顏澤清 婁紅軍 王 元

透明質(zhì)酸是一種酸性粘多糖，其獨(dú)特的分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)顯示出多種重要的生理功能，如潤(rùn)滑關(guān)節(jié)，調(diào)節(jié)血管壁的通透性，調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)，水電解質(zhì)擴(kuò)散及運(yùn)轉(zhuǎn)，促進(jìn)創(chuàng)傷愈合等。其中尤為重要的是，透明質(zhì)酸具有特殊的保水作用，是目前發(fā)現(xiàn)的自然界中保濕性好的物質(zhì)，被稱為理想的天然保濕因子。

動(dòng)物皮膚也含有大量的透明質(zhì)酸。犬類與人類一樣，其皮膚成熟和老化過(guò)程也隨著透明質(zhì)酸的含量和新陳代謝而變化。當(dāng)透明質(zhì)酸含量較高時(shí)，它可以改善皮膚營(yíng)養(yǎng)代謝，使皮膚柔嫩、光滑、去皺、增加彈性、防止衰老、促進(jìn)健康。

一、材料與方法

（一）實(shí)驗(yàn)檢測(cè)儀器

皮膚水分測(cè)試儀CorneometerCM 825，由德國(guó)Courage+Khazaka公司出品。

（二）實(shí)驗(yàn)材料

透明質(zhì)酸（HA）粉劑，由華熙生物科技股份有限公司提供。

實(shí)驗(yàn)用日糧，包含基礎(chǔ)日糧和含HA日糧，由南京警犬研究所科技開(kāi)發(fā)中心動(dòng)物食品廠特制。其營(yíng)養(yǎng)成份見(jiàn)表1。

基礎(chǔ)日糧不含HA，其它日糧在基礎(chǔ)犬糧中分別添加0.01%、0.03%和0.09%的HA，制成3個(gè)HA含量的試驗(yàn)犬糧。

另生產(chǎn)HA含量為0.5%的實(shí)驗(yàn)犬糧，作為HA安全性試驗(yàn)使用。

（三）試驗(yàn)動(dòng)物

所有實(shí)驗(yàn)犬和實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地由公安部南京警犬研究所科技開(kāi)發(fā)中心實(shí)驗(yàn)犬訓(xùn)養(yǎng)基地提供。

選擇10頭6～7歲的退役警犬拉布拉多犬，作為HA的安全試驗(yàn)動(dòng)物。

另選擇6～7歲的退役警犬拉布拉多犬、史賓格犬、德國(guó)牧羊犬各20頭，總60頭。隨機(jī)分成4組，每組分別含拉布拉多犬、史賓格犬、德國(guó)牧羊犬各5頭。

（四）試驗(yàn)犬管理

在試驗(yàn)前，所有實(shí)驗(yàn)犬一直飼喂著基礎(chǔ)犬糧，在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前一周，所有犬進(jìn)行一次腸道驅(qū)蟲(chóng)和皮膚藥浴。實(shí)行一犬一舍方式管理，每犬每日飼喂二頓，采食量按0.6kg犬糧/30kg犬體重/日，進(jìn)行定量供應(yīng)。每日犬舍清理衛(wèi)生二次，每周梳理犬體被毛一次，期間不再用藥。

表1：基礎(chǔ)日糧營(yíng)養(yǎng)成份表

（五）實(shí)驗(yàn)時(shí)間

安全性實(shí)驗(yàn)為期30天。犬皮膚含水量實(shí)驗(yàn)，不計(jì)算實(shí)驗(yàn)前期的預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí)間，正式實(shí)驗(yàn)時(shí)間為60天。

（六）實(shí)驗(yàn)觀測(cè)指標(biāo)與檢測(cè)方法

1.安全性實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)，包含犬的精神狀態(tài)、食欲、興奮度、大小便、皮膚狀況、運(yùn)動(dòng)狀況等。

2.檢測(cè)實(shí)驗(yàn)犬的皮膚含水量。

檢測(cè)在寬敞、通風(fēng)條件良好，溫度（20℃～24℃）、濕度（75%～85%）相對(duì)穩(wěn)定的房間進(jìn)行。被測(cè)試犬在牽犬員的溫和方式控制下，在犬前肢肘關(guān)節(jié)上約2cm處剪毛、剃毛，面積大于1cm2。在犬處于安靜狀態(tài)下，用皮膚水分測(cè)定儀測(cè)定剃毛區(qū)的水分含量，進(jìn)行水分檢測(cè)。所有犬的檢測(cè)，應(yīng)在同一儀器上，由同一工作人員在同一房間內(nèi)進(jìn)行，檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)頭與犬皮膚接觸力度與垂直角度應(yīng)保持一致。

（七）皮膚水分測(cè)定值數(shù)據(jù)處理

使用Excel2007軟件中單因子方差分析方法，比較其P值，判斷各組間的差異是否顯著。

二、結(jié)果

（一）安全性實(shí)驗(yàn)

10頭老齡拉布拉多犬，飼喂含HA0.5%的日糧15天后，犬的精神狀態(tài)、食欲、興奮度、大小便、皮膚狀況、運(yùn)動(dòng)狀況等均無(wú)異常狀況出現(xiàn)。證明HA在犬糧中的含量達(dá)到0.5%的濃度是安全的。

（二）皮膚水分的檢測(cè)

對(duì)照組15頭犬皮膚水分均值為24.5±5.1，實(shí)驗(yàn)1組、實(shí)驗(yàn)2組和實(shí)驗(yàn)3組犬的皮膚檢測(cè)值分別為26.0±5.3、29.5±4.6、34.3±5.7，其P值分別為0.42(P＞0.05)、0.029(P＜0.05)和 1.5E-05(P＜0.01)，表明實(shí)驗(yàn)1組與對(duì)照組之間不存在顯著性差異；實(shí)驗(yàn)2組與對(duì)照組存在著顯著性差異；實(shí)驗(yàn)3組與對(duì)照組存在著極顯著性差異。具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。

表2：實(shí)驗(yàn)犬皮膚水分檢測(cè)數(shù)據(jù)分析結(jié)果

三、討論

德國(guó)CK公司皮膚水分測(cè)試儀CM825，其原理為基于水的介電常數(shù)為81，與其它物質(zhì)的介電常數(shù)（一般＜7）差異相當(dāng)大，當(dāng)皮膚含水量不同，在皮膚表面一定面積的電容值會(huì)有不同變化，且其電容變化與皮膚水分含量呈直線相關(guān)。因而，這一儀器測(cè)定值代表了皮膚的水分含量值。

目前，國(guó)外有許多研究機(jī)構(gòu)，利用本儀器的測(cè)定值來(lái)判斷一些犬的皮膚疾病與皮膚含水量之間的關(guān)系，往往皮膚問(wèn)題越嚴(yán)重，皮膚含水量越不正常。

皮膚含水量的測(cè)定值，與犬的年齡關(guān)系較大。年齡越小，測(cè)定值越高。本實(shí)驗(yàn)選定的犬，年齡均在6～7歲之間，其測(cè)定值的差異，對(duì)本研究結(jié)果影響較小。皮膚含水量的測(cè)定值，與測(cè)定點(diǎn)的皮膚裸露程度關(guān)系很大。如果犬毛剃不干凈，測(cè)定值就明顯小于完全裸露區(qū)的測(cè)定值。另外，皮膚含水量的測(cè)定值，與操作者的操作手法關(guān)系很大。按照儀器生產(chǎn)商的要求，儀器測(cè)定頭壓入的深度應(yīng)在10～20μm。壓入越深，測(cè)定值越大。

由華熙生物科技股份有限公司提供透明質(zhì)酸，在本研究中對(duì)提高犬皮膚含水量有著良好的效果。皮膚含水量高，表明皮膚健康程度高。犬的皮膚健康，往往表明犬的營(yíng)養(yǎng)良好，犬的全身健康良好。