張雪婧，蒲萬(wàn)霞

(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院新獸藥工程重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室甘肅省新獸藥工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 蘭州 730050)

2018年，全球原料奶產(chǎn)量約為8.27億t，較2017年增長(zhǎng)2%，主要增產(chǎn)貢獻(xiàn)為亞洲[1]。養(yǎng)殖過(guò)程中，由于抗生素的大量使用，動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生大量耐藥菌。隨著農(nóng)業(yè)的發(fā)展，環(huán)境中的抗生素作為一類(lèi)新型的污染物已成為國(guó)內(nèi)外關(guān)注的焦點(diǎn)。大部分的抗生素不能在動(dòng)物體內(nèi)完全代謝，可通過(guò)動(dòng)物的糞便或尿液排出體外，進(jìn)入到環(huán)境中，從而影響環(huán)境中微生物群落結(jié)構(gòu)[2-5]。已有研究發(fā)現(xiàn)，在土壤、水源、動(dòng)物養(yǎng)殖環(huán)境介質(zhì)中均檢測(cè)到耐藥基因[6-7]。本研究對(duì)全國(guó)大部分地區(qū)奶牛源抗生素耐藥情況及耐藥基因檢出情況進(jìn)行綜述，旨在為了解奶牛源抗生素耐藥情況及臨床指導(dǎo)用藥提供參考。

1 奶牛場(chǎng)中常見(jiàn)病原菌耐藥情況

1.1 大腸埃希菌

奶牛乳房炎是奶牛養(yǎng)殖過(guò)程中發(fā)病率高的疾病之一。目前，抗生素治療奶牛乳房炎仍然是最常用及最有效的方法，由于抗生素不合理及大量濫用，導(dǎo)致奶牛乳房炎病原菌產(chǎn)生耐藥性，且耐藥菌株呈不斷增多趨勢(shì)，甚至出現(xiàn)超級(jí)耐藥菌株，給奶牛乳房炎的臨床治療帶來(lái)了很大的挑戰(zhàn)[8]。張咚咚等[9]對(duì)北京地區(qū)奶牛乳房炎細(xì)菌耐藥情況調(diào)查發(fā)現(xiàn)，患病奶牛乳樣中所分離的菌株對(duì)萬(wàn)古霉素、氧氟沙星等高度敏感，對(duì)青霉素、頭孢曲松、頭孢噻肟等高度耐藥。Sakwinska等[10]發(fā)現(xiàn)，奶牛乳房炎患病奶牛乳樣中分離菌株對(duì)青霉素高度耐藥。章慧等[11]研究發(fā)現(xiàn)，上海地區(qū)奶牛乳房炎患病乳樣中分離菌株對(duì)青霉素、氨芐西林耐藥率達(dá)到100%，且存在多重耐藥情況。吳明光[12]研究發(fā)現(xiàn)，山東地區(qū)分離的奶牛乳房炎源大腸埃希菌對(duì)氟苯尼考、頭孢曲松、頭孢他啶、恩諾沙星4種藥物高度敏感;對(duì)新霉素等7種藥物耐藥。高健鵬等[13]對(duì)新疆地區(qū)研究發(fā)現(xiàn)，奶牛乳房炎對(duì)青霉素、鏈霉素、四環(huán)素等抗生素耐受。大部分地區(qū)奶牛場(chǎng)均存在奶牛乳房炎的病例，由于抗生素的不規(guī)范使用導(dǎo)致細(xì)菌耐受及多重耐藥菌株的出現(xiàn)，對(duì)青霉素、頭孢類(lèi)抗生素耐藥情況最為嚴(yán)重。

1.2 金黃色葡萄球菌

金黃色葡萄球菌是一種革蘭氏陽(yáng)性菌，是引起奶牛乳房炎的重要致病菌之一，感染率達(dá)50%以上[14]。趙艷坤等[15]通過(guò)對(duì)金黃色葡萄球菌耐藥性及變遷情況研究發(fā)現(xiàn)，奶牛乳房炎對(duì)青霉素、氨芐西林抗生素耐藥情況嚴(yán)重。高攀[16]對(duì)新疆地區(qū)奶牛乳房炎病例研究發(fā)現(xiàn)，金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素、氨芐西林耐藥嚴(yán)重。馮小慧等[17]發(fā)現(xiàn)，內(nèi)蒙古地區(qū)金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素、復(fù)方新諾明等高度耐藥。王洪海等[18]發(fā)現(xiàn)，金黃色葡萄球菌對(duì)環(huán)丙沙星、慶大霉素和頭孢他啶的敏感性高，無(wú)乳鏈球菌對(duì)頭孢他啶、克林霉素的敏感性較高，停乳鏈球菌對(duì)慶大霉素、克林霉素的敏感性較高，對(duì)青霉素耐藥。陜西某牛場(chǎng)中奶牛隱性乳房炎對(duì)鏈霉素、青霉素、阿莫西林、氨芐西林耐藥率高[19]。天津地區(qū)奶牛場(chǎng)中奶牛對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、林可酰胺類(lèi)藥物耐藥率普遍較高[20]。金黃色葡萄球菌作為奶牛養(yǎng)殖中常見(jiàn)的致病菌，抗生素的廣泛使用使其耐藥情況比較嚴(yán)重，尤其以青霉素、氨芐西林等耐藥嚴(yán)重，并且多重耐藥現(xiàn)象普遍存在于各地區(qū)。

1.3 鏈球菌

田曉英等[21]調(diào)查發(fā)現(xiàn)，華北地區(qū)四省奶牛場(chǎng)中鏈球菌分離株對(duì)苯唑西林和青霉素完全耐藥，對(duì)四環(huán)素類(lèi)藥物耐藥性較高，對(duì)喹諾酮類(lèi)和氨基糖苷類(lèi)藥物耐藥性較低，華北地區(qū)鏈球菌總檢出率較低，但多重耐藥情況嚴(yán)重。向敏等[22]對(duì)湖北省奶牛場(chǎng)進(jìn)行調(diào)查發(fā)現(xiàn)，鏈球菌對(duì)青霉素鈉、頭孢噻呋鈉抗性強(qiáng)，但對(duì)穿心蓮、魚(yú)腥草等中藥材比較敏感。杜琳等[23]對(duì)我國(guó)部分地區(qū)奶牛乳房炎致病菌進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，鏈球菌分離株數(shù)較少，分離出的革蘭氏陽(yáng)性菌對(duì)氨曲南的耐藥率最高，革蘭氏陰性菌對(duì)氨芐西林的耐藥率最高。郭玉茹等[24]發(fā)現(xiàn)，遼寧某牛場(chǎng)中奶牛對(duì)頭孢氨芐、磺胺類(lèi)藥物耐藥率達(dá)到100%，對(duì)苯唑西林、林可霉素耐藥率達(dá)到80%以上，并且多重耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重。昆明地區(qū)奶牛場(chǎng)對(duì)青霉素嚴(yán)重耐藥，且出現(xiàn)7種藥物同時(shí)耐藥的情況[25]。鏈球菌存在于奶牛養(yǎng)殖環(huán)境中，但檢出株數(shù)較少，鏈球菌的耐藥率和多重耐藥現(xiàn)象也很?chē)?yán)重，在臨床治療中，可嘗試選用中西結(jié)合或選用抗生素替代物，以降低抗生素的耐藥情況。

2 奶牛場(chǎng)中耐藥基因檢測(cè)

耐藥基因作為一種新型環(huán)境污染物，廣泛存在于環(huán)境中，借助質(zhì)粒、整合子、轉(zhuǎn)座子等可移動(dòng)遺傳元件在細(xì)菌之間進(jìn)行水平基因轉(zhuǎn)移[26-27]。由于抗生素大部分會(huì)以原藥形式排出體外，養(yǎng)殖場(chǎng)中的動(dòng)物糞便中存有大量的耐藥菌和耐藥基因，危害到畜禽及人類(lèi)健康。北京地區(qū)畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)周邊農(nóng)田中蔬菜樣品檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，磺胺類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)抗生素耐藥基因檢出率達(dá)到100%，并檢測(cè)出禁用多年的氯霉素耐藥基因(cmlA)[28]。對(duì)廣西地區(qū)畜禽產(chǎn)品檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，耐藥基因qnrA檢出率達(dá)到91.18%，blaTEM檢出率達(dá)100%，并且多重耐藥情況嚴(yán)重[29]。于長(zhǎng)泳[30]對(duì)遼寧省奶羊場(chǎng)中磺胺類(lèi)耐藥基因進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，sul1基因檢出率最高，與藥敏試驗(yàn)結(jié)果中病原菌對(duì)磺胺類(lèi)藥物高度耐藥結(jié)果相符。河北省7個(gè)地區(qū)的420份乳房炎奶牛乳樣中，喹諾酮類(lèi)(gyrA、qnrB)和大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)(ermB)耐藥基因檢出率高[31]。寧夏地區(qū)畜產(chǎn)品中，磺胺類(lèi)(sul1、sul2)和四環(huán)素類(lèi)(tetE)耐藥基因的檢出率較高[32]。

3 小結(jié)

作為農(nóng)業(yè)大國(guó)，畜產(chǎn)品的食品安全與人類(lèi)健康息息相關(guān)。我國(guó)是世界上最大的抗生素生產(chǎn)國(guó)和使用國(guó)[33]，抗生素的不規(guī)范使用使得耐藥菌、耐藥基因大量產(chǎn)生。黃廷鵬[34]對(duì)甘肅省金昌地區(qū)奶?？股氐挠盟庍M(jìn)行調(diào)研發(fā)現(xiàn)，由于長(zhǎng)期單一地使用抗生素治療牛病，導(dǎo)致奶牛個(gè)體出現(xiàn)不同程度的耐藥。動(dòng)物在養(yǎng)殖過(guò)程中抗生素的用量大，抗生素通過(guò)糞便、尿液等排出進(jìn)入環(huán)境中，對(duì)土壤、水源等均造成不同程度的污染。從銀川市規(guī)模奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)糞便、污水和土壤中分離鑒定出429株細(xì)菌，條件致病菌占88.55%，主要以金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和托爾豪特鏈球菌為主[35]。奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)中廢物的排放對(duì)人和動(dòng)物的健康存在潛在風(fēng)險(xiǎn)，若不經(jīng)處理直接排放或還田施用，將對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境和自然環(huán)境造成威脅。對(duì)各地區(qū)奶牛源抗生素使用情況調(diào)查發(fā)現(xiàn)，雖然各地區(qū)養(yǎng)殖環(huán)境、飼養(yǎng)方法等存在地域差異，但實(shí)際生產(chǎn)中抗生素種類(lèi)大體一致，青霉素類(lèi)、頭孢類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)等抗生素的耐藥情況嚴(yán)重。耐藥基因檢出率與抗生素的耐藥情況有關(guān)，但磺胺類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)、β-內(nèi)酰胺類(lèi)耐藥基因檢出率高。在實(shí)際生產(chǎn)中，可選用中西藥結(jié)合或以中藥為主的治療方案，降低藥物的耐藥和多重耐藥現(xiàn)象。