周永勝，謝桃香，禹華芳

(婁底職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南 婁底 417000)

青錢柳(Cyclocarya.paliurus)是雙子葉植物綱原始花被亞綱胡桃目胡桃科青錢柳屬，為我國特有的單種屬珍稀樹種，是國家二級(jí)保護(hù)樹種，產(chǎn)于湖南、安徽、江蘇、浙江、江西、福建、臺(tái)灣、湖北、四川、貴州、廣西、廣東和云南東南部[1-2]。青錢柳具有重要的醫(yī)用價(jià)值，其樹葉、樹皮、樹根均可入藥，被譽(yù)為醫(yī)學(xué)界的第三棵樹。青錢柳是制茶的上品原料，青錢柳茶具有降血糖、降血脂、降膽固醇、降血尿酸、防治口臭等功效，亦具有適宜揉制加工，投資周期短、采摘產(chǎn)量高、采摘周期長等特性[3-5]。青錢柳種子育苗是青錢柳的主要繁育方式之一，但其種子具有深休眠特性，繁育難大、效率低，嚴(yán)重影響了青錢柳樹種的繁育速度[6-8]。國內(nèi)對(duì)青錢柳種子育苗進(jìn)行了多方面的研究，如吳運(yùn)輝等通過對(duì)青錢柳不同育苗方式、不同育苗密度、不同播種時(shí)間及芽苗培育措施的試驗(yàn)，總結(jié)出青錢柳育苗的最佳方式和關(guān)鍵技術(shù)措施[9-10]。楊萬霞和方升佐對(duì)青錢柳種子進(jìn)行綜合處理，并對(duì)其萌發(fā)過程中體內(nèi)各種激素的變化進(jìn)行分析，證實(shí)了赤霉素是種子萌發(fā)的促進(jìn)物質(zhì)，生長素、細(xì)胞分裂素在解除種子休眠過程中也起到一定的促進(jìn)作用[11]。尚旭嵐等發(fā)現(xiàn)綜合層積處理能有效破壞青錢柳種子堅(jiān)硬的種殼結(jié)構(gòu)，改善種皮透性，促進(jìn)果皮中抑制物質(zhì)的降解，從而加速種子休眠的解除[12]。畜禽糞便堆肥化是糞尿無害化處理的方法之一，而種子發(fā)芽實(shí)驗(yàn)是判定畜禽糞便堆肥是否腐熟的一種方法[13]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，已有許多植物種子被用于實(shí)驗(yàn)，如小麥、黃瓜、白菜、辣椒、川黨參等[14-16]，而關(guān)于采用畜禽糞便浸出液來處理青錢柳種子育苗的研究卻鮮有報(bào)道。本研究選取豬糞、牛糞、羊糞、雞糞等4種畜禽糞便，通過堆肥化后的浸出液來處理青錢柳種子，統(tǒng)計(jì)其發(fā)芽率、根數(shù)量、葉片數(shù)量并測量根長，以期為青錢柳種子育苗提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 青錢柳種子及預(yù)處理

青錢柳種子由婁底市神州生物能源有限公司位于婁底市婁星區(qū)萬寶鎮(zhèn)的青錢柳栽培基地提供，精選顆粒飽滿、重量均勻的種子，千粒重126.5 g，飽滿率34%。將青錢柳風(fēng)干種子用濃硫酸浸種浸泡進(jìn)行破殼處理，處理后擦去外果皮，用流水沖洗24 h，然后將各處理的的種子用赤霉素溶液浸種24 h，形成預(yù)處理后的青錢柳種子。

1.1.2 供試樣品

供試樣品為豬糞、牛糞、羊糞、雞糞等4種畜禽糞便堆肥，其堆肥方法采用高溫好氧堆肥，主要參數(shù)如下[17]:

表1 供試樣品的主要參數(shù)

1.2 方法

1.2.1 浸出液制備

供試樣品分別與蒸餾水按浸提比1∶20混合，于頻率可調(diào)的往復(fù)式水平振蕩機(jī)上振蕩1 h，振蕩頻率100 f·min-1，振幅40 mm，然后提取液在3 000 r·min-1下離心分離20 min，取上清液經(jīng)濾紙過濾得浸提液待用。采用同樣的方法制備浸提比為1∶30、1∶40、1∶50、1∶60的浸提液[15]。

1.2.2 種子處理

把上述預(yù)處理后的種子用清水洗凈，放入5個(gè)培養(yǎng)皿中，均勻放置于打濕的濾紙上，每個(gè)培養(yǎng)皿中放置10粒，每個(gè)培養(yǎng)皿中分別提取豬糞、牛糞、羊糞、雞糞堆肥浸提比為1:20的浸提液各10 ml放入培養(yǎng)皿中，以蒸餾水作對(duì)照，每個(gè)處理重復(fù)1次，其余浸提比的浸提液用相同方法處理。經(jīng)處理的種子用清水洗凈，均勻放置于打濕的濾紙上，移入恒溫箱中，光照培養(yǎng)7 d，統(tǒng)計(jì)其發(fā)芽率、根數(shù)量、葉片數(shù)量并測量根長。按下列公式計(jì)算種子的相對(duì)發(fā)芽率(Relative germination percentage，RGP)、相對(duì)根數(shù)(Relative roots，RR)、相對(duì)葉片數(shù)(Relative leaves，RL)和相對(duì)根長(Relative root elongation，RRE)[18]。

計(jì)算公式如下：

RGP(%)=處理中的平均發(fā)芽率/空白中的平均發(fā)芽率×100%

RR(%)=處理中的平均根數(shù)/空白中的平均根數(shù)×100%

RL(%)=處理中的平均葉片數(shù)/空白中的平均葉片數(shù)×100%

RRE(%)=處理中的平均根長/空白中的平均根長×100%

1.2.3 理化指標(biāo)測定

含水率采用105℃下烘干至恒重測定，pH值測定采用pH測定儀，有機(jī)碳采用磷酸浴外源加熱重鉻酸鉀氧化法測定，全氮采用凱氏蒸餾法。

1.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

應(yīng)用SPSS 18.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同畜禽糞便浸提液對(duì)青錢柳種子育苗的影響

不同畜禽糞便浸提液對(duì)青錢柳種子發(fā)芽有明顯的促進(jìn)或抑制作用，4種不同畜禽糞便浸提液處理青錢柳種子過程中，在1∶20和1∶30浸提比濃度處理下各畜禽糞便對(duì)青錢柳種子的相對(duì)發(fā)芽率有明顯的抑制作用，浸提比濃度越高，抑制作用越強(qiáng)。牛糞糞便浸提液對(duì)青錢柳種子相對(duì)發(fā)芽率均具有明顯的抑制作用。豬糞、羊糞、雞糞糞便浸提液在1∶40浸提比濃度處理下對(duì)青錢柳種子的相對(duì)發(fā)芽率、根數(shù)、葉片數(shù)有明顯的促進(jìn)作用，雞糞的促進(jìn)作用最明顯，且雞糞在1∶50和1∶60浸提比濃度下處理對(duì)相對(duì)發(fā)芽率也有一定的促進(jìn)作用，因此雞糞能顯著提高青錢柳種子的相對(duì)發(fā)芽率、根數(shù)、葉片數(shù)。

豬糞、羊糞、雞糞糞便浸提液1∶20浸提比濃度處理對(duì)青錢柳相對(duì)根長具有顯著的促進(jìn)作用，其余浸提比對(duì)青錢柳相對(duì)根長有一定的抑制作用，且隨著濃度的下降其抑制作用越顯著。牛糞糞便浸提液1∶40和1∶50浸提比濃度處理對(duì)青錢柳相對(duì)根長具有一定促進(jìn)作用，其余浸提比對(duì)青錢柳相對(duì)根長有一定的抑制作用，且濃度越高其抑制作用越強(qiáng)。

表2 不同畜禽糞便浸提液對(duì)青錢柳種子相對(duì)發(fā)芽率、根數(shù)、葉片數(shù)、根長的影響

續(xù)表2 不同畜禽糞便浸提液對(duì)青錢柳種子相對(duì)發(fā)芽率、根數(shù)、葉片數(shù)、根長的影響

注：表中數(shù)據(jù)為平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差，＊表示差異顯著，＊＊表示差異極顯著。

Note: Data in the table as mean ± standard deviation, * significant difference atp<0.05, ** significant difference atp<0.01.

2.2 不同畜禽糞便浸提液處理對(duì)種子相對(duì)發(fā)芽率的影響

多因素方差分析結(jié)果顯示，不同畜禽糞便浸提液對(duì)青錢柳種子相對(duì)發(fā)芽率的影響數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F= 2.996，p= 0.053>0.05)，不同畜禽糞便浸提液不同濃度處理影響青錢柳種子的發(fā)芽率(F= 28.2536，p= 0.00；F= 16.364，p= 0.00)。豬糞糞便浸提液不同濃度處理及羊糞、雞糞糞便浸提液1:20和1:30浸提比濃度處理均能夠顯著提高青錢柳種子相對(duì)發(fā)芽率(p<0.01)。牛糞糞便浸提液對(duì)青錢柳種子相對(duì)發(fā)芽率無影響。

2.3 不同處理對(duì)種子相對(duì)根數(shù)的影響

多因素方差分析結(jié)果顯示，不同畜禽糞便浸提液對(duì)青錢柳種子相對(duì)根數(shù)的影響數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F= 5.361，p= 0.068>0.05)，豬糞、雞糞糞便浸提液1∶20浸提比濃度處理對(duì)青錢柳種子相對(duì)根數(shù)差異性顯著(p<0.01)，其余均不顯著(p>0.01)。牛糞糞便浸提液不同濃度處理對(duì)青錢柳種子相對(duì)根數(shù)差異性均不顯著(p>0.01)。羊糞糞便浸提液1:60浸提比濃度處理對(duì)青錢柳種子相對(duì)根數(shù)差異性顯著，其余均不顯著(p>0.01)。

2.4 不同處理對(duì)種子相對(duì)葉片數(shù)的影響

多因素方差分析結(jié)果顯示，不同畜禽糞便浸提液對(duì)青錢柳種子相對(duì)葉片數(shù)的影響數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F= 4.546，p= 0.065>0.05)，豬糞、牛糞、雞糞糞便浸提液1∶20和1∶30浸提比濃度處理對(duì)青錢柳種子相對(duì)葉片數(shù)差異性顯著(p<0.01)，其余均不顯著(p>0.01)。羊糞糞便浸提液1:60浸提比濃度處理對(duì)青錢柳種子相對(duì)葉片數(shù)差異性顯著，其余均不顯著(p>0.01)。

2.5 不同處理對(duì)種子相對(duì)根長的影響

多因素方差分析結(jié)果顯示，不同畜禽糞便浸提液對(duì)青錢柳種子相對(duì)根長的影響數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F= 4.501，p= 0.014<0.05)，其中豬糞糞便浸提液1∶40浸提比濃度處理、牛糞糞便浸提液1∶50浸提比濃度處理、羊糞糞便浸提液1∶50浸提比濃度處理雞糞糞便浸提液1∶30浸提比濃度處理對(duì)青錢柳種子相對(duì)根長的促進(jìn)效果顯著(p<0.01)。

3 結(jié)論

豬糞、羊糞、雞糞糞便浸提液在1∶40浸提比濃度處理下對(duì)青錢柳種子的相對(duì)發(fā)芽率、根數(shù)、葉片數(shù)有明顯的促進(jìn)作用，雞糞的促進(jìn)作用最明顯，且雞糞在1∶50和1∶60浸提比濃度處理下對(duì)相對(duì)發(fā)芽率還有一定的促進(jìn)作用，因此雞糞糞便浸提液能顯著提高青錢柳種子的相對(duì)發(fā)芽率、根數(shù)、葉片數(shù)。而豬糞、羊糞、雞糞糞便浸提液1∶20浸提比濃度處理對(duì)青錢柳的相對(duì)根長具有顯著的促進(jìn)作用，其余浸提比則對(duì)青錢柳相對(duì)根長有一定的抑制作用，且隨著濃度的下降其抑制作用越顯著。用雞糞糞便浸提液在1∶40浸提比濃度處理下對(duì)青錢柳種子育苗是有積極作用的，這有利于研究者在今后對(duì)青錢柳種子育苗時(shí)提供參考，也為不同畜禽糞便生態(tài)化處理提供發(fā)展的方向。

4 討論

對(duì)青錢柳的育苗有大量的研究者通過種子育苗、徑段誘導(dǎo)、組織培養(yǎng)等手段進(jìn)行了廣泛深入的研究，其發(fā)芽率、生根率、移栽成活率等均不甚理想[7-10]，有研究者提出不同種源的青錢柳幼苗的生長、生理和生化特征也存在一定的差異性，以及不同的施肥處理對(duì)青錢柳苗期的生長也有影響[19-21]。常規(guī)的種子育苗是目前不可替代的主要育苗方式之一，如何提高青錢柳種子的發(fā)芽率和成活率是種子育苗的技術(shù)難點(diǎn)，青錢柳種子具有深度的休眠特性，而畜禽糞便堆肥浸出液對(duì)其有刺激，且不同畜禽糞便堆肥浸出液對(duì)其的敏感程度不同，同一畜禽糞便堆肥浸出液濃度不同對(duì)青錢柳種子育苗的影響有差異，在濃度一致的條件下不同畜禽糞便堆肥浸出液對(duì)青錢柳種子育苗的影響也存在一定的差異性。通過深入的研究發(fā)現(xiàn)，青錢柳種子育苗后相對(duì)根長越長其成長速度就越快，青錢柳種子育苗和種苗成長之間的關(guān)系也將成為今后研究的方向。