曹輝瓊，蔡清紅

(惠州市第三人民醫(yī)院消化科，廣東 惠州 516001)

胃癌是臨床上最為常見的惡性腫瘤之一，也是威脅人類健康和生命安全的主要惡性腫瘤，具有較高的發(fā)病率，好發(fā)于中老年群體中，近年來其發(fā)病率有了一定的上升，并且呈現(xiàn)出年輕化趨勢。缺氧在惡性腫瘤中較為常見，解決這一問題的關(guān)鍵在于新生血管體系的形成，而形成新生血管又會對腫瘤的發(fā)生和進展造成一定的影響，對預后隨之造成相應(yīng)的影響[1]。大量研究實踐證明，刺激腫瘤血管生成的生長因子比較多，其中較為常見的生長因子中，血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)比較關(guān)鍵[2]。研究表明，在腫瘤血管的生成中，缺氧誘導因子-1(HIF-1)具有調(diào)控作用，對于眾多靶基因的表達進行調(diào)控，其中便包括VEGF[3]。HIF-1α是唯一的氧分子調(diào)節(jié)亞單位，而其過度表達已被證明對血管生成具有促進作用。本研究為進一步探究HIF-1α、VEGF的表達與胃癌血管生成的關(guān)系，將我院消化內(nèi)科2014年1月～2018年6月收治的60例胃癌患者納入樣本中展開探究?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取2014年1月～2018年6月在我院消化內(nèi)科治療的胃癌患者60例進行研究，男34例，女26例；年齡43～76歲，平均(57.49±1.34)歲；病程7年，平均(4.15±0.37)年。臨床TNM分期方面，1期、2期、3期、4期各有9例、20例、23例、8例。組織學分級方面，高分化、中分化、低分化各有16例、30例、14例。轉(zhuǎn)移情況方面，轉(zhuǎn)移和未轉(zhuǎn)移各有31例、29例。另選取消化內(nèi)科胃鏡室胃鏡下12例正常胃黏膜組織標本進行對照研究，男7例，女5例；年齡37～75歲，平均(56.12±2.48)歲。

1.2方法

1.2.1免疫組化染色：標本離體，使用4%甲醛用于固定，制作成蠟塊，切成4 μm厚片狀。脫蠟處理，置于水中，3%的雙氧水封閉處理，持續(xù)10 min左右。HIF-1α采用檸檬酸鈉-微波進行修復，工作濃度控制為1∶100。采用復合酶修復用于VEGF的修復，控制好工作濃度為1∶50。選擇即用型CD34。

1.2.2結(jié)果判定：參照文獻[4]中的方法，光鏡下觀察HIF-1α蛋白，若細胞內(nèi)核表現(xiàn)為淺黃色、棕黃色細顆粒，則為陽性。高倍鏡下(*400)對全部切片隨機選擇5個視野，共計數(shù)1000個細胞，即每個切片200個細胞。對每張切片中的陽性細胞占比進行計算，標準：①陰性片：切片中陽性細胞占比在1%以下；②陽性(+)：切片中陽性細胞占比1%～10%；③陽性(++)：切片中陽性細胞占比11%～50%；④陽性(+++)：切片中陽性細胞占比50%以上。 光鏡下觀察VEGF蛋白，若腫瘤細胞胞質(zhì)內(nèi)表現(xiàn)為淺黃色、棕黃色細顆粒，則為陽性，將VEGF分為陰性(-)、陽性(+)、陽性(++)、陽性(+++)四個級別。

1.3統(tǒng)計學處理：數(shù)據(jù)分析使用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件包，相關(guān)性采用Spearman分析，計數(shù)資料以率(%)表示，采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1胃癌組織中HIF-1α、VEGF的表達：HIF-1α陽性信號表達欲細胞核、細胞質(zhì)中，陽性表達例數(shù)29例，陽性表達率為48.33%(29/60)。VEGF陽性表達例數(shù)25例，陽性率為41.67%(25/60)。同正常胃黏膜組織相比，胃癌組織HIF-1α陽性表達率和VEGF陽性表達率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。在不同分化程度胃癌中表達中，HIF-1α和VEGF陽性表達比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2胃癌組織HIF-1α、VEGF表達及血管生成的關(guān)系：針對HIF-1α、VEGF同血管生成的關(guān)系，行Spearman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，HIF-1α、VEGF表達有一致性，符合率為86.67%(52/60)，且二者表達呈顯著正相關(guān)(r=0.714，P<0.05)。見表2。VEGF與血管生成呈顯著正相關(guān)(r=0.687，P<0.05)。在血管生成方面，陽性腫瘤組織與其相應(yīng)的陰性組織差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，同時陽性者MVD值與陰性的血管生成值差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，陽性明顯MVD值明顯高于陰性血管生成值。

表1 胃癌組織中HIF-1α、VEGF的表達

表2 胃癌組織HIF-1α、VEGF表達成的關(guān)系

3 討論

臨床消化內(nèi)科中，胃癌是常見的惡性腫瘤，容易發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移，預后性較差，一旦治療不及時或者治療效果不理想，患者將極有可能死亡。腫瘤的轉(zhuǎn)移機制近年來得到臨床的廣泛研究多數(shù)研究認為在腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移、生長的過程中，新生血管的生成是其重要因子，參與到了腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移。

研究表明，腫瘤新生血管在生成的過程，起到?jīng)Q定性的影響因素，周圍微環(huán)境中促進因子和抑制因子等正負調(diào)控因子的平衡是關(guān)鍵[5]。從當前臨床研究來看，血管內(nèi)皮生長因子(VGEF)是已知的重要的血管生成促進因子，具有高度的特異性特點，屬于血管內(nèi)皮細胞有絲分裂素[6]。HIF-1在基因水平上，對VRGF的表達形成直接性調(diào)控。其中HIF-1的亞單位主要有兩個，分別為HIF-1α和HIF-1β，而HIF-1α是唯一的低氧分子調(diào)節(jié)亞單位，對HIF-1的活性具有直接性作用。本研究結(jié)果顯示，胃癌組織中的HIF-1α表達和VEGF表達呈顯著正相關(guān)，并且二者在腫瘤表達中存在符合率比較高，具有高度相似性。有關(guān)HIF-1α和VEGF與胃癌血管生成的機制研究比較多，不過多數(shù)研究都認為在腫瘤的生長和發(fā)展中，腫瘤體積會不斷地增大，血供因為無法滿足其生長和發(fā)展要求出現(xiàn)不足的情況，導致發(fā)生缺氧壞死，誘導HIF-1α過度表達[7]。HIF-1α的過度表達，對于下游靶基因VEGF的表達也起到誘發(fā)作用，致使VEGF表達增強，活化的HIF-1α與靶基因上的HIF-1α結(jié)合位點結(jié)合，形成轉(zhuǎn)錄起始復合物，從而起動靶基因轉(zhuǎn)錄和相應(yīng)的蛋白產(chǎn)物增加。而VEGF表達的增加，對血管內(nèi)皮細胞表面的VEGFR1和VEGFR2形成作用，激活一系列缺氧轉(zhuǎn)導通路，造成新生血管生成[7]。在腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移過程中，新血管生成是其充分且必要條件，VEGF以旁分泌方式作用于細胞上的兩種受體，誘導血管形成[8]。相關(guān)研究證實，在腫瘤的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移過程中，VEGF的表達參與其中，使腫瘤細胞在適應(yīng)缺氧、能量代謝、腫瘤血管生成和轉(zhuǎn)移中起重要作用[8]。因此，在對胃癌轉(zhuǎn)移潛能和預后的判斷過程中，加強對HIF-1α和VEGF的聯(lián)合檢測具有十分重要的臨床指導意義。

綜上所述，缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達與胃癌血管生成關(guān)系密切，呈顯著正相關(guān)，二者的表達對血管生成以及腫瘤的轉(zhuǎn)移起到了促進作用。