郇穩(wěn) 史麗璞

干燥綜合征(SS)屬于自身免疫性疾病的一種，其發(fā)病機(jī)制尚不清楚[1-3]。SS患者靶器官唇腺中主要浸潤C(jī)D4+T淋巴細(xì)胞，研究表明Th17、Treg影響SS的臨床表達(dá)[4]。原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)早期，患者門靜脈區(qū)域伴有大量的T細(xì)胞浸潤。盡管PBC患者的抗心肌抗體呈陰性，但外周血單核細(xì)胞中存在一定量的、具備抗原特異性的CD4+T淋巴細(xì)胞，可產(chǎn)生干擾素-γ，影響PBC疾病過程[5-9]。研究顯示，PBC患者靜脈血中單核細(xì)胞Th17細(xì)胞比例增加，同時(shí)受損膽管周圍聚集有Th17細(xì)胞[10]。本研究分析SS合并PBC患者的臨床特征，探明Th17、Treg細(xì)胞對SS合并PBC患者的影響。

資料和方法

一、研究對象

選擇2012年3月至2018年2月鄭州人民醫(yī)院收治的SS合并PBC患者22例，男性7例，女性15例，平均年齡(54.1±9.6)歲。SS患者48例，男性10例，女性38例，平均年齡(56.7±10.2)歲。選取健康志愿者68名，排除標(biāo)準(zhǔn)包括已知原因引起的外部結(jié)節(jié)病、淋巴瘤、艾滋病、角膜干燥癥或腮腺炎等。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

二、研究方法

采集患者靜脈血，分離獲取單個核細(xì)胞(Ficoll密度梯度離心法)，采用酶聯(lián)免疫吸附法收集血漿。應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測外周血Th17和Treg細(xì)胞百分比；采用美國Beckman Coulter公司生產(chǎn)的AU5800型自動生化分析儀檢驗(yàn)ALT、AST、ALP、γ-GT和TBil等肝功能指標(biāo)。同時(shí)統(tǒng)計(jì)并記錄患者臨床表現(xiàn)。

三、統(tǒng)計(jì)方法

結(jié) 果

一、臨床表現(xiàn)

SS合并PBC患者出現(xiàn)黃疸、皮膚瘙癢、腹水、消化道出血、口干、食管靜脈曲張、發(fā)熱及眼部干澀等主要臨床表現(xiàn)為20例(90.9%)，SS患者出現(xiàn)上述癥狀者為37例(77.1%)，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。而體質(zhì)量減輕的患者SS組(46例，95.8%)明顯多于SS合并PBC組(17例，77.3%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.018)。

二、 肝功能指標(biāo)

3組患者ALT、AST、ALP、γ-GT和TBil比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

三、 Th17、Treg和Th17/Treg細(xì)胞百分比結(jié)果

SS合并PBC患者Th17細(xì)胞[16.6(10.1，22.5)%]高于SS組[9.4(7.0，13.0)%]及健康組[4.9(4.3，9.8)%]；SS合并PBC組Th17/Treg細(xì)胞比值[0.52(0.42，0.62)]高于SS組[0.25(0.14，0.37)]及健康組[0.22(0.13，0.26)，均P<0.05]。

表1 3組患者肝功能指標(biāo)比較(±s)

討 論

臨床中，SS合并PBC的情況并不少見。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SS組患者黃疸、皮膚瘙癢、腹水等主要臨床癥狀發(fā)生率明顯低于SS合并PBC組，兩組患者肝功能指標(biāo)也存在著顯著差異。在穩(wěn)態(tài)或非炎癥狀態(tài)下，人體的Th17和Treg細(xì)胞保持平衡[11]。由于大多數(shù)SS合并PBC患者的膽管和腺體都伴有CD4+T淋巴細(xì)胞浸潤，使得肝臟和其他外分泌腺具有共同的抗原性。在本研究中，SS合并PBC組外周血Th17/Treg明顯高于SS組及健康組，這些結(jié)果表明了促炎細(xì)胞的相對增加與SS、PBC的病理基礎(chǔ)有關(guān)。

Th17細(xì)胞可在免疫表達(dá)過程中分泌促炎因子白介素-17，誘導(dǎo)基質(zhì)金屬蛋白酶，并調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞，進(jìn)一步損傷肝功能[12]。同時(shí)，Treg可通過釋放抑制性細(xì)胞因子白介素-10和TGF-β發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，抑制炎癥引起的免疫反應(yīng)[13]。受到TGF-β的影響，初始T淋巴細(xì)胞可以誘導(dǎo)形成Treg，在TGT-β和IL-6共同影響下，促使初始T淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)形成Th17細(xì)胞[14]。而在特定細(xì)胞因子環(huán)境下Th17和Treg細(xì)胞能夠相互轉(zhuǎn)化[15]。盡管SS與PBC的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，本研究結(jié)果顯示SS合并PBC患者Th17細(xì)胞比例的增加，而Treg細(xì)胞相較于SS患者及健康人群并無明顯差異，這些結(jié)果說明了SS合并PBC患者中Th17細(xì)胞功能狀態(tài)占主導(dǎo)地位，由其引起Th17/Treg比例的失衡，Th17細(xì)胞分泌的白介素-17將進(jìn)一步加速炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致肝功能指標(biāo)升高，使這些患者的臨床癥狀表現(xiàn)得更加突出。

本研究發(fā)現(xiàn)，外周血Th17細(xì)胞比例升高可作為SS合并PBC診斷和疾病嚴(yán)重程度的指標(biāo)，甚至作為潛在的治療靶點(diǎn)。SS合并PBC患者外周血Th17/Treg細(xì)胞水平及其比值明顯失衡，提示Th17細(xì)胞在很大程度上參與了致病過程。此外，Th17/Treg比值與某些肝功能指標(biāo)有一定的相關(guān)性，在今后的研究中可根據(jù)病情的嚴(yán)重程度進(jìn)一步分層分析。