于占晶

（衡水學(xué)院生命科學(xué)系 河北 衡水 053000）

蘋果斑點落葉病作為蘋果的四大病害之一，是由蘋果鏈格孢菌侵染而引起的一種早期落葉病[1]。該病以菌絲體在落葉、芽的鱗片及病枝上越冬，在第2年的春天，病斑上會產(chǎn)生新的孢子，通過風(fēng)雨傳播，侵染新生葉片[2]。20世紀(jì)70年代，蘋果斑點落葉病在中國開始流行[3]，許多蘋果園的病害率超過90%，落葉率為20%～80%，嚴(yán)重影響樹木健康和產(chǎn)量[4]，給果農(nóng)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前，生產(chǎn)上有物理防治、生物防治和化學(xué)防治這3種防治方法[5]。我國蘋果斑點落葉病的防治還是以化學(xué)防治為最主要的手段，同時結(jié)合其他措施[6]。本研究旨在從諸多化學(xué)藥劑中有針對性地篩選出對病原菌拮抗效果好的藥劑，從而為進(jìn)一步的田間防效測定打下基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試藥劑。選用20%吡唑醚菌酯懸浮劑(利民化工股份有限公司)、氟硅唑乳油(青島星牌作物科學(xué)有限公司)、12%戊唑·30%多菌靈懸浮劑(青島星牌作物科學(xué)有限公司)、菌清懸浮劑(現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)轉(zhuǎn)化基地)、30%戊唑醇懸浮劑(青島星牌作物科學(xué)有限公司)5種藥劑進(jìn)行試驗。

1.1.2 供試菌株。蘋果斑點落葉病菌(A.alternata f.sp.mali)，由衡水學(xué)院園林植物實驗學(xué)實驗室保存并提供。

1.2 試驗方法。5種化學(xué)藥劑對病原菌菌絲生長的毒力測定采用菌絲生長速率法，分別取1 ml化學(xué)藥劑加進(jìn)到滅菌的冷卻至40℃～50℃的99 ml的PDA培養(yǎng)基中，藥劑的終濃度為62.5 mg·L-1、125 mg·L-1、250 mg·L-1、500 mg·L-1、1 000 mg·L-1，混合均勻倒入培養(yǎng)皿制備含藥平板，同時以加入1 ml無菌水的培養(yǎng)基做對照，每個處理重復(fù)3次。用高溫滅菌的打孔器從活化的病菌菌落邊緣打取直徑為5 mm菌餅，用接種鏟將其倒置于含藥平板的中央，將所有培養(yǎng)皿置于25℃恒溫箱中黑暗培養(yǎng)。24 h后持續(xù)每天觀察菌落生長情況，用十字交叉法測量菌落生長直徑，直至對照菌落即將長滿整個培養(yǎng)皿，計算菌絲生長抑制率。抑制率(%)=(對照菌落直徑-處理菌落直徑)/對照菌落直徑×100%。

1.3 數(shù)據(jù)處理。用Microsoft Excel 2010軟件處理數(shù)據(jù)，將抑制百分率轉(zhuǎn)換成抑制幾率值，以濃度對數(shù)值為橫坐標(biāo)，抑制幾率值為縱坐標(biāo)，做回歸直線，得到毒力回歸方程，根據(jù)最小二乘法計算出有效中濃度(EC50)及相關(guān)系數(shù)R。用SPSS 20.0進(jìn)行方差分析，顯著水平均為P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 5種藥劑對蘋果斑點落葉病菌的抑制效果。由表1可知，30%戊唑醇對蘋果斑點落葉病菌抑制效果最好，5個濃度的抑菌率均在90%以上，各濃度之間差異不顯著，與對照相比均呈顯著性差異。在125 mg·L-1質(zhì)量濃度下，抑制效果最好，抑菌率為91.79%，在500 mg·L-1質(zhì)量濃度下，抑制效果最差，抑菌率為91.03%。氟硅唑?qū)μO果斑點落葉病菌有較好的抑制作用，在 125 mg·L-1、250 mg·L-1、500 mg·L-1和1 000 mg·L-1質(zhì)量濃度下，抑菌率均在90%左右，在62.5 mg·L-1質(zhì)量濃度下，抑制效果最差，抑菌率僅為69.94%，各濃度之間差異不顯著，與對照相比均呈顯著性差異。12%戊唑·30%多菌靈對蘋果斑點落葉病菌也有較好的抑制作用，在250 mg·L-1質(zhì)量濃度下，抑制效果最好，抑菌率為90.51%，62.5 mg·L-1質(zhì)量濃度下，抑制效果最差，抑菌率也達(dá)到87.07%，各濃度之間差異不顯著，與對照相比均呈顯著性差異。20%吡唑醚菌酯對蘋果斑點落葉病菌有一定的抑制作用，在62.5 mg·L-1質(zhì)量濃度下，抑制效果最好，抑菌率達(dá)73.21%，在250 mg·L-1質(zhì)量濃度下，抑制效果最差，抑菌率僅為48.51%，各濃度之間差異不顯著，與對照相比均呈顯著性差異。菌清對蘋果斑點落葉病菌的抑制作用較差，在125 mg·L-1質(zhì)量濃度下，抑制效果最好，抑菌率僅為53.85%，與其他濃度和對照相比呈顯著性差異，其他各濃度與對照之間差異不顯著。

表1 5種化學(xué)藥劑對蘋果斑點落葉病菌菌絲生長的毒力測定

2.2 5種藥劑對蘋果斑點落葉病菌的毒力測定。20%吡唑醚菌酯、氟硅唑、12%戊唑·30%多菌靈、菌清、30%戊唑醇的 EC50分別為 0.0040 mg·L-1、0.5530 mg·L-1、5.0597 mg·L-1、10.094 mg·L-1、5.0153 mg·L-1，其中20%吡唑醚菌酯對蘋果斑點落葉病菌的毒性最強，但是相關(guān)系數(shù)較低，菌清對蘋果斑點落葉病菌的毒性最弱。

3 結(jié)論與討論

5種化學(xué)藥劑中，30%戊唑醇的抑制效果最好，其次是氟硅唑和12%戊唑·30%多菌靈，然后是20%吡唑醚菌酯，菌清抑制效果最差。30%戊唑醇的抑制效果最好，不同濃度的抑制率均在90%以上，且抑制率差異不大。12%戊唑·30%多菌靈的抑制效果僅次于30%戊唑醇，所有濃度的抑制率都在87%以上，不同濃度的抑制率差異不大。氟硅唑在62.5 mg·L-1時與其他濃度相比抑制效果最差。除菌清外其它4種化學(xué)藥劑對蘋果斑點落葉病菌菌絲生長均有較好的抑制作用，為下一步防效測定奠定了理論基礎(chǔ)。