糖尿病是臨床常見(jiàn)病，近年來(lái)2型糖尿病發(fā)病率逐年升高，高血糖狀態(tài)使機(jī)體的多器官受累，器官功能代謝紊亂，常合并冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、腦血管動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病腎病等較多并發(fā)癥[1]?？刂蒲鞘茄泳徏膊∵M(jìn)展，提高生活質(zhì)量的關(guān)鍵，中藥桑枝多糖是從桑枝提取的主要成分[2]。有研究表明，桑枝多糖在降低血糖、抑制炎癥反應(yīng)、調(diào)節(jié)免疫力、抗氧化作用、祛風(fēng)活絡(luò)等方面具有顯著功效，臨床應(yīng)用較廣泛[3]。本研究以2型糖尿病大鼠模型觀察桑枝多糖灌胃治療后，大鼠心肌相關(guān)酶學(xué)、腎功能、血管內(nèi)皮細(xì)胞、炎癥因子的變化，為桑枝多糖臨床治療提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模與分組 選取清潔級(jí)Wistar大鼠60只，體重250～280 g，雌雄各半，由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)提供，許可證號(hào)：SCKN-LN2016-0008，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為4組：對(duì)照組、模型組、桑枝多糖組、格列本脲組，各15只。對(duì)照組普通飼料喂養(yǎng)，其余3組腹腔注射鏈尿佐菌素25 mg/kg，間隔3 d重復(fù)注射1次，造模結(jié)束后第3天空腹采集大鼠尾靜脈血，血糖≥16.7 mmol/L表明2型糖尿病大鼠造模成功。造模后，對(duì)照組和模型組正常喂養(yǎng)，桑枝多糖組給予120 mg/kg灌胃，每日1次，格列本脲組給予250 mg/kg灌胃，每日1次，均連續(xù)灌胃4周。

1.2 桑枝多糖液制作 將桑枝多糖粉混入80%乙醇中，配制成1∶10的溶液，經(jīng)過(guò)提取、過(guò)濾、濃縮、萃取、過(guò)率、洗滌等操作步驟，制成桑枝多糖溶液，其生藥濃度為0.9 g/mL，放入冰箱冷藏備用。

1.3 藥品與試劑 格列本脲片(天津太平洋制藥公司，批號(hào)H12020790)，鏈尿佐菌素(美國(guó)Sigma公司)，內(nèi)皮素-1(ET-1)試劑盒(南京建成生物公司)，一氧化氮(NO)試劑盒(南京建成生物公司)，超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒(南京建成生物公司)，丙二醇(MDA)試劑盒(南京建成生物公司)，谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)試劑盒(南京建成生物公司)。羅氏血糖儀(ACCU-CHEK公司)，全自動(dòng)生化儀(德國(guó)羅氏生產(chǎn))。

1.4 觀察指標(biāo) 采用全自動(dòng)生化儀分別檢測(cè)血清中空腹血糖(FBG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)，參照試劑盒說(shuō)明檢測(cè)血清中ET-1、NO水平。進(jìn)行腎功能的相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)：血清中尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿量、24 h尿蛋白含量。進(jìn)行心肌功能相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)：血清肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量。取大鼠腎臟組織，參照試劑盒說(shuō)明檢測(cè)腎組織中SOD、MDA、GSH-Px含量。

2 結(jié) 果

2.1 桑枝多糖對(duì)大鼠血清FBG、HbA1c、ET-1、NO的影響 模型組血清中FBG、HbA1c、ET-1均明顯高于對(duì)照組，NO低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。桑枝多糖組和格列本脲組血清中FBG、HbA1c、ET-1均低于模型組，NO高于模型組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。桑枝多糖組血清中FBG、HbA1c、ET-1均明顯低于格列本脲組，NO高于格列本脲組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠血清中FBG、HbA1c、ET-1、NO比較(±s)

與對(duì)照組比較，1)P<0.05；與模型組比較，2)P<0.05；與桑枝多糖組比較；3)P<0.05

2.2 桑枝多糖對(duì)大鼠BUN、Scr、尿量、24 h尿蛋白的影響 模型組BUN、Scr、尿量、24 h尿蛋白均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。桑枝多糖組和格列本脲組BUN、Scr、尿量、24 h尿蛋白均低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。桑枝多糖組BUN、Scr、尿量、24 h尿蛋白均低于格列本脲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠BUN、Scr、尿量、24 h尿蛋白比較(±s)

與對(duì)照組比較，1)P<0.05；與模型組比較，2)P<0.05；與桑枝多糖組比較，3)P<0.05

2.3 桑枝多糖對(duì)大鼠心肌酶的影響 模型組血清中CK、LDH、CK-MB均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。桑枝多糖組和格列本脲組血清中CK、LDH、CK-MB均低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。桑枝多糖組血清中CK、LDH、CK-MB均低于格列本脲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表3。

表3 各組大鼠心肌酶比較(±s)

與對(duì)照組比較，1)P<0.05；與模型組比較，2)P<0.05；與桑枝多糖組比較，3)P<0.05

2.4 桑枝多糖對(duì)腎組織中SOD、MDA、GSH-Px的影響 模型組腎組織中SOD、GSH-Px低于對(duì)照組，MDA高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。桑枝多糖組和格列本脲組腎組織中SOD、GSH-Px高于模型組，MDA低于模型組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。桑枝多糖組腎組織中SOD、GSH-Px明顯高于格列本脲組，MDA明顯低于格列本脲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表4。

表4 各組大鼠腎組織中SOD、MDA、GSH-Px比較(±s)

與對(duì)照組比較，1)P<0.05；與模型組比較，2)P<0.05；與桑枝多糖組比較，3)P<0.05

3 討 論

2型糖尿病病人長(zhǎng)期高血糖，常發(fā)生全身大血管病變、脂質(zhì)代謝紊亂、血管內(nèi)皮細(xì)胞代謝紊亂、內(nèi)皮細(xì)胞損傷等相關(guān)臟器損傷，尤其對(duì)心臟、腎臟、腦的損害最大[4]。糖尿病誘導(dǎo)機(jī)體多器官代謝紊亂的機(jī)制與血管內(nèi)皮功能紊亂、炎癥反應(yīng)等因素密切相關(guān)[5]。ET-1、NO是控制血管內(nèi)皮細(xì)胞收縮、舒張的主要因子，二者分泌量平衡，則血管收縮、舒張功能正常，若發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，則ET-1分泌量增多，NO分泌量減少，誘導(dǎo)血管內(nèi)炎癥反應(yīng)，出現(xiàn)血管內(nèi)皮損傷，加速動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，引發(fā)多種并發(fā)癥[6-7]。桑枝多糖在古代醫(yī)學(xué)《本草再新》中就有記載，桑枝具有降血糖、養(yǎng)津液、抗氧化、祛風(fēng)行水、滋腎水等功效，多糖是桑枝中活性成分。有研究表明，桑枝多糖能夠提高機(jī)體抗氧化能力，增加胰島素的敏感性，促進(jìn)胰島β細(xì)胞數(shù)目增多，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力等，進(jìn)而降低血糖[8-9]。SOD能夠清除氧自由基，MDA是發(fā)生過(guò)氧化反應(yīng)后的產(chǎn)物，GSH-Px是抑制過(guò)氧化反應(yīng)的酶，三者反映機(jī)體抗氧化應(yīng)激的能力[10]。

本研究結(jié)果顯示，2型糖尿病大鼠造模后，模型組血清中FBG、HbA1c、ET-1均明顯高于對(duì)照組，NO低于對(duì)照組，表明造模成功。本研究結(jié)果還顯示，桑枝多糖組血清中FBG、HbA1c、ET-1均低于格列本脲組，NO高于格列本脲組；桑枝多糖組BUN、Scr、尿量、24 h尿蛋白均低于格列本脲組；桑枝多糖組血清中CK、LDH、CK-MB均低于格列本脲組；桑枝多糖組腎組織中SOD、GSH-Px高于格列本脲組，MDA低于格列本脲組。表明桑枝多糖對(duì)大鼠的血糖控制優(yōu)于格列本脲，桑枝多糖明顯改善了大鼠心肌相關(guān)酶、腎功能，減輕了血管內(nèi)皮炎癥反應(yīng)，抗氧化能力均優(yōu)于格列本脲。該結(jié)果與郭福團(tuán)等[11]的報(bào)道結(jié)果一致。有研究證實(shí)，腎臟損傷的嚴(yán)重程度與尿蛋白的排泄率呈正相關(guān)，桑枝多糖能夠明顯降低尿蛋白排泄率，延緩腎功能損害。

綜上所述，桑枝多糖治療2型糖尿病大鼠后血糖明顯降低，心肌功能明顯改善，尿蛋白排泄率明顯減少，保護(hù)了腎功能，改善血管內(nèi)皮細(xì)胞的代謝，抑制過(guò)氧化反應(yīng)，保護(hù)心肌及腎功能。