王笛 梅金紅 汪露祥

【摘 要】 目的：探討胰島素樣生長因子 Ⅱ mRNA 結(jié)合蛋白 3 （IMP3）在膀胱尿路上皮腫瘤中的表達(dá)及其臨床意義。方法：選取黃山市人民醫(yī)院病理科2010年1月-2017年6月于行膀胱尿路上皮活檢或手術(shù)切除的標(biāo)本，其中尿路上皮乳頭狀瘤25例、非浸潤性尿路上皮癌25例、浸潤性尿路上皮癌50例。 采用免疫組化 SP法分別檢測 IMP3 蛋白在各尿路上皮腫瘤中的表達(dá)。 結(jié)果：IMP3 的表達(dá)在不同尿路上皮病變中兩兩比較，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），IMP3與浸潤性尿路上皮癌的分級(jí)、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有相關(guān)性。 結(jié)論： IMP3蛋白陽性表達(dá)可以作為判斷尿路上皮腫瘤病變進(jìn)展的重要分子事件。

【關(guān)鍵詞】 膀胱尿路上皮癌;IMP3;免疫組化

【中圖分類號(hào)】 R737 ? ?【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A ? ?【文章編號(hào)】1005-0019（2019）19-020-02 ?在我國，膀胱癌是一種最為頻發(fā)的泌尿生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，特別是在男性群體中易發(fā)、高發(fā)，其發(fā)病率和死亡率在泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤中一直位居首位。有臨床研究表明，膀胱尿路上皮癌患者數(shù)量已達(dá)膀胱癌患者總數(shù)的90%以上，是目前最為常見的膀胱癌病理類型。研究表明，胰島素樣生長因子ⅡmRNA 結(jié)合蛋白3（insulinlike growth factor Ⅱ messenger RNA binding proteins3，IMP3）是一個(gè)癌胚蛋白，在膀胱尿路上皮癌、肺癌、子宮頸原位腺癌、肝癌、胰腺癌和子宮內(nèi)膜漿液性癌，以及許多類型的腫瘤組織中呈高表達(dá)[1-3]。近年來，又有研究表明，IMP3蛋白可以用作膀胱UC的獨(dú)立不良預(yù)后指標(biāo)[1]。Lioudmila Sitnikov[4]等發(fā)現(xiàn)，IMP3在膀胱尿路上皮增生發(fā)展為尿路上皮癌的過程中起著非常關(guān)鍵的作用。眾多研究認(rèn)為，IMP3作為一種獨(dú)立的且能指導(dǎo)預(yù)后的標(biāo)志，可以用于確定有發(fā)展為浸潤性尿路上皮癌風(fēng)險(xiǎn)的尿路上皮早期病變患者的初步診斷，但目前，其在浸潤性癌的早期病變發(fā)展為浸潤性癌這一過程中的相關(guān)作用機(jī)制還未有任何結(jié)論。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將黃山市人民醫(yī)院病理科2010年1月-2017年6月行膀胱尿路上皮活檢或手術(shù)切除的標(biāo)本進(jìn)行再診斷、再分類，選出100例（患者年齡19-80歲，中位年齡41.9歲），所有患者術(shù)前均未行放療或化療，術(shù)后結(jié)果均經(jīng)病理證實(shí)，包括尿路上皮乳頭狀瘤25例、非浸潤性尿路上皮癌25例、浸潤性尿路上皮癌50例。

1.2 主要試劑 IMP3單克隆抗體（工作濃度1：200）購于羅氏診斷產(chǎn)品有限公司

1.3 染色方法 采用免疫組化 SP 法進(jìn)行染色，操作步驟按試劑盒說明書進(jìn)行，抗原修復(fù)采用高壓鍋高溫修復(fù)，用已知陽性乳腺癌組織切片作為陽性對(duì)照，用PBS 代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.4 結(jié)果判定 IMP3 結(jié)果判定： IMP3蛋白陽性信號(hào)均定位于細(xì)胞質(zhì)中，陽性細(xì)胞在胞質(zhì)內(nèi)染成棕黃色顆粒。半定量積分法用于判定染色結(jié)果，每張切片隨機(jī)選擇具有代表性的5個(gè)高倍鏡視野進(jìn)行觀察，每個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)腫瘤細(xì)胞。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本課題研究運(yùn)用了SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，對(duì)所收集到的所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)， P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 IMP3在不同尿路上皮病變中的表達(dá) IMP3蛋白在三組尿路上皮腫瘤中的陽性表達(dá)率為36%（9/25）、84%（21/25）、90%（45/50）。經(jīng)過對(duì)比發(fā)現(xiàn)，IMP3蛋白在浸潤性尿路上皮癌中的陽性表達(dá)率最高，通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出，IMP3蛋白的陽性表達(dá)率在三組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。

2.4 IMP3與浸潤性尿路上皮癌病理特征之間的關(guān)系 IMP3表達(dá)和與腫瘤分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期有關(guān)，差異有顯著性（P 均 <0. 05）。

3 討論

根據(jù)WHO對(duì)膀胱腫瘤的最新分型，膀胱尿路上皮癌是從非浸潤性到浸潤性連續(xù)發(fā)展的，其變化具有漸進(jìn)性，并且具有動(dòng)態(tài)變化的特征。IMP3 （Insulin-like growth factorⅡm RNA-binding protein 3）是胰島素樣生長因子Ⅱm RNA 結(jié)合蛋白家族（IMP1-3）中的一個(gè)成員[5]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，IMP3蛋白在三組尿路上皮腫瘤中的陽性表達(dá)率為36%（9/25）、84%（21/25）、90%（45/50）。經(jīng)過對(duì)比發(fā)現(xiàn)，IMP3蛋白在浸潤性尿路上皮癌中的陽性表達(dá)率最高，通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出，IMP3蛋白的陽性表達(dá)率在三組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05（見表1）。在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，IMP3蛋白在尿路上皮良性病變中多呈現(xiàn)不表達(dá)或弱陽性表達(dá)，隨著病情的進(jìn)一步加重，在發(fā)展為浸潤性尿路上皮癌的過程，IMP3的陽性表達(dá)率呈現(xiàn)和疾病發(fā)展的連續(xù)性相符的情況，表明從尿路上皮低度病變發(fā)展為浸潤性癌過程中，IMP3蛋白起著直觀且重要的作用，因此可以推測，IMP3蛋白作為一種，可以預(yù)測尿路上皮良性腫瘤發(fā)展為浸潤癌最為理想的分子標(biāo)志物，可用來幫助臨床預(yù)測那些，具有發(fā)展為浸潤性尿路上皮癌風(fēng)險(xiǎn)的病變的初步判斷。

本實(shí)驗(yàn)同時(shí)對(duì)IMP3蛋白與浸潤性尿路上皮癌，在臨床上的幾個(gè)重要預(yù)后因素的關(guān)系進(jìn)行了分析，IMP3表達(dá)和與腫瘤分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期有關(guān)，差異具有顯著性（見表2）。因此可以推斷，IMP3蛋白在腫瘤中表達(dá)陽性，提示了腫瘤的預(yù)后不良，提示了IMP3可能促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的生長分化，同時(shí)參與了腫瘤細(xì)胞通過淋巴、血液侵襲轉(zhuǎn)移的過程，其可以作為臨床對(duì)尿路上皮癌預(yù)后進(jìn)行分析研判的重要指標(biāo)。

總之，本課題研究表明，IMP3蛋白可能成為，預(yù)測尿路上皮良性腫瘤、非浸潤性尿路上皮癌發(fā)展為浸潤性尿路上皮癌的，最理想的分子檢測標(biāo)志物之一。

參考文獻(xiàn)

[1] Sitnikova L， Mendese G， Liu Q， et al. IMP3 predicts aggressive superficial urothelial carcinoma of the bladder[J]. Clin Cancer Res， 2008， 14（6）：1701-1706.

[2] Jiang Z.Prognostic biomarkers in renal cell carcinoma[J]. Expert Rev Mol Diagn，2007，7（3） ： 293 - 307.

[3] Zheng W，Yi X，F(xiàn)adare O，et al.The oncofetal protein IMP3： anovel biomarker for endometrial serous carcinoma[J].Am J Surg Pathol，2008，32（2） ： 304 - 15.

[4] Lioudmila Sitnikova，1GaryMendese，2 Qin Liu，3 BruceA.Woda，2 Di Lu，2 Karen Dresser，et，al.IMP3 Predicts Aggressive Superficial Urothelial Carcinoma of the Bladder[J].Clin Cancer Res 2008;14（6）March15， 2008，1701-1706.

[5] Edwards J G，Cox G，Andi A，et al. Angiogenesis is an independent prognostic factor in malignant mesothelioma[J].British J Cancer，2001，8 5（6） ： 863-8.