莊建云，莊思琪，胡敏，陳若虹(中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院檢驗科,長沙410011)

血清鐵(serum iron, SI)及血清不飽和鐵結(jié)合力(unsaturated iron binding capacity，UIBC)、總鐵結(jié)合力(total iron binding capacity，TIBC)、轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度(transferrin saturation，TSAT)都是監(jiān)測鐵代謝狀態(tài)的常用指標(biāo)。聯(lián)合檢測SI、TIBC、UIBC和TSAT可以為臨床診斷鐵代謝異常提供依據(jù)[1-2]。行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[3]中僅包含了SI的參考區(qū)間，暫未發(fā)現(xiàn)有適合中國人群的UIBC和TIBC參考區(qū)間的相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)，而作為計算值的TAST的參考區(qū)間幾乎沒有報道。為了更好地指導(dǎo)臨床相關(guān)疾病的診斷和治療，本研究根據(jù)CLSI文件EP28-A3c的要求[4]，通過檢測長沙地區(qū)健康成年人SI及血清UIBC水平，并計算得到血清TIBC及TSAT水平， 建立本實驗室血清UIBC、TIBC、TSAT的參考區(qū)間。

1 對象與方法

1.1研究對象 2018年9月至2019年5月在中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院健康管理中心體檢的成年人。根據(jù)EP28-A3c 要求制定入選標(biāo)準(zhǔn)：無心腦血管疾病，無肝膽脾胰腎等重要器官功能障礙，近期無大量飲酒(>30 g/d)行為、手術(shù)、住院、輸血或用藥，所有體檢項目結(jié)果均正常。根據(jù)問卷調(diào)查表及體檢結(jié)果，最終得到符合標(biāo)準(zhǔn)的參考個體387例，年齡20～69歲。其中，男性167例，按年齡段分為5個組：20～29歲組30例，30～39歲組40例，40～49歲組30例，50～59歲組33例，60～69歲組34例；女性220例，按年齡段分為5個組：20～29歲組48例，30～39歲組69例，40～49歲組33例，50～59歲組34例，60～69歲組36例。

1.2主要儀器與試劑 7600型全自動生化分析儀(日本日立公司)，SI、UIBC測定試劑盒(紅菲繞啉直接法)及配套校準(zhǔn)品、質(zhì)控品(日本和光純藥株式會社)。

1.3標(biāo)本采集與檢測 研究對象采血前一天無飲酒、無劇烈運動，并保持清淡飲食，在靜息和空腹?fàn)顟B(tài)下采集靜脈血，采集后2 h內(nèi)離心(2 980×g，5 min)分離血清，-20 ℃保存。在7600型全自動生化分析儀上用兩點終點法檢測SI及UIBC水平。檢測前確保儀器性能正常，使用試劑盒配套的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)儀器(兩點法定標(biāo))并檢測配套的雙水平質(zhì)控品，質(zhì)控結(jié)果均在控后檢測SI及UIBC水平。根據(jù)SI及UIBC結(jié)果，用公式：TIBC=SI+UIBC，TSAT=SI/TIBC，計算TIBC、TSAT。冷凍樣品在檢測前室溫復(fù)溶并充分混勻。

2 結(jié)果

2.1正態(tài)性檢驗 采用Dixon法判斷離群值，UIBC、TIBC及TSAT的D/R值均小于1/3，見表1，故無離群值。根據(jù)UIBC、TIBC、TSAT檢測結(jié)果分別進(jìn)行Kolmogorov-Smirnov正態(tài)性檢驗，以P>0.05作為正態(tài)分布判斷標(biāo)準(zhǔn)，UIBC符合正態(tài)分布(P>0.05)，TIBC及TSAT不符合正態(tài)分布(P均<0.05)；繪制頻數(shù)分布直方圖，TIBC和TSAT均為近似正態(tài)分布趨勢。

表1 UIBC、TIBC、TSAT離群值檢驗

注：D1表示高值側(cè)D值；D2表示低值側(cè)D值。

2.2不同性別組各指標(biāo)的比較 見表2。用T檢驗分析男性組與女性組的結(jié)果差異是否有統(tǒng)計學(xué)意義，結(jié)果UIBC及TSAT在男女性別組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義，因此需分組建立參考區(qū)間；TIBC在男女性別組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，因此無需按照性別分組建立參考區(qū)間。

表2 不同性別組血清UIBC、TIBC和TSAT的比較

2.3不同年齡組TIBC的比較 TIBC無需按照性別分組，按年齡分為5組，采用單因素方差分析判斷血清TIBC是否需要根據(jù)年齡分組，結(jié)果顯示各年齡組之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=2.636，P=0.034)，各組結(jié)果見表3。為了發(fā)現(xiàn)5組中是否有相近的組合，同時由于各組樣本數(shù)不等，所以采用scheffe事后檢驗分析5組樣本，結(jié)果顯示5個年齡組之間兩兩比較，P均>0.05，且只有一個同類子集，故無需按照年齡分組建立TIBC的參考區(qū)間。

表3 不同年齡組血清TIBC比較

2.4不同年齡組UIBC和TSAT的比較 UIBC及TSAT均需按照性別分組，首先將男性按年齡分為5組，采用單因素方差分析判斷不同年齡組間是否有差異，結(jié)果顯示兩指標(biāo)在各年齡組之間的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(見表4)，因此無需按照年齡分組建立男性UIBC及TSAT的參考區(qū)間。

將女性按年齡分為5組，結(jié)果顯示TSAT在各年齡組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，而UIBC各年齡組之間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(見表4)。scheffe事后檢驗結(jié)果顯示UIBC 5個年齡組之間兩兩比較的P值均>0.05，且只有一個同類子集，故無需按照年齡分組建立女性UIBC及TSAT的參考區(qū)間。

表4 不同年齡組血清UIBC、TSAT的比較

2.5參考區(qū)間 TIBC無需按性別及年齡建立參考區(qū)間，UIBC和TAST需要按性別但無需按年齡建立參考區(qū)間，最終采用EP28-A3c建議的非參數(shù)法計算得到長沙地區(qū)健康成年人血清TIBC、UIBC及TSAT的95%參考區(qū)間，見表5。長沙地區(qū)健康成人TIBC、UIBC和TSAT的95%參考區(qū)間分別為：TIBC：45.2～73.4 μmol/L；UIBC：男性，16.0～54.4 μmol/L，女性，23.4～58.2 μmol/L；TSAT：男性，20.9%～67.1%，女性，16.6%～54.4%。

表5長沙地區(qū)20～69歲健康成人血清TIBC、UIBC及TSAT參考區(qū)間

項目性別P2.5(95%CI)MP97.5(95%CI)TIBC(μmol/L)—45.2(42.9～46.3)57.073.4(71.0～77.1)UIBC(μmol/L)男16.0(12.0～19.4)34.254.4(47.8～62.1)女23.4(20.7～24.8)36.558.2(52.8～62.7)TSAT(%)男20.9(15.4～22.80)39.767.1(62.3～75.8)女16.6(12.35～18.68)33.954.4(51.4～61.3)

3 討論

除了熟知的原發(fā)性和繼發(fā)性鐵代謝相關(guān)疾病外，研究表明，鐵代謝紊亂可能與多種疾病相關(guān)，如心血管疾病、腫瘤、2型糖尿病、腎臟疾病等[5-8]，監(jiān)測鐵代謝指標(biāo)在臨床診療中的作用越來越重要。建立參考區(qū)間可以更好地為相應(yīng)疾病的臨床診療提供指導(dǎo)，但參考區(qū)間受到檢驗方法、人種、地域、生活習(xí)慣、性別、年齡等因素的影響，建議每個臨床實驗室都應(yīng)建立符合當(dāng)?shù)厝巳禾卣鞯膮⒖紖^(qū)間[4]。

本研究統(tǒng)計分析了長沙地區(qū)387名20～69歲體檢健康成年人的血清TIBC、UIBC及TSAT水平，并初步建立了適合本地區(qū)成年人的血清TIBC、UIBC、TSAT的參考區(qū)間。試劑說明書提供的UIBC參考區(qū)間為34.2～48.1 μmol/L，來源于日本人群，與我國存在人種、地域、生活習(xí)慣及飲食結(jié)構(gòu)的差異。本研究參考區(qū)間更寬一些，并且按照性別分組，更適合于臨床。本研究建立的TIBC和UIBC的參考區(qū)間與文獻(xiàn)[9]存在一定的差異，特別是在性別分組方面，可能存在研究對象的地域差異，也有可能是因為這些參考區(qū)間均為上世紀(jì)末建立，隨著社會的發(fā)展，當(dāng)前的生活水平有了很大程度的提高，飲食結(jié)構(gòu)、生活方式發(fā)生改變導(dǎo)致這些指標(biāo)的水平發(fā)生了變化。同時文獻(xiàn)[9]中成人TSAT的參考值為男性約40%，女性約35%，參考區(qū)間較粗略，不適用于臨床，而我們建立的TSAT參考區(qū)間更精確，能更好地為臨床服務(wù)。

本研究結(jié)果顯示，TIBC在男性組和女性組中水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義，UIBC、TSAT在男性組和女性組中水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義，可能與男女性別之間血紅蛋白水平、肌肉水平、激素分泌水平及種類的不同有關(guān)，具體原因還需進(jìn)一步研究。

由于自愿接受健康調(diào)查并符合入選標(biāo)準(zhǔn)的人數(shù)不多，本研究雖符合EP28-A3c要求的最低樣本量要求，但仍然存在樣本數(shù)量偏少的問題。此參考區(qū)間初步建立后，我們將繼續(xù)擴(kuò)大樣本量進(jìn)行驗證，同時，本研究結(jié)果也有待得到本地區(qū)其他相關(guān)機(jī)構(gòu)的驗證。