趙海燕，吉訓聰，陳海燕，韋德衛(wèi)，林珠鳳，劉吉敏

（1.海南省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部?？谧魑镉泻ι锟茖W觀測實驗站/海南省植物病蟲害防控重點實驗室，海南 海口 571100；2.廣西農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所/廣西作物病蟲害生物學重點實驗室，廣西 南寧 530007）

【研究意義】桔小實蠅的寄生蜂種類據(jù)不完全統(tǒng)計約有70余種，前裂長管繭蜂Diachasmimorpha longicaudata（Ashmead） 是 至今用于控制壓低桔小實蠅種群數(shù)量應(yīng)用最廣泛和最成功的一種。自20世紀30年代以來，該蜂被許多國家和地區(qū)陸續(xù)交互引進。但是在釋放的過程中還存在許多問題，如寄生蜂擴散不理想、短期定殖率不高及田間寄生率較低等突出問題，其中對寄主的適應(yīng)性是影響寄生蜂成功寄生的重要因素，本試驗從抗性寄主對寄生蜂寄生行為的影響角度進行研究?！厩叭搜芯窟M展】1947—1952年夏威夷從菲律賓、馬來西亞和印度等地引進32種實蠅天敵昆蟲[1]，通過人為增殖釋放可以將桔小實蠅種群數(shù)量降低95%左右，到1968年，前裂長管繭蜂D.longicaudatus與另外兩種寄生蜂Fopis arisanus、F.vandenboschi在夏威夷定殖下來并維持一定的種群數(shù)量[2]。1961年阿根廷于從墨西哥引進該蜂，用于防治柑桔上的地中海實蠅Ceratitis capiata，有效地使地中海實蠅種群數(shù)量下降40%，局部地區(qū)寄生率高達60%以上[3-4]。我國引進該蜂后，對其室內(nèi)大量繁殖技術(shù)、生物學特性、儲藏技術(shù)和田間釋放技術(shù)等方面進行了研究，并取得了初步的成效[5-7]?！颈狙芯壳腥朦c】桔小實蠅是一種潛食性害蟲，一旦鉆入寄主組織內(nèi)，化學藥劑很難達到理想的防治效果，由于農(nóng)藥的不合理使用，桔小實蠅已對多種藥劑產(chǎn)生了嚴重的抗性[8-11]。寄主本身是寄生蜂寄生行為的重要因子，已有研究主要集中在寄主植物（或果實）、寄主本身釋放揮發(fā)物對寄生蜂選擇行為的影響[12-14]，而關(guān)于不同農(nóng)藥抗性品系對寄生蜂的影響尚未見報道。本試驗以不同抗性品系桔小實蠅為試驗靶標，研究了前列長管繭蜂對不同抗性寄主品系的選擇趨性、寄生特性及前裂長管繭蜂在不同抗性寄主品系上的幼蟲發(fā)育歷期，以期為該蜂的田間釋放奠定理論基礎(chǔ)?！緮M解決的關(guān)鍵問題】明確前列長管繭蜂對桔小實蠅不同農(nóng)藥及其抗性品系的選擇趨性、該蜂對桔小實蠅不同抗性品系的寄生情況及該蜂在桔小實蠅不同抗性品系上的發(fā)育歷期。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試前裂長管繭蜂：海南省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所室內(nèi)飼養(yǎng)的試驗種群。寄生蜂的飼養(yǎng)：將即將羽化出蜂的桔小實蠅蛹放入籠子（50 cm×35 cm×35 cm），每籠飼養(yǎng)300頭左右的雌蜂，將接蜂盤（高2～3 mm培養(yǎng)皿，上面用孔徑0.125 mm的白色濾布，用皮筋封住寄生盤，每盤含有幼蟲80頭左右）寄生24 h后取出。以10%蜂蜜水作為食物，并提供清水。

寄生蜂的繁殖、寄主飼養(yǎng)和試驗均在溫度26（±）1 ℃、濕度65%～75%、光照L∶D=14h∶10h的恒溫室內(nèi)進行。

1.2 試驗方法

試驗設(shè)常規(guī)品系（RS）以及常規(guī)品系中抗敵百蟲（MTRS）、常規(guī)品系高抗敵百蟲（HTRS）、常規(guī)品系中抗高效氯氰聚酯（MBCRS）、常規(guī)品系高抗高效氯氰聚酯（HBCRS）、常規(guī)品系阿維菌素抗性品系（ARS）6個處理。

供試不同抗性水平寄主的獲?。簲嘲傧x和高效氯氰菊酯高抗品系為連續(xù)經(jīng)15代選育后獲得；敵百蟲和高效氯氰菊酯中抗品系為連續(xù)經(jīng)9代選育后獲得，抗阿維菌素品系為連續(xù)經(jīng)9代選育后獲得。

采用“Y”型嗅覺儀測定前裂長管繭蜂對不同抗性寄主的反應(yīng)，以自制的玻璃瓶作味源瓶。嗅覺儀的兩臂及直管臂均長10.0 cm，內(nèi)徑2.0 cm，兩臂夾角75°。嗅覺儀置于前方敞開的不透明的籠子內(nèi)?！癥”型嗅覺儀兩臂分別通過硅膠管與味源瓶相連。在氣流進入味源瓶之前，先經(jīng)過一個活性炭過濾和一個蒸餾水瓶，以凈化空氣和增加空氣濕度。氣泵連接在Y型嗅覺儀主臂上，抽氣速500 mL/min，測臂的氣流量通過氣體流量計控制在250 mL/min。生測時，通過指形管，將寄生蜂逐頭引入嗅覺儀的直管內(nèi)，然后觀察記載3 min內(nèi)寄生蜂的行為反應(yīng)。選擇標準如下：當某蜂爬至出口處或超過某臂1/2處并持續(xù)1 min以上者，記該蜂對該臂的氣味源作出選擇。如蜂引入后5 min，仍不做出選擇，則結(jié)束對該蜂的行為觀察，并記為不反應(yīng)。整個生測過程在26（±1）℃的室內(nèi)進行。每測定5頭，調(diào)換嗅覺儀方位1次，用以消除幾何位置對寄生蜂行為可能產(chǎn)生的影響。每測定10頭，用95%乙醇清洗嗅覺儀并用吹風機吹干、冷卻。每個處理共測60頭蜂。當更換處理時，用超聲波清洗裝置，并用95%乙醇清洗、用烘箱烘干。試驗于每天9: 00～16: 00進行。

選擇性試驗：將不同抗性品系桔小實蠅幼蟲（三齡幼蟲）的接蜂盤同時放入試驗籠（80 cm×80 cm×80 cm）內(nèi)。每個抗性品系接蜂盤中幼蟲數(shù)量為80頭左右，不同品系隨機擺放，各品系之間及與試驗籠中心的距離基本一致，籠子內(nèi)放有10%蜂蜜水和清水，為寄生蜂提供營養(yǎng)。然后分別引入產(chǎn)卵高峰期的寄生蜂8頭，寄生24 h后，將幼蟲移出，分別放入一次性杯子中（杯底鋪有細沙），用濾布（孔徑0.125 mm）封口。置于溫室內(nèi)，直至蜂羽化，觀察并記錄寄生蜂的羽化數(shù)量。試驗設(shè)10次重復(fù)。

幼蟲在不同抗性寄主上的發(fā)育歷期：將不同抗性品系桔小實蠅幼蟲（三齡幼蟲）的接蜂盤放入試驗籠內(nèi)，寄生3 h后移出。觀察記錄前裂長管繭蜂發(fā)育歷期及其性別，每天早上8: 00、晚上20: 00各觀察一次，每種抗性寄主觀察記錄30頭。

1.3 統(tǒng)計分析方法

采用χ2 檢驗分析前裂長管繭蜂對不同抗藥性品系桔小實蠅選擇差異顯著性。前裂長管繭蜂在不同抗性寄主上的寄生數(shù)量及幼蟲發(fā)育歷期數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS17.0 軟件處理General Linear Model模塊進行分析，并進行Duncan's 多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同抗藥性品系桔小實蠅對前裂長管繭蜂選擇行為的影響

通過“Y”型嗅覺儀，測定前裂長管繭蜂對不同抗藥性品系桔小實蠅的選擇趨性，結(jié)果見圖1。從圖1可以看出，與常規(guī)品系相比，前裂長管繭蜂對高抗敵百蟲、中抗敵百蟲、高抗高效氯氰菊酯、中抗高效氯氰菊酯、抗阿維菌素品系的寄主沒有顯著的選擇偏好性。從數(shù)量上看，前裂長管繭蜂更趨向于選擇常規(guī)品系寄主，但是沒有達到顯著水平。說明不同抗性品種及水平的寄主不影響前裂長管繭蜂寄生選擇行為。

圖1 前裂長管繭蜂對不同抗藥性品系寄主的選擇趨性Fig.1 The selection tropism of D.longicaudata on different insecticide-resistant strain hosts

2.2 前裂長管繭蜂對不同抗性寄主的寄生特性

圖2 前裂長管繭蜂在不同抗性寄主的寄生數(shù)量Fig.2 The parasitic number of D.longicaudata on different resistant host strains

將不同抗性品系及常規(guī)品系寄主同時提供給前裂長管繭蜂，供其寄生選擇，前裂長管繭蜂對各寄主的選擇寄生情況見圖2。從圖2可以看出，前裂長管繭蜂對各抗性寄主的寄生數(shù)量各不相同，數(shù)量最多的為常規(guī)品系，平均為15.2（±0.25）頭，最少的為高抗敵百蟲品系，平均為13.8（±0.33）頭，但不同抗性品系被寄生的數(shù)量差異不顯著，這也進一步表明，寄主的抗性對前裂長管繭蜂的選擇行為沒有顯著影響，前裂長管繭蜂對不同抗性寄主沒有明顯的偏好性。

2.3 抗性寄主對前裂長管繭蜂幼蟲發(fā)育歷期的影響

前裂長管繭蜂在不同抗性寄主上的幼蟲發(fā)育歷期表現(xiàn)不同，雌雄蟲間也有顯著差異（圖3）。雖然前裂長管繭蜂雌蟲在中抗敵百蟲寄主品系上的幼蟲發(fā)育歷期顯著長于高抗高效氯氰菊酯寄主品系，但均與常規(guī)寄主品系無顯著差異。前裂長管繭蜂雄蟲幼蟲發(fā)育歷期在中抗敵百蟲寄主品系和中抗高效氯氰菊酯寄主品系上最長，分別為16.42（±0.12）d和16.52（±0.17）d，顯著長于常規(guī)品系和其他測試品系，其他測試品系與常規(guī)品系間無顯著差異。

圖3 前裂長管繭蜂在不同抗性寄主的幼蟲發(fā)育歷期Fig.3 Larval development duration of D.longicaudata on different resistant strains

3 討論

寄主植物釋放的化學物質(zhì)雖然在寄主棲境定位中起重要作用，但是寄主植物只是提供了寄主昆蟲存在的可能，寄生蜂要找到寄主昆蟲，還必須借助于寄主以及與它們相關(guān)的信息化合物來逐步縮小搜索范圍，從而成功繁衍后代。寄主幼蟲所釋放出來的各種化學物質(zhì)能使寄生蜂精確定位到寄主，這些化學物質(zhì)廣泛存在于幼蟲的表皮、蛻皮、絲腺、上顆腺、血淋巴、糞便等[15]。潘洪生等[16]研究棉鈴蟲Helicoverpa armigeraH ǜ bne 1～5齡寄主幼蟲釋放的揮發(fā)性物質(zhì)對中紅側(cè)溝繭蜂Microplitis mediato雌蜂選擇性試驗結(jié)果表明，中紅側(cè)溝繭蜂對一齡和二齡棉鈴蟲幼蟲的釋放的揮發(fā)性物質(zhì)有顯著的趨向性，對3～5齡棉鈴蟲幼蟲釋放的揮發(fā)物均沒有明顯的趨向行為反應(yīng)。Ngi-Song等[17-18]發(fā)現(xiàn)稻禾條螟Chilo partellus、沿岸禾螟Chilo orichal cociliellus、非洲大螟Sesamia calamistis等鉆蛀性寄主害蟲蟲體釋放的揮發(fā)性物質(zhì)，對螟黃足絨繭蜂Cotesia flavipes和大螟絨繭蜂Cotesia sesamiae選擇趨向行為有顯著影響，寄生蜂可以通過蟲體釋放的揮發(fā)性物質(zhì)成功搜索定位到寄主。本試驗中，研究了不同桔小實蠅抗藥性品系對前裂長管繭蜂選擇趨向行為的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，雖然前裂長管繭蜂對選擇常規(guī)品系寄主選擇的數(shù)量較多，但是抗性品系與常規(guī)品系之間沒有達到顯著差異。這可能是因為不同抗性品系桔小實蠅釋放的信息化合物種類和數(shù)量沒有改變或改變不大，無法對前裂長管繭蜂的選擇行為產(chǎn)生顯著影響，這為生產(chǎn)上進一步利用前裂長管繭蜂防治桔小實蠅提供了理論基礎(chǔ)。

寄主植物的種類、品種和生長階段對寄生蜂的選擇行為也存在著一定的影響[19]。趙海燕等[20]研究發(fā)現(xiàn)當桔小實蠅和瓜實蠅同時存在時，蠅蛹俑小蜂偏好選擇桔小實蠅寄生。白蠟吉丁腫腿蜂Sclerodermus pupariaeYang et Yao能夠寄生多種天牛和吉丁甲的幼蟲，且后代都能正常生長發(fā)育[21]。本研究通過非選擇試驗發(fā)現(xiàn)，前裂長管繭蜂對不同抗性品系的桔小實蠅沒有寄生差別，這可能是因為抗藥性的提高沒有改變桔小實蠅本身的營養(yǎng)物質(zhì)成分，對前裂長管繭蜂后代的生長發(fā)育沒有影響。

4 結(jié)論

前裂長管繭蜂是一種內(nèi)寄生蜂，從卵期到成蟲羽化前均在寄主體內(nèi)完成，其生長發(fā)育所需要的物質(zhì)主要依靠寄主。本試驗結(jié)果表明，前裂長管繭蜂在高抗品系上的發(fā)育歷期顯著短于中抗品系和常規(guī)品系，在中抗品系和常規(guī)品系上差異不顯著。這可能是因為隨著寄主抗藥性的增加，其體內(nèi)組織、體液和營養(yǎng)物質(zhì)的成分發(fā)生了改變，亦或是寄主不利的環(huán)境加速了寄生蜂的生長發(fā)育，其表型下的抗逆性機理還有待進一步深入研究。

人為增加害蟲天敵種群數(shù)量是生物防治中的重要手段之一。人工增殖的天敵昆蟲通常是經(jīng)室內(nèi)大量擴繁的種群，目前除了少數(shù)能用人工飼料飼養(yǎng)的天敵昆蟲種類外，多半仍采用自然寄主飼喂天敵昆蟲，其寄主多為長期馴化的敏感品系或單一品系。但是田間的實際情況卻要復(fù)雜的多，不同地區(qū)甚至不同地塊使用農(nóng)藥的種類和數(shù)量不盡相同，其抗性水平也就不同，目前關(guān)于人工增殖天敵（寄生蜂）對田間抗性寄主的寄生情況的研究鮮見報道。本研究發(fā)現(xiàn)桔小實蠅不同農(nóng)藥品種及不同抗性水平的抗性品系對前裂長管繭蜂的寄生選擇無顯著影響，但顯著影響雄蜂的幼蟲發(fā)育歷期，該結(jié)果可為田間科學釋放前裂長管繭蜂有效控制桔小實蠅和有效調(diào)控寄生蜂生長發(fā)育及寄生蜂與寄主的互作提供了理論依據(jù)和研究思路。由于物種的特異性，不同寄生蜂間的寄生特性存在差異，其他種類的寄生蜂對其抗性寄主的寄生特性還有待進一步研究。