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        發(fā)現(xiàn)CRISPR/Cas9介導(dǎo)的單倍體誘導(dǎo)新方法(2020.3.1 Plant Biotechnology Journal)

        2020-03-23 05:55:45
        三農(nóng)資訊半月報 2020年5期
        關(guān)鍵詞:著絲粒單倍體變體

        農(nóng)作物品種需要具有所有性狀的純合系才能通過種子進行穩(wěn)定的繁殖。最經(jīng)典的方法是通過自交或回交7-8代產(chǎn)生純合系。然而加倍單倍體技術(shù)可以在單代內(nèi)產(chǎn)生完全純合的育種株系,單倍體可通過體外或體內(nèi)技術(shù)獲得,體外單倍體誘導(dǎo)方法包括花藥培養(yǎng)、小孢子胚胎發(fā)生等,但成本高,且勞動強度大。在體內(nèi)的技術(shù)包括種間雜交、花粉的強烈照射和孤雌生殖,但僅限于特定的作物品種。以種子為基礎(chǔ)的體內(nèi)單倍體誘導(dǎo)方法具有勞動強度低,成本相對較低的特點,然而,這種特殊的方法需要為每個感興趣的分離系創(chuàng)建一個新的轉(zhuǎn)基因親本。

        近十年來,著絲粒組蛋白CENH3已成為單倍體誘導(dǎo)的研究熱點。而且所有真核生物都表達多種H3變體,通過修飾著絲粒特異性組蛋白H3變體CENH3的來誘導(dǎo)單倍體已經(jīng)在擬南芥中被證明。

        2020年2月24日,Plant Biotechnology Journal 雜志在線發(fā)表了美國加州大學(xué)戴維斯分校研究團隊題為 "A variety of changes, including CRISPR/Cas9 mediated deletions, in CENH3 lead to haploid induction on outcrossing " 的研究論文。在該研究中,作者在擬南芥中鑒定了另外31個CENH3,它們在植物中都是高度保守,并有能力執(zhí)行CENH3參與的有絲分裂和減數(shù)分裂活動。EMS誘變系的氨基酸突變形式可以通過野生型授粉后互補內(nèi)源cenh3突變基因型并誘導(dǎo)單倍體后代的產(chǎn)生。同時研究者還測試了通過兩輪EMS誘變所產(chǎn)生的雙氨基酸位點突變的效果。最后研究者意外發(fā)現(xiàn)利用CRISPR/Cas9技術(shù)誘導(dǎo)保守的CENH3組蛋白折疊機構(gòu)域中αN螺旋的移碼突變,能夠獲得優(yōu)良的單倍體誘導(dǎo)系,并且在用野生型花粉授粉時生長和發(fā)育均表現(xiàn)正常。該研究結(jié)果展示出了EMS和CRISPR/Cas9突變CENH3基因并創(chuàng)造非轉(zhuǎn)基因單倍體誘導(dǎo)系的前景。這些發(fā)現(xiàn)為作物育種者培育單倍體誘導(dǎo)劑提供了更多的選擇。

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