賈良梁

摘? 要：本文討論了多種為提高家禽健康和生產(chǎn)性能對正在孵化的種蛋注射各種不同物質(zhì)的禽胚注射法或胚蛋注射法，也稱卵內(nèi)注射法。家禽胚胎（又稱禽胚或胚蛋）的羊膜已被證實(shí)是注射的有效部位，卵內(nèi)注射通常在孵化的種蛋落盤時(shí)進(jìn)行。注射物質(zhì)所需的體積和劑量或濃度取決于家禽的種類、胚蛋的大小、注射的時(shí)機(jī)和部位、孵化系統(tǒng)、注射方式以及物質(zhì)的類型。業(yè)已證明，人工注射或機(jī)械注射均能產(chǎn)生良好的效果。然而，商業(yè)應(yīng)用要求注射方式實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。本文所述的注射物質(zhì)包括過去20年或更長時(shí)間內(nèi)用于禽胚的疫苗、藥物、激素、競爭性排斥培養(yǎng)物（competitiv exclusion cultures）、益生元和營養(yǎng)補(bǔ)充劑。被批準(zhǔn)用于胚蛋接種的疫苗包括馬立克氏病疫苗、傳染性法氏囊病疫苗、禽痘苗、新城疫疫苗和球蟲病疫苗，其中一些材料已被證明可作為提高家禽免疫力以及促進(jìn)胚胎發(fā)育和雛雞出雛后生長的有效備選材料。多篇論文指出，益生菌可有效預(yù)防家禽腸道感染細(xì)菌，而葉酸、卵清蛋白和多種氨基酸（包括L-精氨酸、L-賴氨酸、L-組氨酸、β-羥基-β-甲基丁酸和蘇氨酸）的單獨(dú)使用或聯(lián)合使用已被證明能夠有效促進(jìn)家禽的胚胎發(fā)育或出殼后的生產(chǎn)性能。此外，胞嘧啶鳥嘌呤（Cytosine-phosphate-Guanine，CpG）寡聚脫氧核苷酸、維生素C、維生素E以及百里香和香芹也具有增強(qiáng)家禽免疫力的潛力，碳水化合物可用于提高家禽組織的糖原儲備量，肌酸可以用于促進(jìn)家禽肌肉的生長。微量元素和維生素D3可提高家禽的骨強(qiáng)度，而氯化鉀可作為疫苗稀釋液中的一種有效替代性電解質(zhì)。這些物質(zhì)和其他材料在胚蛋上的應(yīng)用將會得到推廣，并會給養(yǎng)禽業(yè)帶來更多裨益。

關(guān)鍵詞：胚蛋注射;疫苗;家禽

中圖分類號：S815 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：C 文章編號：1001-0769（2020）01-0001-02

大約26年前，入孵種蛋注射技術(shù)（有時(shí)稱“卵內(nèi)注射技術(shù)”、“胚蛋注射技術(shù)”或“胚蛋供養(yǎng)技術(shù)”）就開始用于肉雞孵化場雛雞的免疫接種。在此之前，馬立克氏?。∕arek's Disease，MD）疫苗一般采用人工方法對出雛后的肉雛雞進(jìn)行頸后部皮下接種。Embrex公司制造的Inovoject?注射機(jī)是首個(gè)引入美國的自動(dòng)化胚蛋注射系統(tǒng)（圖1）。目前，超過90%的美國孵化場采用四家不同公司制造的胚蛋注射機(jī)。這些機(jī)器具有每小時(shí)接種25 000～62 000個(gè)胚蛋的能力。Williams和Zedek發(fā)表了一篇報(bào)道，在考慮種雞日齡和落盤胚齡的情況下，他們比較了兩家美國制造商生產(chǎn)的不同胚蛋注射系統(tǒng)對種蛋孵化率和孵化場廢棄物分析結(jié)果的影響。胚蛋注射的優(yōu)勢包括：能夠更快地免疫接種更多的胚蛋，可降低人工成本以及人為失誤，能提前誘導(dǎo)雛雞產(chǎn)生免疫應(yīng)答。胚蛋注射通常在入孵種蛋從孵化器轉(zhuǎn)移到出雛器的限定時(shí)間內(nèi)快速進(jìn)行，一般在孵化第17.5天和第19.2天實(shí)行，具體時(shí)間取決于所使用的孵化系統(tǒng)。

業(yè)已證明，采用胚蛋注射法對入孵種蛋后期胚胎接種疫苗是安全的，對孵化率的影響極小。然而，眾多因素均可影響胚蛋注射的效率，這些因素包括接種部位、注射時(shí)胚胎所處的發(fā)育階段以及孵化設(shè)施、胚蛋接種設(shè)備和疫苗制劑的無菌控制水平。Wakenell等證明，當(dāng)MD疫苗被注射到入孵種蛋的氣室或尿囊膜時(shí)，疫苗不會產(chǎn)生有效的免疫作用;然而，當(dāng)其被注射到入孵種蛋的胚胎或羊膜中時(shí)，疫苗會產(chǎn)生有效的免疫力。胚蛋的羊膜已被證明是疫苗的最佳注射部位，因?yàn)樗茏屌咛ノ牖蛭找呙?，從而使系統(tǒng)轉(zhuǎn)化更完全。當(dāng)采用Nature Form和Jamesway孵化系統(tǒng)時(shí)，入孵種蛋的羊膜可在孵化的第18.5天有效刺入，相當(dāng)于胚胎發(fā)育階段評分為2或3時(shí)，此時(shí)處于胚胎啄殼之前，且胚胎的頭正處在兩腿中間。為了對準(zhǔn)胚蛋的羊膜，Keralapurath等和Zhai等建議從肉用雞種蛋大頭頂端注入約2.49 cm。此外，用于胚蛋注射的溶液的體積很重要。McGruder等建議避免使用體積等于或大于2 000 μL的各種電解質(zhì)溶液。Zhai等主張，為了使種蛋孵化率達(dá)到90%，碳水化合物注射液的體積不應(yīng)超過700 μL。MD商業(yè)化疫苗的常用體積是50 μL。

被批準(zhǔn)可用于胚蛋接種的疫苗包括馬立克氏病疫苗、傳染性法氏囊病疫苗、禽痘苗、新城疫疫苗和球蟲病疫苗。雖然胚蛋注射法尚未得到商業(yè)化應(yīng)用，但是在過去的20年中，不同的實(shí)驗(yàn)室對其他疫苗、藥物、激素、競爭性排斥培養(yǎng)物以及多種營養(yǎng)補(bǔ)充劑在提高雛雞免疫力和促進(jìn)其生長方面的應(yīng)用進(jìn)行了不斷地研究，這些研究的結(jié)果已經(jīng)發(fā)表于多種出版物上。為了調(diào)查這些疫苗、培養(yǎng)物和營養(yǎng)補(bǔ)充劑的潛在效力和商業(yè)化應(yīng)用前景，相關(guān)研究人員引入了人工接種（人工注射）和自動(dòng)接種（商用單蛋或多蛋注射）。除了已商業(yè)化應(yīng)用的疫苗外，其他試驗(yàn)性測試疫苗包括禽流感疫苗和雞敗血支原體病疫苗。

眾多營養(yǎng)素（如卵清蛋白、氨基酸、縮氨酸、碳水化合物、核苷酸、電解質(zhì)、維生素、L-肉毒素、肌酸和植物提取物）可通過胚蛋注射法注射促進(jìn)入孵種蛋的胚胎發(fā)育，提高種蛋孵化率和雛雞出殼后的生產(chǎn)性能。Pinchasov和Noy以及Vieira和Moran指出，在生產(chǎn)中，人們常會在原種雞場和肉雞場見到雛雞由于推遲入舍而無法及時(shí)采食和飲水，這可能會對雛雞隨后的生產(chǎn)性能產(chǎn)生不利影響。胚蛋供養(yǎng)已經(jīng)受到養(yǎng)禽業(yè)的關(guān)注。Uni和Ferket指出，在出殼后的關(guān)鍵時(shí)期（此時(shí)它們必須適應(yīng)新的環(huán)境和營養(yǎng)源），出殼雛雞的死亡率可以通過在胚胎發(fā)育后期注射胚蛋營養(yǎng)素來降低。然而，這些營養(yǎng)素的使用均待商業(yè)化養(yǎng)禽業(yè)的認(rèn)可和推廣應(yīng)用。

本綜述的目的是簡要回顧家禽胚蛋注射技術(shù)的起源和發(fā)展，并評估其在疾病預(yù)防和營養(yǎng)補(bǔ)充方面的各種應(yīng)用以及后續(xù)文獻(xiàn)報(bào)道的相關(guān)結(jié)果。

原題名：In ovo applications in poultry： a review（英文）

原作者：E. D. Peebles（密西西比州立大學(xué)）