閆春妮 黃磊 宋曉瑾 程麗娜

隨著顯微手術器械的改進和手術技術的提高，玻璃體切除硅油填充術已經(jīng)成為眼科拯救患者視力不可缺少的重要手術之一[1]。視網(wǎng)膜脫離術在臨床上的廣泛應用使得眼內(nèi)硅油填充引起的并發(fā)癥也逐漸引起人們的重視。硅油填充術后常見的并發(fā)癥有白內(nèi)障、繼發(fā)性青光眼、角膜變性、視神經(jīng)視網(wǎng)膜變性等。繼發(fā)性青光眼是視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后最常見的并發(fā)癥之一[2]。術后并發(fā)青光眼可損害視神經(jīng)而影響視覺功能，如不及時治療可能發(fā)生永久性視功能損傷，因此受到人們廣泛的關注。白細胞介素-2(interleukin-2，IL-2)和白細胞介素-6(interleukin-6，IL-6)是常見的炎性因子，單核細胞趨化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1，MCP-1)是一種疼痛相關的炎癥趨化因子，有較多研究報道IL-2、IL-6、MCP-1與多種眼部疾病有關[3-4]。本研究通過檢測視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后繼發(fā)青光眼患者房水中IL-2、IL-6、MCP-1水平，并分析其對術后繼發(fā)青光眼的預測價值。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 一般資料選擇本院2015年6月至2016年12月收治視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后繼發(fā)青光眼患者24例為繼發(fā)青光眼組，其中男11例、女13例，年齡30～68(59.47±11.52)歲；選取同期視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后眼壓正常行硅油取出術患者50例為對照組，男26例、女24例，年齡28～70(61.28±10.84)歲。2組患者性別、年齡等一般資料具有可比性(均為P>0.05)。

1.1.2 納入及排除標準納入標準：(1)視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術均為原發(fā)性孔源性視網(wǎng)膜脫離患者；(2)繼發(fā)青光眼患者術后眼壓≥24 mmHg(1 kPa=7.5 mmHg)，同時術后眼壓超過術前10 mmHg及以上，且眼壓持續(xù)升高6周以上；(3)繼發(fā)青光眼患者隨訪排除原發(fā)性青光眼，眼底情況穩(wěn)定；(4)患者及家屬知情同意并自愿簽署知情同意書。排除標準：(1)術前行系統(tǒng)性眼部檢查，出現(xiàn)原發(fā)性青光眼、葡萄膜炎等免疫相關性眼病患者；(2)術后應用糖皮質(zhì)激素大于2周者；(3)術后前房出血或外傷患者；(4)患有肝、腦、腎等基礎器官嚴重疾病者；(5)糖尿病及全身炎癥性疾病患者。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集患者行硅油取出術，常規(guī)消毒鋪無菌巾，行球后神經(jīng)阻滯麻醉，開瞼器開瞼，生理鹽水沖洗結膜囊，用1 mL一次性注射器在角膜緣內(nèi)0.5～1.0 mm處刺入前房分別抽取0.1～0.2 mL未稀釋房水，置于0.5 mL密封無菌離心管中并編號，-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 房水中IL-2、IL-6和MCP-1水平檢測患者房水中IL-2、IL-6、MCP-1水平檢測采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)，試劑盒購自Abcam公司，按照酶聯(lián)免疫吸附試劑盒說明書進行點樣，每孔5 μL，37 ℃孵育20 min，在酶標儀上機檢測各樣本對應吸光度值。繪制吸光度值——標準品濃度曲線，將樣本吸光度值帶入曲線，計算房水中IL-2、IL-6、MCP-1水平。

2 結果

2.1 2組患者房水中IL-2、IL-6、MCP-1的水平比較繼發(fā)青光眼組患者房水中IL-2、IL-6和MCP-1水平均顯著高于對照組患者(均為P<0.05)。見表1。

組別nIL-2/μg·L-1IL-6/ng·L-1MCP-1/μg·L-1對照組500.19±0.0310.49±2.323.07±0.44繼發(fā)青光眼組240.28±0.0418.21±2.173.96±0.46t值10.81213.6768.027P值0.0000.0000.000

2.2 繼發(fā)青光眼組患者房水中IL-2、IL-6、MCP-1的相關性分析繼發(fā)青光眼組患者房水中IL-2與IL-6水平呈正相關(r=0.616，P=0.000)，IL-2與MCP-1水平呈正相關(r=0.594，P=0.000)，IL-6與MCP-1水平呈正相關(r=0.608，P=0.000)。見圖1。

2.3 房水中IL-2、IL-6、MCP-1對繼發(fā)青光眼預測價值分析ROC曲線分析顯示，房水中IL-2預測視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后繼發(fā)青光眼ROC曲線下面積(area under curve，AUC)為0.845(95%CI：0.732～0.958)，約登指數(shù)為0.650，截斷值為0.23 μg·L-1，敏感度為75.0%，特異度為90.0%；房水中IL-6預測術后繼發(fā)青光眼AUC為0.896(95%CI：0.820～0.972)，約登指數(shù)為0.668，截斷值為13.96 ng·L-1，敏感度為70.8%，特異度為95.9%；房水中MCP-1預測術后繼發(fā)青光眼AUC為0.872(95%CI：0.786～0.958)，約登指數(shù)為0.675，截斷值為3.54 μg·L-1，敏感度為87.5%，特異度為80.0%。見圖2。

2.4 房水中IL-2、IL-6、MCP-1聯(lián)合檢測對繼發(fā)青光眼預測價值分析ROC曲線分析顯示，房水中IL-2、IL-6、MCP-1聯(lián)合檢測繼發(fā)青光眼的AUC為0.978，敏感度為91.7%，特異度為96.0%。見圖3。

圖1 繼發(fā)青光眼組患者房水中IL-2、IL-6、MCP-1的兩兩相關性分析結果。A：IL-2與IL-6相關性分析結果；B：IL-2與MCP-1相關性分析結果；C：IL-6與 MCP-1 相關性分析結果

圖2 房水中IL-2、IL-6、MCP-1對繼發(fā)青光眼診斷效能分析

3 討論

玻璃體視網(wǎng)膜手術是治療視網(wǎng)膜脫離、視網(wǎng)膜靜脈阻塞等疾病的重要方法，視網(wǎng)膜脫離患者常需行玻璃體切割術[5]。硅油具有透光性好、屈光指數(shù)接近玻璃體、理化性質(zhì)穩(wěn)定、對視網(wǎng)膜無急性毒副作用等優(yōu)點，廣泛應用于復雜性視網(wǎng)膜脫離術后的眼內(nèi)填充材料[6]。對于一些頑固性、復雜性視網(wǎng)膜脫離，玻璃體切割術后需用硅油在玻璃體內(nèi)進行長久填充，以使視網(wǎng)膜復位，提高手術效果[7]。硅油在眼內(nèi)長期滯留會干擾眼內(nèi)血液循環(huán)和能量代謝，損害正常眼組織，導致各種并發(fā)癥，包括繼發(fā)性青光眼、角膜變性等[8]。Teke等[9]研究結果顯示，10%～40%患者在手術治療后繼發(fā)性青光眼。可能由于硅油的生物學功能不能完全取代玻璃體，會刺激內(nèi)部細胞產(chǎn)生有害物質(zhì)，引起繼發(fā)性青光眼，甚至對視神經(jīng)細胞造成嚴重的永久性傷害[10]。以往研究表明，高眼壓與青光眼發(fā)生有關，但最近研究發(fā)現(xiàn)，視神經(jīng)受損患者也可出現(xiàn)青光眼，但眼壓正常[11]。以上研究提示，青光眼的發(fā)生不僅僅是單獨眼壓高引起，可能還存在一些其他的生物學機制引起青光眼及視神經(jīng)損傷。術后填充過量硅油、硅油進入前房、瞳孔阻滯、硅油乳化、術后炎癥反應等均為可能誘因[12]。然而缺乏視網(wǎng)膜脫離玻璃體切除硅油填充術后繼發(fā)青光眼的預測指標，給術后繼發(fā)青光眼預測帶來困難。

圖3 房水中IL-2、IL-6、MCP-1聯(lián)合檢測對繼發(fā)青光眼診斷效能分析

青光眼視神經(jīng)損傷過程與細胞凋亡密切相關，細胞因子是細胞凋亡的起始因子，IL-2、IL-6和MCP-1等均屬于細胞因子重要成員。研究表明，高眼壓治療后，IL-1、IL-2、IFN-c和TNF-α水平顯著下降，表明炎癥因子與青光眼視神經(jīng)保護有關[13]。Ohira等[14]研究發(fā)現(xiàn)，青光眼患者房水中的IL-6、IL-8和TNF-α水平顯著高于未發(fā)生青光眼患者，提示房水中IL-6水平與青光眼發(fā)病有關。本研究結果顯示，視網(wǎng)膜脫離玻璃體切除硅油填充術后繼發(fā)青光眼患者房水中IL-2、IL-6水平顯著高于對照組患者，與以往研究結果一致[14]，提示IL-2和IL-6可能與繼發(fā)青光眼有關，Pearson相關性分析顯示，IL-2與IL-6呈正相關，表明二者在青光眼發(fā)病中可能共同發(fā)揮作用，提示檢測視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后患者房水中IL-2、IL-6水平可能對繼發(fā)青光眼有一定的預測價值。本研究利用ROC曲線分析患者房水中IL-2和IL-6水平對視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后繼發(fā)青光眼的預測價值，結果顯示IL-2和IL-6水平對術后繼發(fā)青光眼有一定的預測篩選價值，提示檢測視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后患者房水中IL-2和IL-6水平可為預測繼發(fā)青光眼發(fā)生提供參考，但敏感度較低。

MCP-1可以趨化單核細胞、巨噬細胞和T淋巴細胞，影響其吞噬作用以及產(chǎn)生抗體[15]。本研究結果顯示，視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后繼發(fā)青光眼患者房水中MCP-1水平顯著高于對照組患者，與MCP-1在青光眼患者房水中的水平一致[16]，表明MCP-1水平與青光眼發(fā)病有關，提示檢測患者房水中MCP-1水平可能對預測患者繼發(fā)青光眼也有一定預測價值。ROC曲線分析顯示MCP-1預測術后繼發(fā)青光眼AUC為0.872，敏感度為87.5%，特異度為80.0%，表明房水中MCP-1水平對預測患者繼發(fā)青光眼有一定預測價值，但敏感度不高。Pearson相關性分析顯示，MCP-1分別與IL-2和IL-6呈正相關，推測MCP-1可能趨化炎癥因子IL-2和IL-6，共同參與視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后繼發(fā)青光眼的發(fā)病過程。已有研究表明生物指標聯(lián)合檢測診斷效能高于單一生物指標的檢測效能[17]。ROC曲線分析MCP-1、IL-2、IL-6聯(lián)合檢測對視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后繼發(fā)青光眼的AUC為0.978，敏感度為91.7%，特異度為96.0%，預測價值顯著提高，且高于單一指標的預測價值，表明視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后檢測患者房水中 MCP-1、IL-2、IL-6水平對繼發(fā)青光眼的篩選有重要的參考價值。

綜上所述，視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后繼發(fā)青光眼患者房水中IL-2、IL-6、MCP-1水平升高，三者聯(lián)合檢測對術后繼發(fā)青光眼的預測有參考價值。但IL-2、IL-6、MCP-1在視網(wǎng)膜脫離行玻璃體切除硅油填充術后繼發(fā)青光眼中的具體機制有待進一步研究。