亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        熒光定量技術(shù)檢測牛奶中四環(huán)素類藥物殘留準(zhǔn)確性的研究與探討

        2019-11-07 03:35:46鄭君杰孫志偉盧春香
        中國乳業(yè) 2019年10期
        關(guān)鍵詞:檢測

        文/賈 濤 方 芳 鄭君杰 孫志偉 盧春香

        (北京市飼料監(jiān)察所)

        四環(huán)素類藥物包含四環(huán)素、金霉素、土霉素、強力霉素,為廣譜抗生素,主要用于治療奶牛立克次氏體、衣原體、支原體等致病微生物感染病癥,多為添加在飼料和飲用水中使用或注射使用。奶牛用藥后,四環(huán)素類藥物會殘留在牛奶中,對人類健康造成危害,尤其是對嬰幼兒的身體健康危害更為突出,其危害主要表現(xiàn)在對嬰幼兒的肝臟、腎臟、牙齒與骨骼等方面的影響。因此,牛奶中四環(huán)素類藥物的快速檢測尤為重要,本試驗利用熒光定量技術(shù)檢測牛奶中四環(huán)素類藥物殘留,并與儀器法比較,以研究其準(zhǔn)確性。

        1 材料與儀器

        1.1 試驗材料

        四環(huán)素類熒光定量檢測卡。

        1.2 儀器

        移液器(移液槍)、計時器、熒光免疫定量分析儀(型號:FQ-S1)。

        2 檢測方法

        2.1 檢測原理

        采用競爭性免疫熒光層析法檢測目標(biāo)物的殘留濃度,熒光標(biāo)記的抗體預(yù)先包被在釋放墊上。當(dāng)待測樣品滴加在加樣區(qū)時,樣品中的目標(biāo)物在毛細滲移的過程中,與熒光標(biāo)記的特異性單克隆抗體結(jié)合,抑制了抗體與T區(qū)包被抗原的結(jié)合,使T區(qū)熒光減弱,利用免疫熒光定量分析儀讀取T線與C線位置的熒光強度,通過儀器內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出樣品中靶標(biāo)物質(zhì)的含量。

        2.2 樣品制備

        空白樣品:生鮮乳(牛奶),在檢測時提前恢復(fù)至室溫,并充分搖勻樣品(奶樣不能有結(jié)塊、酸味或沉淀等性狀)。

        添加樣品:向空白樣品加入四環(huán)素類標(biāo)準(zhǔn)品至所需濃度。

        2.3 最低檢測限的測定

        取20 份空白生鮮乳樣品,打開鋁箔袋,取所需量的金標(biāo)微孔和試紙條,做好標(biāo)記,并置于桌面上(取出所需微孔和檢測卡,立即密封鋁箔袋,以防受潮);吸取200 μL樣本液于金標(biāo)微孔中,小心吹打至孔底的紫紅色顆粒完全溶解(注意吹打時動作要輕柔,避免產(chǎn)生氣泡),室溫(25±2)℃孵育3 min;取120 μL金標(biāo)微孔中樣品加入到加樣孔中,并開始計時,準(zhǔn)確反應(yīng)10 min后,插入熒光定量分析儀讀數(shù)。計算其平均值,再加上3倍標(biāo)準(zhǔn)差,即為最低檢測限。

        表1 空白樣品添加濃度

        表2 空白生鮮乳樣品四環(huán)素類含量測定結(jié)果

        2.4 準(zhǔn)確度和精密度的測定

        采用3 個批次四環(huán)素類熒光定量快速檢測卡,對添加四環(huán)素類藥物的生鮮乳樣品進行測定。樣品添加藥物濃度為對應(yīng)的最低檢測限(Limit of Detection,LOD)和2倍LOD(表1),每個添加濃度做5個平行,計算樣品添加回收率和批內(nèi)、批間的變異系數(shù)。

        2.5 與儀器方法進行比較

        采用四環(huán)素類熒光定量檢測卡和儀器法,分別對50 份生鮮乳盲樣進行測定,比較測定結(jié)果。儀器方法按照GB/T 22990—2008《牛奶和奶粉中土霉素、四環(huán)素、金霉素、強力霉素殘留量的測定液相色譜-紫外檢測法》中所述的檢測方法進行操作。

        3 試驗結(jié)果

        3.1 最低檢測限的測定

        取20 份空白生鮮乳樣品,按照四環(huán)素類熒光定量檢測卡的操作說明書方法進行檢測,計算其平均值,再加上3 倍標(biāo)準(zhǔn)差,即為最低檢測限(表2)。

        結(jié)果表明,以四環(huán)素為對照物建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,得出該藥物的最低檢出限為4.93 μg/L,為保障產(chǎn)品的穩(wěn)定性,可認為四環(huán)素類熒光定量檢測卡在生鮮乳中的檢測限為5.00 μg/L。

        3.2 準(zhǔn)確度和精密度

        準(zhǔn)確度是指測定值與真實值的符合程度,按2.4中的步驟操作,結(jié)果見表3。結(jié)果表明,所有樣品各添加濃度的回收率均在84.60%~113.94%。各添加濃度的批內(nèi)、批間變異系數(shù)均低于15.00%。

        3.3 與儀器方法比較

        采用該四環(huán)素類熒光定量檢測卡和儀器法,分別對50 份生鮮乳盲樣進行測定,比較測定結(jié)果,以檢測限作為陰、陽性判定值,小于四環(huán)素類熒光定量檢測卡檢測限的檢測結(jié)果記為“-”,儀器結(jié)果記為“ND”,大于四環(huán)素類熒光定量檢測卡檢測限,以實際檢測值表示(表4)。結(jié)果顯示,二者的符合率為100%。

        4 分析與討論

        為評價本試驗研制的四環(huán)素類免疫熒光定量檢測卡的可靠性,采用空白樣本進行回收率試驗,分別從檢出限、準(zhǔn)確度、精密度和與儀器方法比較等4 個方面進行驗證。

        4.1 最低檢測限

        取20 份空白樣本進行檢測,檢測信號值,并通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得出待測物濃度,計算各對應(yīng)濃度值的標(biāo)準(zhǔn)差,由平均值加3 倍標(biāo)準(zhǔn)差即為該樣本的最低檢測限。經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn),四環(huán)素類熒光定量檢測卡在生鮮乳中的檢測限為5.00 μg/L。

        4.2 精密度與準(zhǔn)確度

        選取空白樣本,添加各藥物檢測限濃度標(biāo)準(zhǔn)品并檢測,每個濃度重復(fù)驗證10 次,并統(tǒng)計添加回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。用3 個批次熒光定量檢測系統(tǒng),對空白添加樣品進行測定,每種樣品的添加濃度為LOD和2LOD,每個添加濃度做5 個平行,計算樣品的添加回收率和批內(nèi)、批間變異系數(shù)。經(jīng)試驗,所有樣品各添加濃度的回收率均在84.60%~113.94%,各添加濃度的批內(nèi)、批間變異系數(shù)均低于15.00%。

        表3 準(zhǔn)確度和精密度

        表4 與儀器方法比較結(jié)果 單位:μg/L

        4.3 與儀器方法進行比較

        本試驗研制的熒光定量檢測卡和儀器法分別對50 份生鮮乳盲樣進行測定,比較測定結(jié)果。儀器方法根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定進行操作,結(jié)果顯示,通過對盲樣的測定,四環(huán)素類熒光定量檢測卡和儀器法的陽性符合率為100.00%。

        猜你喜歡
        檢測
        QC 檢測
        “不等式”檢測題
        “一元一次不等式”檢測題
        “一元一次不等式組”檢測題
        “幾何圖形”檢測題
        “角”檢測題
        “有理數(shù)的乘除法”檢測題
        “有理數(shù)”檢測題
        “角”檢測題
        “幾何圖形”檢測題
        国产美女遭强高潮网站| 亚洲第一女人av| 少女韩国电视剧在线观看完整| 精品午夜福利在线观看| 午夜精品久久久久久| 亚洲午夜无码久久yy6080| 中文字幕有码高清| 色婷婷精品午夜在线播放| 麻豆网神马久久人鬼片| 人妻无码一区二区三区四区| 亚洲国产欧美久久香综合| 青青草在线免费观看在线| av无码电影一区二区三区| 亚洲av片一区二区三区| 无码的精品免费不卡在线| 日韩精品夜色二区91久久久 | 三年在线观看免费大全下载| 久久综合精品国产丝袜长腿 | 丰满五十六十老熟女hd| 亚洲a∨好看av高清在线观看| 综合亚洲二区三区四区在线 | 日韩av无码一区二区三区不卡| 蜜桃av噜噜一区二区三区| 国产亚洲美女精品久久久2020| 亚洲av乱码一区二区三区人人| 99精品国产在热久久无码| 欧美一级欧美一级在线播放| 亚洲av一二三又爽又爽又色| 人妻少妇中文字幕在线观看| 亚洲av无码专区在线观看成人| 一本无码人妻在中文字幕免费| 婷婷色国产精品视频一区| 日本一区二区三级免费| 7777色鬼xxxx欧美色妇| 亚洲欧洲日本综合aⅴ在线| 久久婷婷国产精品香蕉| 91盗摄偷拍一区二区三区| 国产做无码视频在线观看| 国产第19页精品| 久久99久久99精品免观看不卡| 国产激情一区二区三区成人|