耿帥峰,褚夫江,徐天生
(1.廣州康云生物科技有限公司,廣東廣州 510700;2.廣東藥科大學(xué),廣東廣州 510006)
漱口水多數(shù)是大瓶裝液體,對出差旅行的消費者而言,攜帶非常不方便。固體泡騰片漱口水與液體漱口水相比,有著突出的優(yōu)勢,如服用方便、體積小、便于運輸以及藥效保存好等[1]。一般漱口水口腔護理產(chǎn)品含有的抑菌成分多以中草藥和化學(xué)類抑菌劑為主,經(jīng)常使用這類產(chǎn)品,容易造成口腔細菌生態(tài)失調(diào),或使細菌產(chǎn)生抗藥性,不僅不能達到預(yù)防口腔疾病的效果,反而易引發(fā)其他多種口腔疾病。
本研究所研發(fā)的漱口水泡騰片中功效成分為溶菌酶,具有抗細菌、真菌及腫瘤等多種藥理作用,生物相容性好,對組織無刺激性、無毒性,已被制作為一種性質(zhì)優(yōu)良、殺傷病原微生物而不破壞機體的酶制劑[2]。作為機體非特異免疫因子之一,溶菌酶參與口腔環(huán)境平衡調(diào)節(jié)過程,與齲病、口腔黏膜病及牙周病的發(fā)生、發(fā)展有一定關(guān)系[3]。有研究顯示,向口腔保健產(chǎn)品中添加溶菌酶等抗菌劑比添加人工合成的抗菌劑對預(yù)防齲齒更有效[4]。同時,溶菌酶等小分子物質(zhì)處于口腔疾病防御的第一線,參與宿主對細菌的非免疫防御[5]。本研究漱口水可隨時攜帶、隨時使用,將增大消費者使用漱口水的習(xí)慣,更好地呵護牙齒。
材料:溶菌酶(98.0%,市售),氯化鍶(99.0%,廣州納英化工有限公司),硝酸鉀(99.0%,西安拉維亞生物科技有限公司),碳酸氫鈉(99.0%,山東谷碩生物科技有限公司),檸檬酸(98%,江蘇科倫多食品配料有限公司),麥芽糖精(98%,市售),甜菊糖苷(98%,市售),PEG6000(65%,市售),羥乙基纖維素(98%,市售),薄荷香精粉(市售)。
試劑:乙醇(35.0%,市售),溶菌酶標準品(市售試劑盒中含有)。
含溶菌酶的漱口水泡騰片是由泡騰劑、填充劑、甜味劑、粘結(jié)劑、芳香劑和功效成分組成,具體成分及比例如表1所示。
表1 含溶菌酶漱口水泡騰片的成分組成
將原料除溶菌酶外分別進行研磨,過160~180目篩,備用。將碳酸氫鈉、50%羥乙基纖維素、30%聚乙二醇加入適量乙醇溶液中,制粒,烘干后粉碎成粉末,過160~180目篩,制得粉末A。將溶菌酶、麥芽糖精、薄荷香精粉、甜菊糖苷、聚乙二醇各40%均勻混合,加入適量乙醇溶液中,制粒,烘干后粉碎成粉末,過160~80目篩,制得粉末B。將檸檬酸、羥乙基纖維素各50%、聚乙二醇30%加入適量乙醇溶液,制粒,烘干粉碎成粉末,過160~180目篩,制得粉末C。將上述粉末A、B、C混合均勻后進行壓片,即得。
各取數(shù)片上述制備的泡騰片稱重,分別加入100 mL常溫水中,制備漱口水護理液。
泡騰片崩解時間可以參考中國藥典對維生素C泡騰片崩解時間的要求;泡騰片漱口水護理液的基本參數(shù)應(yīng)符合GB/T2945-2012《口腔護理液》。對本研究制備的泡騰片和泡騰片漱口水護理液進行檢測,結(jié)果如表2和表3所示。檢測結(jié)果表明所制備的泡騰片符合要求。
表2 泡騰片檢測結(jié)果
本研究采用隨機、平行對照、雙盲的臨床研究方法,篩選74例符合納入標準、不屬排除標準的受試者。納入標準:(1)同意參加本臨床試驗并簽署書面知情同意書者;(2)年齡在18~65周歲(含18周歲和65周歲),性別不限,對市售口腔產(chǎn)品或化妝品無過敏史;(3)視診或探診發(fā)生牙本質(zhì)敏感的部位為頰面牙頸部,病人主觀牙本質(zhì)敏感癥狀VAS值在1~9;空氣刺激時,至少有 2顆牙 VAS值在3~8;(4)參加研究前一個月沒有使用下列藥物:抗驚厥藥、抗組織胺藥、抗憂郁藥物、鎮(zhèn)靜劑、安定劑,一周內(nèi)未服用過消炎藥、日常止痛藥;(5)沒有使用其它抗牙本質(zhì)敏感牙膏和漱口水;(6)沒有同時參加其他類似試驗研究。排除標準:(1)已知或懷疑對試驗藥及其輔料有過敏史或嚴重不良反應(yīng),或過敏體質(zhì)者;(2)受試者有嚴重的口腔疾病、慢性??;(3)牙周病進展期或者過去一年內(nèi)接受過牙周治療(包括牙周手術(shù));(4)敏感牙齒的松動度大于1;(5)牙齒有大面積充填體或冠,疑有牙髓炎、齲齒、釉質(zhì)隱裂,可摘局部義齒的基牙;(6)妊娠或準備妊娠婦女,哺乳期婦女。
表3 泡騰片漱口水護理液檢測結(jié)果
本試驗采用隨機雙盲平行對照設(shè)計方法,受試者在基線、使用4周、使用8周回訪進行口腔情況評估。
3.2.1 試驗分組
篩選74例符合要求的受試者,試驗組和對照組各37例。
具體而言,對于每個數(shù)據(jù)包,先依據(jù)空洞區(qū)域定義“雷區(qū)”FAR(Forbidden Area),進而使得數(shù)據(jù)包能避開FAR,進而抑制空洞路由。而FAR的尺寸和位置隨數(shù)據(jù)包時延要求不同而變化,從而平衡網(wǎng)絡(luò)流量。為了保證數(shù)據(jù)包能及時到達目的節(jié)點,DG-SHGR路由利用端到端時延要求調(diào)整FAR尺寸。實驗數(shù)據(jù)表明,提出的DG-SHGR路由有效地提高了數(shù)據(jù)包傳遞率,并平衡網(wǎng)絡(luò)負載。
3.2.2 盲法
采用同樣白色塑料瓶進行成裝。兩組泡騰片在外觀上一致,用不同的編號區(qū)分。泡騰片編號由Microsoft Excel軟件“=Rand()”函數(shù)方法得到的隨機數(shù)字產(chǎn)生。
3.2.3 泡騰片
試驗組泡騰片為含溶菌酶的抗敏漱口水泡騰片;對照組為不含生物溶菌酶及抗敏成分的普通漱口水泡騰片。
3.2.4 使用方法
實驗期間要求受試者只用提供的漱口水泡騰片,實驗組以自行制備含溶菌酶抗敏泡騰片,對照組以市面購買普通泡騰片,且實驗組和對照組的每片泡騰片質(zhì)量相同。給受試者分發(fā)2種泡騰片中的一種;使用時,受試者將泡騰片放置于50 mL水中,待泡騰片完全崩解,含漱 30 s,每天 2次,每次 20 mL。受試者均統(tǒng)一分發(fā)給同樣的普通牙膏和成人軟毛牙刷,要求受試者使用統(tǒng)一發(fā)放的牙膏和牙刷,每天刷牙2次(早晚各1次),每次刷牙1 min[6]。臨床檢查于基線、第4周及第8周進行,并由同一名檢查者完成。
3.3.1 評價指標
使用牙科綜合治療臺的氣槍在離敏感牙齒1 cm距離噴吹 1 s,空壓機壓力為 60 kPa,吹氣溫度為19~21 ℃,吹氣時將手指放在鄰牙以避免鄰牙癥狀影響結(jié)果的準確性。每顆牙每次檢查時只接受一次空氣刺激檢查。采用數(shù)字化疼痛評判法(Visual analogue scale,VAS)評分,受試者對疼痛的主觀評價記錄在一條10 cm長的直線上,線的起始端為0表示“無疼痛或沒有不舒適”,線的末端為10表示“極度疼痛或不適”,當(dāng)空氣檢測結(jié)束后,受試者根據(jù)VAS尺對疼痛值劃線,代表測試牙本質(zhì)過敏疼痛程度。整個研究都采用同樣的評判方案測試牙本質(zhì)過敏狀況。基線時對受試者的全口牙進行檢查,篩選出疼痛值3~8的牙。
3.3.2 統(tǒng)計方法
采用SPSS統(tǒng)計軟件統(tǒng)計分析。所有統(tǒng)計推斷均采用雙側(cè)檢驗,具有統(tǒng)計學(xué)意義的檢驗水準定為0.05,參數(shù)的置信區(qū)間估計采用95%置信區(qū)間。
74例受試者參與試驗,其中3人失訪,2人不符合納入排除標準,中途退出試驗。受試者中途退出試驗的原因與本研究無關(guān)。完成試驗的69例受試者中有2例與方案偏離,這2例參與人口學(xué)資料分析、安全性分析,不參與療效指標分析,其中試驗組1例,對照組1例。
3.4.1 兩組基線比較
74例受試者,5例中途退出,69例完成試驗,其中試驗組35例,對照組34例。所有參與的受試者均未發(fā)現(xiàn)由使用漱口水泡騰片引起不良反應(yīng)或嚴重事件。研究人群基本信息如表3,基線期療效指標如表4。
表3 研究人群的基線檢查情況(n=72)
表4 試驗組和對照組療效指標基線期分布情況(n=37)
基線期試驗組與對照組相比較,牙齒敏感疼痛VAS值不具有顯著性差異(P>0.05)。
3.4.2 依從性
74例受試者參與試驗,有5例中途退出試驗,其中試驗組2例,對照組3例;有2例未按要求使用泡騰片,其中對照組1例,試驗組1例。對照組依從性為97.14%。,試驗組依從性為97.06%。
3.4.3 臨床安全性分析
所有受試者試驗過程中未出現(xiàn)由該產(chǎn)品使用引起的不良反應(yīng)或不良事件。
3.4.4 臨床(VAS值)結(jié)果
臨床(VAS值)結(jié)果如表5所示,試驗組牙齒VAS值明顯低于對照組;4周及8周后試驗組相對于對照組VAS值分別減少了25.61%和62.27%,且具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。
含溶菌酶的漱口水泡騰片,外觀光潔,崩解較快,理化指標穩(wěn)定,衛(wèi)生指標符合要求。臨床試驗顯示:基線檢查中,試驗組和對照組間無統(tǒng)計學(xué)差異;試驗組牙齒VAS值明顯低于對照組;4周及8周后試驗組相對于對照組VAS值分別減少了25.61%和62.27%,且具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。因此,與對照組泡騰片相比,實驗組含溶菌酶的漱口水泡騰片具有降低牙本質(zhì)敏感疼痛值,緩解或減輕牙本質(zhì)敏感癥狀的臨床功效。該泡騰片功效成分活性較高,不含酒精,可隨時攜帶,隨時使用,值得推廣使用。
表5 基線、4周、8周牙齒VAS值均數(shù)比較