于占晶

（衡水學院生命科學系 河北 衡水 053000）

蘋果斑點落葉病作為蘋果的四大病害之一，是由蘋果鏈格孢菌侵染而引起的一種早期落葉病[1]。該病以菌絲體在落葉、芽的鱗片及病枝上越冬，在第2年的春天，病斑上會產(chǎn)生新的孢子，通過風雨傳播，侵染新生葉片[2]。20世紀70年代，蘋果斑點落葉病在中國開始流行[3]，許多蘋果園的病害率超過90%，落葉率為20%～80%，嚴重影響樹木健康和產(chǎn)量[4]，給果農(nóng)帶來巨大的經(jīng)濟損失。目前，生產(chǎn)上有物理防治、生物防治和化學防治這3種防治方法[5]。我國蘋果斑點落葉病的防治還是以化學防治為最主要的手段，同時結合其他措施[6]。本研究旨在從諸多化學藥劑中有針對性地篩選出對病原菌拮抗效果好的藥劑，從而為進一步的田間防效測定打下基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試藥劑。選用20%吡唑醚菌酯懸浮劑(利民化工股份有限公司)、氟硅唑乳油(青島星牌作物科學有限公司)、12%戊唑·30%多菌靈懸浮劑(青島星牌作物科學有限公司)、菌清懸浮劑(現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術轉化基地)、30%戊唑醇懸浮劑(青島星牌作物科學有限公司)5種藥劑進行試驗。

1.1.2 供試菌株。蘋果斑點落葉病菌(A.alternata f.sp.mali)，由衡水學院園林植物實驗學實驗室保存并提供。

1.2 試驗方法。5種化學藥劑對病原菌菌絲生長的毒力測定采用菌絲生長速率法，分別取1 ml化學藥劑加進到滅菌的冷卻至40℃～50℃的99 ml的PDA培養(yǎng)基中，藥劑的終濃度為62.5 mg·L-1、125 mg·L-1、250 mg·L-1、500 mg·L-1、1 000 mg·L-1，混合均勻倒入培養(yǎng)皿制備含藥平板，同時以加入1 ml無菌水的培養(yǎng)基做對照，每個處理重復3次。用高溫滅菌的打孔器從活化的病菌菌落邊緣打取直徑為5 mm菌餅，用接種鏟將其倒置于含藥平板的中央，將所有培養(yǎng)皿置于25℃恒溫箱中黑暗培養(yǎng)。24 h后持續(xù)每天觀察菌落生長情況，用十字交叉法測量菌落生長直徑，直至對照菌落即將長滿整個培養(yǎng)皿，計算菌絲生長抑制率。抑制率(%)=(對照菌落直徑-處理菌落直徑)/對照菌落直徑×100%。

1.3 數(shù)據(jù)處理。用Microsoft Excel 2010軟件處理數(shù)據(jù)，將抑制百分率轉換成抑制幾率值，以濃度對數(shù)值為橫坐標，抑制幾率值為縱坐標，做回歸直線，得到毒力回歸方程，根據(jù)最小二乘法計算出有效中濃度(EC50)及相關系數(shù)R。用SPSS 20.0進行方差分析，顯著水平均為P＜0.05。

2 結果與分析

2.1 5種藥劑對蘋果斑點落葉病菌的抑制效果。由表1可知，30%戊唑醇對蘋果斑點落葉病菌抑制效果最好，5個濃度的抑菌率均在90%以上，各濃度之間差異不顯著，與對照相比均呈顯著性差異。在125 mg·L-1質量濃度下，抑制效果最好，抑菌率為91.79%，在500 mg·L-1質量濃度下，抑制效果最差，抑菌率為91.03%。氟硅唑對蘋果斑點落葉病菌有較好的抑制作用，在 125 mg·L-1、250 mg·L-1、500 mg·L-1和1 000 mg·L-1質量濃度下，抑菌率均在90%左右，在62.5 mg·L-1質量濃度下，抑制效果最差，抑菌率僅為69.94%，各濃度之間差異不顯著，與對照相比均呈顯著性差異。12%戊唑·30%多菌靈對蘋果斑點落葉病菌也有較好的抑制作用，在250 mg·L-1質量濃度下，抑制效果最好，抑菌率為90.51%，62.5 mg·L-1質量濃度下，抑制效果最差，抑菌率也達到87.07%，各濃度之間差異不顯著，與對照相比均呈顯著性差異。20%吡唑醚菌酯對蘋果斑點落葉病菌有一定的抑制作用，在62.5 mg·L-1質量濃度下，抑制效果最好，抑菌率達73.21%，在250 mg·L-1質量濃度下，抑制效果最差，抑菌率僅為48.51%，各濃度之間差異不顯著，與對照相比均呈顯著性差異。菌清對蘋果斑點落葉病菌的抑制作用較差，在125 mg·L-1質量濃度下，抑制效果最好，抑菌率僅為53.85%，與其他濃度和對照相比呈顯著性差異，其他各濃度與對照之間差異不顯著。

表1 5種化學藥劑對蘋果斑點落葉病菌菌絲生長的毒力測定

2.2 5種藥劑對蘋果斑點落葉病菌的毒力測定。20%吡唑醚菌酯、氟硅唑、12%戊唑·30%多菌靈、菌清、30%戊唑醇的 EC50分別為 0.0040 mg·L-1、0.5530 mg·L-1、5.0597 mg·L-1、10.094 mg·L-1、5.0153 mg·L-1，其中20%吡唑醚菌酯對蘋果斑點落葉病菌的毒性最強，但是相關系數(shù)較低，菌清對蘋果斑點落葉病菌的毒性最弱。

3 結論與討論

5種化學藥劑中，30%戊唑醇的抑制效果最好，其次是氟硅唑和12%戊唑·30%多菌靈，然后是20%吡唑醚菌酯，菌清抑制效果最差。30%戊唑醇的抑制效果最好，不同濃度的抑制率均在90%以上，且抑制率差異不大。12%戊唑·30%多菌靈的抑制效果僅次于30%戊唑醇，所有濃度的抑制率都在87%以上，不同濃度的抑制率差異不大。氟硅唑在62.5 mg·L-1時與其他濃度相比抑制效果最差。除菌清外其它4種化學藥劑對蘋果斑點落葉病菌菌絲生長均有較好的抑制作用，為下一步防效測定奠定了理論基礎。