A 型流感病毒是引起人及多種動物流感的重要病原，流感病毒的跨物種傳播一直是研究的熱點(diǎn)。豬一直被認(rèn)為是人、禽、豬流感的“混合器”，是促進(jìn)禽流感病毒（AIV）與其它物種流感病毒發(fā)生基因重排進(jìn)而引起流感大流行的重要中間宿主。已知的1918 年、1957 年、1968 年和2009 年4 次全球性流感大流行均與禽源和其它物種流感病毒的基因重組密切相關(guān)。由于種屬屏障作用，AIV 很難直接傳播到人，但其可輕易傳播到豬。

流感病毒的RNA 聚合酶負(fù)責(zé)病毒基因組的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，是流感病毒跨種傳播的重要屏障之一。AIV的RNA 聚合酶活性在哺乳動物中一般是受限的，然而已有研究表明不同亞型AIV均可以從豬體內(nèi)分離得到，這提示AIV RNA 聚合酶可以在豬體內(nèi)復(fù)制，但其具體的適應(yīng)分子機(jī)制目前并不明確。

近期發(fā)表于《PLoS Pathogens》的一項(xiàng)研究，首次揭示了AIV RNA 聚合酶在豬體內(nèi)適應(yīng)的分子機(jī)制，并闡明了豬ANP32A 蛋白是豬可支持AIV 跨物種傳播的關(guān)鍵因子。

該研究團(tuán)隊(duì)前期研究已經(jīng)證明宿主ANP32A&B蛋白是不同物種流感病毒聚合酶發(fā)揮功能的決定性宿主蛋白，且具有種屬特異性。在此基礎(chǔ)上，該研究進(jìn)一步利用聚合酶雙熒光報告系統(tǒng)，檢測了不同物種ANP32A&B 蛋白對人、禽、豬、犬、馬等不同物種流感病毒聚合酶復(fù)制的支持作用。結(jié)果提示，相較于其它哺乳動物ANP32A 或ANP32B 蛋白，豬ANP32A（swANP32A）蛋白能夠特異性支持禽源H7N9及H9N2亞型流感病毒聚合酶復(fù)制。為進(jìn)一步確認(rèn)swANP32A的功能，該團(tuán)隊(duì)構(gòu)建了豬源PK15 細(xì)胞ANP32A 敲除細(xì)胞系（AKO-PK15），聚合酶活性分析及流感病毒感染試驗(yàn)均證明，swANP32A 的缺失特異性導(dǎo)致禽源流感病毒聚合酶活性及病毒復(fù)制滴度顯著下降，而不影響哺乳動物流感病毒的復(fù)制，提示ANP32A 是豬源PK15細(xì)胞可以特異性支持AIV復(fù)制的關(guān)鍵因子。

已有研究顯示禽源ANP32A 不同于哺乳動物ANP32A，前者擁有一個33 個氨基酸的插入片段，使其能夠特異性地支持禽源流感病毒聚合酶復(fù)制。而哺乳動物ANP32A 和ANP32B 不具有此插入序列，因此不支持AIV聚合酶復(fù)制。本研究通過序列比對分析發(fā)現(xiàn)，swANP32A 不具有禽源ANP32A 類似的插入序列，但卻存在一種特有的106V/156S 突變。進(jìn)一步通過定點(diǎn)突變結(jié)合聚合酶活性分析，明確了swANP32A蛋白的106V/156S 位點(diǎn)是其發(fā)揮支持AIV RNA 聚合酶活性的關(guān)鍵位點(diǎn)，也是影響其與禽源RNA 聚合酶復(fù)合物結(jié)合動力學(xué)的關(guān)鍵位點(diǎn)。

該研究首次從宿主因子角度分析豬作為中間宿主支持AIV 復(fù)制的分子機(jī)制，闡明了宿主蛋白swANP32A 是支持AIV 跨物種傳播到豬的關(guān)鍵因子，并明確了swANP32A 蛋白的關(guān)鍵活性位點(diǎn)是106V/156S，為新型抗流感藥物及轉(zhuǎn)基因動物的研發(fā)提供有效靶點(diǎn)。