莫愁

摘要：中藥品質(zhì)是決定其臨床療效的關(guān)鍵，對其進行質(zhì)量控制是臨床應(yīng)用的前提。在傳統(tǒng)中醫(yī)藥為全世界做出更大貢獻的同時，一些質(zhì)量問題仍在影響其健康發(fā)展。例如中成藥慘假、夾雜及含有受保護動物制品，飲片形式多種多樣而無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，中藥材質(zhì)量參差不齊等。針對W上問題，我們從生產(chǎn)實際出發(fā)，期望通過相關(guān)環(huán)節(jié)質(zhì)量控制技術(shù)創(chuàng)新以保證中藥品質(zhì)，并通過質(zhì)量追溯在整體產(chǎn)業(yè)鏈水平構(gòu)建品質(zhì)評價體系，促進各環(huán)節(jié)的工藝優(yōu)化和質(zhì)量控制，保障中藥產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定和療效可靠。鑒于此，本文主要分析探討了中藥質(zhì)量控制相關(guān)創(chuàng)新技術(shù)，以供參閱。

關(guān)鍵詞：中藥質(zhì)量;創(chuàng)新技術(shù)

1中藥復(fù)方DNA鑒定新方法分析中成藥生物組成

中成藥中的摻假、夾雜，不僅影響臨床用藥的安全性和有效性，同時因涉及受保護動物而存在監(jiān)管難題。目前復(fù)方鑒定以分子鑒定較準(zhǔn)確，其中以依據(jù)DNA條形碼測序進行鑒定通用性強，但挑克隆一代測序通量低，二代測序讀長較短，而長讀長、高通量第三代測序技術(shù)有望彌補這些不足。通過三代單分子測序，經(jīng)CCS處理提高結(jié)果Reads質(zhì)量和準(zhǔn)確度，獲得全長條形碼DNA序列，并使用條形碼組合提高鑒定準(zhǔn)確性和檢出概率。樣品經(jīng)DNA提取，標(biāo)簽引物PCR擴增，磁珠純化制備建庫樣本，并上機測序;下機數(shù)據(jù)經(jīng)（由人參CCS處理，數(shù)據(jù)抽取獲得結(jié)果Reads，最后聚類、校驗和物種鑒定。以生脈散及由單味藥麥冬、五味子構(gòu)成，比例3：3：2）為例，分別制備散劑、各單味藥DNA樣本DNA混合的DNA樣本（混DNA），各DNA樣本分別制備ITS2序列和psbA-trnH序列建庫樣本進行三代測序并進行鑒定分析;并采用ITS2和C01序列對含動物藥的三味茨黎散（羨黎，冬葵果，方海）進行鑒定，作為方法驗證。同時，通過生脈散ITS2序列挑克隆一代測序進行方法比較分析。結(jié)果從生脈散ITS2序列PCR產(chǎn)物中挑取了81個克隆，其中76個鑒定為人參，5個鑒定為五味子，未檢出麥冬。三代測序樣本中，除麥冬的ITS2序列建庫樣本因擴增困難有較多外源序列外，其它樣本與預(yù)期一致。生脈散ITS2序列建庫樣本中能檢出人參和五味子，psbA-trnH序列建庫樣本中能檢出五味子、麥冬和人參屬（Panaxsp.）的序列。以其中一份生脈散（（SRD-i151T15）為例，得到890條ITS2結(jié)果Reads，其中840條為人參，50條為五味子;得到4443條psbA-trnH結(jié)果Reads，其中人參屬3429條，五味子986條，麥冬28條。三味羨黎散中各藥味組成都得到鑒定，并檢出了5種外源植物及2種微生物的序列，且外源序列Reads數(shù)和種類數(shù)隨測序深度增加而呈現(xiàn)上升趨勢。兩種散劑共10個混DNA建庫樣本結(jié)果Reads中均無外源物種序列，散劑建庫樣本中檢出的外源物種來源于散劑自身，推斷是由于原料不夠純凈引入的。三代測序結(jié)果Reads總有效率99. 93%，大部分樣本（39/46）有效率達100%，幾乎沒有無法解釋的結(jié)果Reads，平行樣本間結(jié)果相近，表明該方法穩(wěn)定可行;即使是原料夾帶的外源動植物都能在成藥中檢出并準(zhǔn)確鑒定，且能區(qū)分浙麥冬與川麥冬，及與西洋參ITS2序列極相近的人參序列，表明該方法檢出限極低、鑒定準(zhǔn)確。全長條形碼組合的交互驗證、互補使鑒定更準(zhǔn)確，檢出概率更高，選用合適的條形碼能拓展用于其它領(lǐng)域的生物檢測鑒定。與現(xiàn)有中藥復(fù)方分子鑒定方法相比，組合全長條形碼策略通量較高，流程簡單、可批量處理，鑒定更準(zhǔn)確，結(jié)果更可信。

2中藥飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑研究

以參考臨床湯劑制法、經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)工藝制備的單味飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑對其它飲片形式（如配方顆粒、超微飲片、煮散飲片等）進行分析，能夠增強對這些新型飲片的監(jiān)管，并為它們的用法用量提供參考。色譜光譜等指紋圖譜技術(shù)為中藥飲片產(chǎn)品提供整體品質(zhì)信息，保證批次間質(zhì)量一致;而指標(biāo)成分含量及轉(zhuǎn)移率、出膏率等能提供量的信息。如研究發(fā)現(xiàn)各批次人參飲片的出膏率都在40%以上，表明由其制得的顆粒的最大當(dāng)量不應(yīng)超過2.5;而依據(jù)藥典規(guī)定的指標(biāo)成分含量限值，結(jié)合指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率范圍，對配方顆粒及其中間體干膏粉進行含量測定能為當(dāng)量分析提供更多數(shù)據(jù)支持，確保臨床用藥劑量準(zhǔn)確。另外，標(biāo)準(zhǔn)湯劑預(yù)期干膏的每當(dāng)量含量分析，為干膏粉、配方顆粒等提供了更便捷的當(dāng)量計算方法。依據(jù)中藥飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑的研究思路和方法，可以進行中藥復(fù)方、中藥配伍等方面標(biāo)準(zhǔn)湯劑研究，用于中成藥質(zhì)控，并為中藥藥性、配伍理論等研究提供數(shù)據(jù)支撐。由指標(biāo)成分含量及轉(zhuǎn)移率、指紋圖譜相似度和出膏率構(gòu)成的“點線面”一體的標(biāo)準(zhǔn)湯劑質(zhì)控體系，有利于新型飲片的研發(fā)和生產(chǎn)質(zhì)控，對藥材質(zhì)量的評價也具有一定的參考意義。依托標(biāo)準(zhǔn)湯劑的標(biāo)化作用（包括當(dāng)量換算），可以選擇性吸收各形式飲片的優(yōu)勢，打破不同形式飲片間調(diào)配的壁壘，在滿足臨床用藥需求、保證療效的同時，合理、高效地利用中藥資源。

3中藥材質(zhì)量控制體系探討

全長條形碼鑒定對種質(zhì)不同的浙、川麥冬psbA-trnH序列差異位點進行了驗證;人參飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑研究表明藥材質(zhì)量與產(chǎn)地關(guān)系密切，而農(nóng)殘超標(biāo)、炮制不當(dāng)更是關(guān)系到中藥的安全性和臨床療效。鑒于中藥材質(zhì)量影響因素較多，需以質(zhì)量追溯體系為框架、結(jié)合環(huán)節(jié)質(zhì)控，構(gòu)建中藥材質(zhì)量控制體系。對現(xiàn)階段中藥材質(zhì)量追溯體系所面臨的問題與挑戰(zhàn)進行分析，并提出解決方案，同時結(jié)合品質(zhì)生態(tài)學(xué)和產(chǎn)地區(qū)劃研究，以期從產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)和技術(shù)環(huán)節(jié)上共同為中藥材質(zhì)量控制體系發(fā)展獻策。分析表明，中藥材質(zhì)量追溯體系完善魚需發(fā)展集約化生產(chǎn)，并適當(dāng)精簡產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，建設(shè)配套倉儲、物流設(shè)施。以五味子為例，結(jié)合其品質(zhì)影響因素和產(chǎn)地生態(tài)因子分析，采用藥用植物全球產(chǎn)地生態(tài)適宜性區(qū)劃信息系統(tǒng)（GMPGIS）進行產(chǎn)地適宜性區(qū)劃，為不同適宜性區(qū)域類型的五味子種植選地和生產(chǎn)集約化提供參考，并提出五味子生產(chǎn)質(zhì)量控制體系框架。

結(jié)束語

總而言之，中藥依托其功效為人類健康服務(wù)，經(jīng)長期臨床應(yīng)用驗證，功效好的藥品被傳承，引導(dǎo)藥物品質(zhì)提升和新藥研發(fā);而中藥的品質(zhì)是其功效的基本保證，保障并推動中藥功效拓展;各質(zhì)控技術(shù)保證中藥品質(zhì)，并通過關(guān)鍵技術(shù)研發(fā)和流程優(yōu)化，促進產(chǎn)業(yè)鏈各階段中藥品質(zhì)提升，助推中藥行業(yè)發(fā)展;質(zhì)量追溯體系保證中藥從生產(chǎn)到使用都處于監(jiān)控范圍內(nèi)，將中藥療效與品質(zhì)信息、質(zhì)量控制信息關(guān)聯(lián)，發(fā)現(xiàn)與療效關(guān)系密切的關(guān)鍵環(huán)節(jié)和因素，促進療效水平的整體提升，并消除不符合生產(chǎn)規(guī)范和質(zhì)量不合格產(chǎn)品對行業(yè)的負面作用，維護中藥行業(yè)的健康發(fā)展。