎng)時(shí)間為18～24 h,培養(yǎng)后對(duì)菌落實(shí)施分離,采用采用全自動(dòng)細(xì)菌鑒定分析儀實(shí)施細(xì)菌種類鑒定,并實(shí)施藥敏試驗(yàn)。如果血培養(yǎng)儀培養(yǎng)時(shí)間達(dá)到5 d,仍未出現(xiàn)陽性報(bào)警,則可采用血瓊脂平板實(shí)施盲種并涂片染色觀察,涂片未找到細(xì)菌且盲種完成后2 d 仍舊未發(fā)現(xiàn)有細(xì)菌生長,則可判定為陰性。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察血培養(yǎng)標(biāo)本菌株檢出情況,分析革蘭陰性菌、革蘭陽性菌常用抗菌藥物耐藥性。

2 結(jié)果

2.1 血培養(yǎng)標(biāo)本菌株檢出情況 15352 份送檢血培養(yǎng)標(biāo)本中陽性1096 份,其中男612 例,女484 例,年齡8～85 歲,平均年齡(56.3±8.2)歲。1096 份血培養(yǎng)陽性標(biāo)本中1031 份細(xì)菌感染標(biāo)本,65 份真菌感染標(biāo)本。細(xì)菌感染標(biāo)本中分離出526 株革蘭陽性菌,505 株革蘭陰性菌。病原菌類型以大腸埃希菌、凝固酶陰性葡萄球菌(表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌和頭狀葡萄球菌)、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌為主。見表1。

2.2 革蘭陰性菌常用抗菌藥物耐藥性 大腸埃希菌對(duì)哌拉西林、頭孢曲松、環(huán)丙沙星、左旋氧氟沙星、頭孢他啶具備較高的耐藥性,肺炎克雷伯菌對(duì)哌拉西林、頭孢曲松、頭孢他啶具備較高的耐藥性,銅綠假單胞菌對(duì)頭孢曲松、亞胺培南、美羅培南具備較高的耐藥性。見表2。

2.3 革蘭陽性菌常用抗菌藥物耐藥性 革蘭陽性菌對(duì)替考拉寧、利奈唑胺、萬古霉素敏感性可達(dá)100.00%；對(duì)青霉素G、苯唑西林、紅霉素、克林霉素的耐藥率＞35%。特別是對(duì)對(duì)青霉素G 的耐藥率＞95%,凝固酶陰性葡萄球菌、屎腸球菌對(duì)紅霉素的耐藥率＞70%。見表3。

表1 1096 份血培養(yǎng)陽性標(biāo)本主要病原菌構(gòu)成情況(株,%)

表2 革蘭陰性菌常用抗菌藥物的耐藥性分析(株,%)

表3 革蘭陽性菌常用抗菌藥物的耐藥性分析(株,%)

續(xù)表3

3 討論

血液培養(yǎng)是指將新鮮血液標(biāo)本開展離心分析后在營養(yǎng)培養(yǎng)基上進(jìn)行接種,放置于特定溫度和濕度條件下,檢測(cè)及鑒別對(duì)營養(yǎng)具備較高要求的細(xì)菌生長繁殖發(fā)育而來的病原菌,并依靠病原菌的藥敏試驗(yàn)來對(duì)病原菌的耐藥性進(jìn)行分析［4］。目前臨床上在對(duì)敗血癥、菌血癥和膿毒敗血癥等血液疾病進(jìn)行診斷時(shí),血液培養(yǎng)的應(yīng)用率較高,同時(shí)其可作為上述疾病治療效果的評(píng)價(jià)指標(biāo)［5］。本次研究結(jié)果顯示,送檢血培養(yǎng)標(biāo)本共15352 份,陽性1096 份,包括1031 份細(xì)菌感染以及65 份真菌感染標(biāo)本,細(xì)菌感染標(biāo)本分離出526 株革蘭陽性菌,505 株革蘭陰性菌；病原菌類型以大腸埃希菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌為主,與前人研究報(bào)道基本相符,相較于革蘭陽性菌,革蘭陰性菌的分離率更高,與前人報(bào)道有所差異,分析其原可能與病原菌分布及耐藥性存在地域差異有關(guān),也可能和本院血流感染患者大多在其他感染基礎(chǔ)上,接受過抗菌治療有關(guān),因此需要臨床醫(yī)師引起足夠重視,對(duì)抗菌藥物進(jìn)行合理應(yīng)用［6］。

本次研究對(duì)革蘭陰性菌中的肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌開展藥敏試驗(yàn),結(jié)果發(fā)現(xiàn)大腸埃希菌對(duì)哌拉西林、頭孢曲松、環(huán)丙沙星、左旋氧氟沙星、頭孢他啶具備較高的耐藥性,肺炎克雷伯菌對(duì)哌拉西林、頭孢曲松、頭孢他啶具備較高的耐藥性,銅綠假單胞菌對(duì)頭孢曲松、亞胺培南、美羅培南具備較高的耐藥性。大腸埃希菌對(duì)臨床三代頭孢曲松具有較高的耐藥性,分析其原因,可能受到臨床抗菌治療過程中大量采用廣譜β-內(nèi)酰胺酶有關(guān)［7］。相較于大腸埃希菌,肺炎克雷伯菌對(duì)大部分抗菌藥物所具備的耐藥情況更好,但其對(duì)頭孢曲松仍舊具備較高的耐藥率,因此臨床中需加強(qiáng)對(duì)頭孢曲松應(yīng)用的控制,避免過度應(yīng)用,從而使耐藥菌的流行以及傳播得到有效控制［8］。革蘭陽性菌對(duì)替考拉寧、利奈唑胺、萬古霉素敏感性可達(dá)100.00%；對(duì)青霉素G、苯唑西林、紅霉素、克林霉素的耐藥率＞35%。特別是對(duì)對(duì)青霉素G 的耐藥率＞95%,凝固酶陰性葡萄球菌、屎腸球菌對(duì)紅霉素的耐藥率＞70%?？赡芘c青霉素與紅霉素的過度應(yīng)用有關(guān)［9］。通過本次研究結(jié)果中耐藥菌分析可知,在對(duì)相應(yīng)病原菌開展治療時(shí),應(yīng)避免選擇上述抗生素種類,從而使抗菌治療效果得到提升［10］。

綜上所述,門診和住院患者患者血流細(xì)菌感染較為嚴(yán)重,且感染病原菌對(duì)常用抗菌藥物具備較強(qiáng)耐藥性,臨床醫(yī)師需參照藥敏試驗(yàn)結(jié)果來選擇敏感抗菌藥物進(jìn)行疾病治療。