武寅 王斯崢 杜娟 錢國平 周洲

摘要采用冷浸提方法代替索氏抽提法（GB 5009.229—2016）提取大豆中的粗脂肪，經(jīng)過濾后蒸干殘留的溶劑，再測定酸值。比較2種試驗(yàn)方法顯示，冷浸提法檢測結(jié)果與GB 5009.229—2016檢測結(jié)果的相對相差為5.7%～12.4%，符合精密度要求，可節(jié)約檢測時(shí)間6 h，場地占用少，操作方便，檢測成本較低。

關(guān)鍵詞冷浸提法;索氏抽提法;大豆;粗脂肪酸值;石油醚

中圖分類號(hào)TS?207文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A

文章編號(hào)0517-6611（2019）18-0215-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.18.060

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Detecting Crude Fatty Acid Value of Soybean by Cold Extraction Instead of Soxhlet Extraction

WU Yin1，WANG Si-zheng2，DU Juan2 et al（1.Sinograin Zhenjiang Grains & OiLs Quality Testing Center Co.，Ltd.，Zhenjiang，Jiangsu 212006;2.Sinograin Oils and Fats Co.，Ltd.，Beijing 100043）

AbstractExtracting crude fat from soybean by cold extraction method instead of Soxhlet extraction（GB 5009.229-2016），after filtration， the residual solvent was evaporated and the acid value was measured. The comparison between the two experimental methods showed that the relative difference between the test results of cold leaching and GB 5009.229-2016 was 5.7% - 12.4%，the result met the precision requirements，the detection time can be saved for 6 hours， the site occupancy was small， and the operation cost was low.

Key wordsCold extraction method;Soxhlet extraction method;Soybean;Crude fatty acid value;Petroleum ether

大豆是我國主要的糧食作物之一，其中含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪和膳食纖維等營養(yǎng)成分，營養(yǎng)價(jià)值很高，被稱為“豆中之王”“綠色的牛乳”，是廣受營養(yǎng)學(xué)家推崇的食物;同時(shí)大豆也是我國的一個(gè)非常重要的油料作物，由大豆加工生產(chǎn)的豆油以其物美價(jià)廉的特點(diǎn)成為我國人民餐桌上最主要的食用油之一[1]。它是人體不飽和脂肪酸的重要來源，能起到降低膽固醇的作用，對高血壓、心血管疾病也有輔助治療?功效[2]。

由于大豆富含蛋白質(zhì)和脂肪，因此在儲(chǔ)存過程中極易因?yàn)楸９懿簧?，出現(xiàn)吸濕生霉、發(fā)芽漲大、走油赤變、熱損碳化、氧化酸敗、腐敗變質(zhì)等不良現(xiàn)象[3]。大豆的粗脂肪酸值的結(jié)果是判斷大豆儲(chǔ)存品質(zhì)的一個(gè)非常重要的指標(biāo)。GB/T 31785—2015 《大豆儲(chǔ)存品質(zhì)判定規(guī)則》中推薦先用GB/T 14488.1—2008提取粗脂肪[4]，再按照GB 5009.229—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中酸價(jià)的測定》進(jìn)行酸值的測定。此方法檢測時(shí)間較長、步驟繁瑣，且抽提出足夠檢測的脂肪需要較多的索氏抽提器和水浴鍋，對實(shí)驗(yàn)室空間要求也較高[5]。因此，筆者考慮通過參考GB/T 5510—2011《糧油檢驗(yàn) 糧食、油料脂肪酸值測定》方法，采用冷溶劑浸泡加振蕩提取大豆粉中的脂肪，然后再按照GB 5009.229—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中酸價(jià)的測定》進(jìn)行酸值的測定。

1材料與方法

1.1原料

國產(chǎn)東北大豆、進(jìn)口阿根廷大豆、進(jìn)口巴西大豆 （預(yù)估樣品粗脂肪酸值檢測結(jié)果分別為<1.0 mg/g、1.0～?2.0 mg/g、>3.0 mg/g）[6]。

1.2試劑與材料

石油醚，沸點(diǎn)30～60 ℃，分析純;乙醚，分析純;異丙醇，分析純;脫脂棉;濾紙;KOH標(biāo)準(zhǔn)溶液，?0.1 mol/L;酚酞指示劑，10 g/L;濾紙筒和脫脂棉;無石油醚可溶物。

1.3儀器及器具

分析天平，感量0.001 g;平板式加熱器;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;保水磨;標(biāo)準(zhǔn)篩網(wǎng)，1.0 mm孔徑;電熱鼓風(fēng)干燥箱;水浴鍋;回流式抽提器;圓底燒瓶;微量滴定管，10 mL，最小刻度0.02 mL;錐形瓶（具塞），500 mL;錐形瓶，250 mL;康氏振蕩器;短頸玻璃漏斗，90 mL;恒溫水浴鍋;索氏抽提器，250 mL。

1.4樣品準(zhǔn)備

1.4.1扦樣、分樣。

按照GB 5491—1985《糧食、油料檢驗(yàn) 扦樣、分樣法》進(jìn)行，樣品應(yīng)具有代表性。

1.4.2樣品制備。

選擇合適的分樣器將樣品進(jìn)行縮分至約100 g，使用保水磨進(jìn)行粉碎，并通過1.0 mm的篩網(wǎng)，混勻，裝入磨口瓶或樣品袋中備用。

1.5試樣處理

1.5.1冷浸提前處理方法。

將粉碎后的樣品置于500 mL具塞錐形瓶中，加入石油醚使溶劑高出料層4～5 cm[7]，加塞搖動(dòng)幾秒鐘后，打開塞子放氣，再蓋緊瓶塞置于振蕩器上振搖?2 h，取下錐形瓶，靜置3～5 min，在玻璃漏斗上放入濾紙進(jìn)行過濾，棄去最初幾滴濾液，用潔凈的250 mL錐形瓶收集剩余全部濾液[8-9]。

收集濾液的錐形瓶使用加熱平板或旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀基本蒸干溶劑，再放入（103±2）℃電熱鼓風(fēng)干燥箱中烘干30～?60 min，確保溶劑和水分等易揮發(fā)物完全蒸干，取出冷卻至室溫，錐形瓶中的油樣即為待測大豆的粗脂肪樣品。

1.5.2索氏抽提前處理方法。

按照GB/T 14488.1—2008《植物油料 含油量測定》中第8、9步的方法進(jìn)行，獲得的油樣即為待測大豆的粗脂肪樣品。

1.6測定

稱取足量的油樣按照GB 5009.229—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中酸價(jià)的測定》第一法進(jìn)行酸值測定，記錄消耗的氫氧化鉀的體積V。

1.7結(jié)果表示

（1）粗脂肪酸值。按下式計(jì)算：

X?AV=[56.1×c×（V-V0）]/m（1）

式中，X?AV為酸值（mg/g）;V為油樣消耗KOH標(biāo)準(zhǔn)滴定液的體積（mL）;V0為空白消耗KOH標(biāo)準(zhǔn)滴定液的體積（mL）;

c為KOH標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度（mol/L）;m為油樣的稱樣量（g）;56.1為KOH的摩爾質(zhì)量（g/mol）。當(dāng)酸值≤1 mg/g，計(jì)算結(jié)果保留2位小數(shù);1 mg/g<酸值≤100 mg/g，計(jì)算結(jié)果保留1位小數(shù);酸值>100 mg/g，計(jì)算結(jié)果保留整數(shù)。

（2）精密度。

根據(jù)GB 5009.229—2006精密度要求：當(dāng)酸值<1 mg/g，在重復(fù)條件下獲得的2次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算數(shù)平均值的15%;當(dāng)酸值≥1 mg/g，在重復(fù)條件下獲得的2次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算數(shù)平均值的12%[10]。

2結(jié)果與分析

2.1冷浸提法試驗(yàn)重復(fù)性分析

選取國產(chǎn)東北大豆、進(jìn)口阿根廷大豆和進(jìn)口巴西大豆3種不同國別大豆，分別按照冷浸提法進(jìn)行8次粗脂肪酸值的重復(fù)性檢測試驗(yàn)，檢測結(jié)果如表1所示。按照冷浸提法測得3種不同國別大豆8次平行試驗(yàn)結(jié)果的變異系數(shù)符合GB/T 27404—2008《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》中附錄F中對于精密度的要求[11]，該方法變異程度較小，重復(fù)性良好。

2.22種檢測方法檢測結(jié)果比較

在國產(chǎn)東北大豆、進(jìn)口阿根廷大豆和進(jìn)口巴西大豆中每種分別選取3份大豆，分別按照GB/T 14488.1—2008方法抽提脂肪和冷浸提法抽提脂肪，再按照GB 5009.229—2016第一法進(jìn)行酸值的滴定，檢測結(jié)果如表2所示。由表2可知，冷浸提法檢測結(jié)果與GB/T 14488.1—2008方法抽提脂肪檢測結(jié)果的相對相差滿足GB 5009.229—2016精密度的要求，該方法可用于進(jìn)行大豆粗脂肪酸值的檢測。

2.32種測定方法的綜合因素比較

2.3.1檢測時(shí)間比較。

按照GB/T 14488.1—2008中規(guī)定的方法進(jìn)行檢測需要8 h以上，即使因?yàn)闄z測粗脂肪酸值不需要完全抽提出樣品中的全部粗脂肪，對方法進(jìn)行優(yōu)化，也需要至少2～4 h;而采用冷浸提法僅需振蕩浸泡2 h即可提取出樣品中70%～80%的脂肪[12]，極大地節(jié)約了檢測時(shí)間，明顯提高了檢測效率。

2.3.2使用儀器及場地條件比較。

按照GB/T 14488.1—2008中規(guī)定的方法進(jìn)行檢測需要使用水浴鍋、索氏抽提器等儀器裝置，如檢測用脂肪需20 g時(shí)，則需要至少8～10個(gè)索氏抽提器和水浴鍋孔位[13-14]，且試驗(yàn)均需要在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。而采用冷浸提法，無需使用索氏抽提器和水浴鍋，且由于瓶口密封，在振蕩浸提時(shí)也無需在通風(fēng)櫥中進(jìn)行，對環(huán)境條件和儀器設(shè)備的要求遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于GB/T 14488.1—2008的方法。以檢測10份大豆樣品為例，2種方法的使用儀器及場地比較如表3所示。

2.3.3消耗成本比較。

按照GB/T 14488.1—2008中規(guī)定的方法進(jìn)行檢測時(shí)，需消耗大量的自來水進(jìn)行冷凝，水浴鍋和通風(fēng)櫥也需要消耗較高的電量;而采用冷浸提法，使用試劑量基本一致，額外消耗了少量快速濾紙，但是在水電燃料成本上有了很大的節(jié)約，最終檢測成本的消耗上要遠(yuǎn)低于GB/T 14488.1—2008的方法（表4）。

3結(jié)論

該研究中介紹的大豆冷浸提粗脂肪酸值的檢測方法所測得的酸值結(jié)果的相對相差符合GB 5009.229—2016精密度要求，滿足結(jié)果準(zhǔn)確性的要求。該檢測方法適用于場地環(huán)境條件受限制情況下大批量樣品的檢測工作，在獲得與原國標(biāo)方法檢測結(jié)論一致的同時(shí)，極大地縮短了檢測時(shí)間，也節(jié)約了檢驗(yàn)儀器費(fèi)用和水電燃料費(fèi)用的消耗，同時(shí)對場地的要求相對較低，特別適合基層實(shí)驗(yàn)室使用，同時(shí)也符合國家節(jié)能減排、提質(zhì)增效、低碳環(huán)保的工作理念。

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