李朝云,邱樹(shù)毅,班世棟,羅小葉,王曉丹*
(1.貴州大學(xué) 釀酒與食品工程學(xué)院,貴州 貴陽(yáng) 550025;2.貴州大學(xué) 貴州省發(fā)酵工程與生物制藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,貴州 貴陽(yáng) 550025)
茶(Camellia sinensis(L.)O.Kuntze)是山茶科山茶屬植物,別名槚、茗、荈、茶樹(shù)、茶葉、元茶等,茶葉中蛋白質(zhì)總量占干物質(zhì)含量的25%~30%,其中以不可溶解蛋白質(zhì)為主(約占蛋白質(zhì)總量的98%);茶葉中還含有約3%的游離氨基酸,其中茶氨酸含量最高,谷氨酸及天門(mén)冬氨酸含量次之;茶葉中糖類(lèi)物質(zhì)約占茶葉干物質(zhì)量的20%~25%,但僅有總糖的5%可溶解,故而茶飲料作為低糖飲料,是糖料病患者的良好飲品;茶葉中脂類(lèi)含量約為干物質(zhì)量的10%,包括脂肪、磷脂、糖脂、甾醇、萜類(lèi)、蠟及脂溶性色素等,不飽和脂肪酸含量超過(guò)50%,不飽和脂肪酸在降低膽固醇,改善血液循環(huán),提高記憶力等據(jù)具有良好的作用;茶多酚占茶葉干質(zhì)量的25%~35%[1],主要包括兒茶素類(lèi)、花色苷類(lèi)、黃酮類(lèi)、黃酮醇類(lèi)和酚酸類(lèi)等,其中兒茶素占茶多酚總量的60%~80%。表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)是兒茶素中最有效的活性成分,僅存在于綠茶中,因其在具有抗菌、抗病毒、抗氧化、抗動(dòng)脈硬化、抗血栓形成、抗血管增生、抗炎以及抗腫瘤等方面的突出作用,備受?chē)?guó)內(nèi)外專(zhuān)家學(xué)者的關(guān)注。本文列舉了近幾年EGCG在各個(gè)方向的研究進(jìn)展,為綠茶中EGCG的研究做相應(yīng)總結(jié),可作為今后研究的參考,同時(shí)為研究指出新的方向,旨在充分發(fā)揮中國(guó)傳統(tǒng)作物—綠茶的生理活性,為國(guó)內(nèi)綠茶產(chǎn)業(yè)研究提供理論指導(dǎo),促進(jìn)國(guó)內(nèi)綠茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展。1 EGCG的生理活性
病毒是一種由一個(gè)保護(hù)性的外殼包裹的一段脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)或者核糖核酸(ribonucleic acid,RNA),只能通過(guò)利用宿主的細(xì)胞系統(tǒng)進(jìn)行自我復(fù)制,且具有細(xì)胞感染性的亞顯微粒子。
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是一種來(lái)源于黃病毒科的正鏈RNA病毒,是通過(guò)培養(yǎng)物在細(xì)胞間傳播的,病毒的擴(kuò)散在培養(yǎng)物中是難以控制。CIESEK S等[3]研究發(fā)現(xiàn),EGCG以非依賴(lài)性方式通過(guò)蛋白TM4SF中跨膜四分子蛋白CD81阻止HCV在細(xì)胞間傳播,80 μmol/L EGCG抑制細(xì)胞培養(yǎng)衍生顆粒(HCV cell culture derived,HCVcc)以及HCV假顆粒(HCV pseudoparticle,HCVpp)的進(jìn)入,從而抑制HCV的感染。
手足口?。╤and-foot-and-mouth disease,HFMD)的主要致病因子是腸道病毒,EGCG通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞氧化還原環(huán)境來(lái)抑制病毒復(fù)制,阻止子代病毒的形成,CALLAND N等[4]通過(guò)在感染的早期階段的不同時(shí)間點(diǎn)施用分子探針來(lái)評(píng)估EGCG抗病毒活性作用點(diǎn),研究表明EGCG作用于病毒顆粒并通過(guò)阻斷病毒與細(xì)胞結(jié)合來(lái)抑制病毒進(jìn)入。
在EGCG抗艾滋病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染的作用研究中,研究人員證明EGCG充當(dāng)抑制劑阻斷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶的酶活性導(dǎo)致抗原P24濃度降低而抑制了病毒的活性,EGCG還影響免疫細(xì)胞CD4的表達(dá),指出EGCG通過(guò)阻斷艾滋病毒殼膜蛋白結(jié)構(gòu)gp120和CD4在T輔助細(xì)胞上的相互作用來(lái)阻止HIV病毒粒子的附著,從而抑制HIV病毒的生長(zhǎng)達(dá)到抗病毒的作用,研究人員還通過(guò)研究核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)光譜探究EGCG-CD4結(jié)合的特征,向EGCG添加CD4會(huì)使得EGCG的NMR信號(hào)強(qiáng)度線性降低,而在對(duì)照組中則沒(méi)有觀察到線性降低,證明了EGCG與CD4分子的高親和力,2μmol/LEGCG抑制HIV殼膜蛋白結(jié)構(gòu)gp120和分離的CD4 T細(xì)胞的結(jié)合,驗(yàn)證了EGCG與HIV殼膜蛋白結(jié)構(gòu)gp120可干擾蛋白分子CD4配體,從而阻止病毒初始附著于蛋白分子CD4 T細(xì)胞而達(dá)到抑制病毒的作用[5]。
甲型流感病毒是單鏈RNA病毒,現(xiàn)在的流感病毒根據(jù)H編號(hào)(對(duì)于血凝素的類(lèi)型)和N編號(hào)(對(duì)于神經(jīng)氨酸酶的類(lèi)型)進(jìn)行標(biāo)記,用于抗流感病毒的兩類(lèi)主要抗病毒藥物是神經(jīng)氨酸酶抑制劑或病毒蛋白M2的抑制劑,但是其有效性取決于流感病毒的類(lèi)型且供應(yīng)有限,EGCG對(duì)細(xì)胞內(nèi)區(qū)室如內(nèi)體和溶酶體的酸化具有抑制作用,導(dǎo)致組織培養(yǎng)中流感病毒生長(zhǎng)受到抑制[6]。
HE W[7]研究表明,EGCG顯著抑制了RNA合成的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)復(fù)制中間體,導(dǎo)致共價(jià)閉合環(huán)狀DNA產(chǎn)生較少,從而抑制病毒復(fù)制以達(dá)到抗病毒效用。
EGCG通過(guò)增強(qiáng)人乳頭瘤病毒早期基因區(qū)致癌基因E6、E7的蛋白轉(zhuǎn)換和降解來(lái)抑制人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染的角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖,表明EGCG可能潛在地逆轉(zhuǎn)HPV誘導(dǎo)瘤病的生成,這一發(fā)現(xiàn)可以在臨床上用于治療HPV誘導(dǎo)的瘤形成。
EGCG還在更多的病毒中發(fā)揮著抑制作用,近年來(lái)EGCG在抑制病毒中的部分研究?jī)?nèi)容總結(jié)見(jiàn)表1。現(xiàn)階段EGCG對(duì)病毒的作用研究報(bào)道中,大都是較為常規(guī)或者爆發(fā)人數(shù)多,面積廣的病毒感染,且在部分研究中明確了EGCG的作用位點(diǎn)和機(jī)理,這為EGCG在接下來(lái)的研究中提供理論參考,方法的建立也預(yù)示著EGCG可能在罕見(jiàn),特殊的病毒中也具有一定的抗病毒活性,特別是部分研究已經(jīng)推廣的臨床驗(yàn)證階段,這一方面的研究同時(shí)促進(jìn)醫(yī)療事業(yè)的發(fā)展。
表1 EGCG對(duì)病毒的抑制作用Table 1 Inhibition effect of EGCG on viruses
癌癥是一種人體細(xì)胞異常生長(zhǎng)引起的疾病,并會(huì)侵入和擴(kuò)散到身體其他部位,癌癥可由生物傳染,環(huán)境污染物,吸食煙草,不健康的飲食和人體內(nèi)部因素,遺傳基因等導(dǎo)致。現(xiàn)階段,天然植物在醫(yī)療中的機(jī)理逐漸受到重視,EGCG被認(rèn)為在癌癥預(yù)防和治療中發(fā)揮關(guān)鍵作用活動(dòng)。
乳腺癌是發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤,KESHAWA E M等[15]研究表明,EGCG基于表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR),受體CD44和細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)表達(dá)相互依賴(lài)的分子網(wǎng)絡(luò)改變并降低人體乳腺癌細(xì)胞MCF-7,MCF-7TAM和MDA-MB-231的遷移趨勢(shì),減弱了乳腺癌細(xì)胞的侵襲;研究人員還發(fā)現(xiàn)10~320 μmol/L的EGCG以依賴(lài)性方式減少乳腺癌細(xì)胞4T1生長(zhǎng),EGCG通過(guò)調(diào)節(jié)自噬相關(guān)蛋白Beclin1,ATG5和LC3B的水平誘導(dǎo)細(xì)胞自噬。EGCG還以濃度依賴(lài)性降低雌激素受體α陽(yáng)性乳腺癌T47D細(xì)胞活力,80 μmol/L EGCG還顯著增強(qiáng)抑癌PTEN基因、CASP3基因、CASP9基因的表達(dá)和降低蛋白激酶B分泌抑制乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng),充分證明了EGCG是治療乳腺癌的良好輔助治療劑[17];使用流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,F(xiàn)CM)檢查細(xì)胞凋亡,蛋白質(zhì)印跡分析(westernblot,WB)和逆轉(zhuǎn)錄定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-QPCR)用于分析人體抑癌基因P53和Bcl-2表達(dá)水平,30 μmol/L的EGCG可抑制人乳腺癌細(xì)胞MCF-7的增殖并促進(jìn)細(xì)胞凋亡[19]。研究還發(fā)現(xiàn),60 μmol L-1 EGCG和10 μmol/L 17 β-雌二醇共同處理乳腺癌細(xì)胞T-47D24h后,觀察到蛋白ERα水平的下調(diào),抑制乳腺癌細(xì)胞T-47D24的生長(zhǎng)。
EGCG還在2~100 μmol/L條件下抑制膀胱癌SW780細(xì)胞遷移和侵襲,同時(shí)通過(guò)蛋白質(zhì)印跡證實(shí)EGCG通過(guò)激活半胱天冬酶,B淋巴細(xì)胞瘤-2基因和脫氧核糖核(deoxyribonucleic acid,DNA)修復(fù)酶(poly adenosine diphosphate-ribose polymerase,PARP)等酶誘導(dǎo)SW780細(xì)胞凋亡。
WANG J等[18]研究發(fā)現(xiàn),EGCG前藥(prodrug epigallocatechin gallate,Pro-EGCG)通過(guò)降低了癌細(xì)胞分泌的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A來(lái)抑制子宮內(nèi)膜癌中三苯氧胺,表明Pro-EGCG是一種新的子宮內(nèi)膜癌血管生成抑制劑。
EGCG和非侵入性低強(qiáng)度脈沖電場(chǎng)在人胰腺細(xì)胞系PANC-1上協(xié)同反應(yīng)通過(guò)干擾線粒體,增強(qiáng)內(nèi)源性通路轉(zhuǎn)導(dǎo)有效誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,癌細(xì)胞PANC-1的遷移和侵襲也被顯著抑制,潛在的機(jī)制還可能與人體抑癌基因P53,Bcl-2信號(hào)通路有關(guān),極大的改善胰腺癌的傳統(tǒng)療法所帶來(lái)的復(fù)發(fā)和痛苦和風(fēng)險(xiǎn)[20]。
通過(guò)免疫印跡試驗(yàn)分析細(xì)胞凋亡探究EGCG對(duì)人膽管癌細(xì)胞的作用,用傷口愈合圖像分析法評(píng)估癌細(xì)胞的侵襲和遷移,使用人膽管癌細(xì)胞的動(dòng)物腫瘤異種移植模型研究EGCG的體內(nèi)抗腫瘤活性,驗(yàn)證了EGCG在5 μg/mL質(zhì)量濃度下有效地抑制腫瘤的生長(zhǎng)并抑制致癌分子信號(hào)誘導(dǎo)凋亡細(xì)胞死亡[21];二甲雙胍與EGCG協(xié)同作用激活核因子E-2相關(guān)因子/血紅素加氧酶-1通路,通過(guò)去乙?;?(sirtuin1,SIRT1)依賴(lài)的Nrf-2脫乙?;种芅rf2/HO-1信號(hào)傳導(dǎo)途徑,且增強(qiáng)了EGCG誘導(dǎo)的活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成,隨后導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[22]。
還有研究發(fā)現(xiàn)[23],運(yùn)用EGCG包裹的納米顆粒(nanoparticles,NPs)的巖藻糖羧甲基殼聚糖(fucose carboxymethyl chitosan,F(xiàn)U-CMC)接枝EGCG與金納米顆粒(Au nanoparticles,AuNPs),納米復(fù)合材料的使用較之單獨(dú)使用EGCG,從對(duì)抑制癌細(xì)胞活力和細(xì)胞攝取測(cè)定納米復(fù)合材料均比純的EGCG更好的抑制了胃腫瘤細(xì)胞的繁殖。
SONG X Q等[24]運(yùn)用生物信息學(xué)在PubChem數(shù)據(jù)庫(kù)中使用Ingenuity途徑分析,論證了在對(duì)卵巢癌的抑制中,EGCG通過(guò)影響參與細(xì)胞周期,細(xì)胞組裝和組織,DNA復(fù)制等細(xì)胞活動(dòng)的蛋白物質(zhì)JUN、FADD、NFKB1、Bcl-2、HIF1α和MMP等已達(dá)到抑制卵巢癌的作用。
PETER B等[25]利用高通量無(wú)標(biāo)記共振波導(dǎo)光柵生物傳感器Epic BenchTop原位監(jiān)測(cè)癌細(xì)胞在顯示仿生聚合物表面的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp)三肽上的粘附過(guò)程,使用高粘附性人宮頸腺癌(highly adherent human cervical adenocarcinoma,HeLa)細(xì)胞作為模型系統(tǒng),獲得具有突出時(shí)間分辨率的細(xì)胞粘附動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù),不同濃度的EGCG很大程度上影響了粘附過(guò)程的時(shí)間演變。通過(guò)使用動(dòng)力學(xué)曲線的一階導(dǎo)數(shù),開(kāi)發(fā)了一個(gè)簡(jiǎn)單的模型來(lái)量化吸附類(lèi)動(dòng)力學(xué)的轉(zhuǎn)變,結(jié)果表明轉(zhuǎn)變發(fā)生在EGCG質(zhì)量濃度約為60 μg/mL。使用溴化噻唑藍(lán)四氮唑?yàn)榻K點(diǎn)測(cè)定,表明EGCG是抑制細(xì)胞的,使用引入的無(wú)標(biāo)記方法,細(xì)胞粘附動(dòng)力學(xué)曲線的形狀可用于以快速,有效且高度靈敏的方式定量體外細(xì)胞活力。
近幾年EGCG在抗癌中的應(yīng)用見(jiàn)表2。
表2 EGCG在抗癌的應(yīng)用Table 2 Application of EGCG in anti-cancer
現(xiàn)階段,大多數(shù)的研究都是集中在爆發(fā)范圍廣,數(shù)量大的相關(guān)癌癥上,對(duì)患病率較少的癌癥病狀研究極少,且在現(xiàn)階段的研究中都是采用綠茶中提取到的高純度的EGCG作為研究對(duì)象,極少研究直接飲用或食用綠茶是否也可達(dá)到相應(yīng)的而結(jié)果,但相關(guān)研究為EGCG在抗癌中依舊提供了寶貴的經(jīng)驗(yàn)和理論支撐,后續(xù)可在更多癌癥中引入EGCG,也可探究直接使用綠茶飲料等制品是否能達(dá)到相應(yīng)的效果,遮掩可以極大降低EGCG的提取成本,使得EGCG成為來(lái)源廣泛,便宜的藥物。
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是全世界第二常見(jiàn)致病微生物,是膿毒癥的主要病因之一。研究人員發(fā)現(xiàn)25 μg/mL的EGCG能夠抑制90%以上青霉素結(jié)合蛋白PBP2的產(chǎn)生從而達(dá)到抗菌作用,還有研究表明,50 μg/mL EGCG能夠逆轉(zhuǎn)四環(huán)素抗性和改善易感葡萄球菌分離株中四環(huán)素的最低抑菌濃度以達(dá)到抑菌效果,嗜麥芽窄食單胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)因其對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)和其他廣譜抗生素具有抗藥性而在全球范圍內(nèi)成為重要的醫(yī)院病原體,研究顯示EGCG對(duì)嗜麥芽窄食單胞菌具有抗菌作用[36]。
EGCG還具有預(yù)防能力,在動(dòng)物體內(nèi)注入幽門(mén)螺桿菌(Helicobacter pylori)之前添加一定量的EGCG就可以預(yù)防幽門(mén)螺桿菌引起的胃粘膜炎癥。嗜肺軍團(tuán)菌(Legionella pneumophila)是一種在巨噬細(xì)胞中侵入并復(fù)制的專(zhuān)性藥物人類(lèi)致病菌,質(zhì)量濃度低至0.5 μg/mL的EGCG可選擇性地免疫并抑制a巨噬細(xì)胞中嗜肺軍團(tuán)菌的生長(zhǎng);EGCG與唑類(lèi)抗真菌藥物通過(guò)協(xié)同作用擾亂白色念珠菌(Candida albicans)細(xì)胞中的葉酸代謝抑制麥角甾醇的生物合成[37]。
現(xiàn)階段,EGCG在單獨(dú)報(bào)道抑菌作用是極少的,多是將EGCG的抑菌作用與抗癌,抗病毒等相結(jié)合報(bào)道,現(xiàn)階段的報(bào)道中主要就EGCG影像細(xì)菌中蛋白的結(jié)合,通過(guò)與其他物質(zhì)協(xié)同作用改變細(xì)菌的生存環(huán)境等方式抑制細(xì)菌的生長(zhǎng),這為EGCG在抑菌作用機(jī)理方面研究提供了理論基礎(chǔ),研究范圍可推廣到更多的微生物中去,但現(xiàn)階段研究并很多未涉及到作用位點(diǎn)的研究,這可能成為未來(lái)研究的一個(gè)方向。
炎癥是機(jī)體對(duì)于刺激的一種防御反應(yīng),表現(xiàn)為紅、腫、熱、痛和功能障礙等。在自身免疫性甲狀腺炎中,研究了EGCG在大鼠中的神經(jīng)保護(hù)作用,表明EGCG治療通過(guò)抑制核因子(nuclear factor kB,NF-kB)途徑顯著降低過(guò)敏性鼻炎大鼠白細(xì)胞介素-1(interleukin-1,IL-1),干擾素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平誘導(dǎo)配體蛋白表達(dá),在對(duì)原發(fā)性人類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞的抑制中,EGCG占據(jù)了轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子激活的激酶TAK1活躍站點(diǎn)的大部分,干擾蛋白IL-1β信號(hào)通路,抑制蛋白Cox-2,P38和核NF-κB等的表達(dá)使得風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞(rheumatoid arthritis synovial fibroblast,RASF)生長(zhǎng)受到抑制[38]。
EGCG具有作為抗炎藥物的潛力,其表現(xiàn)為能夠減少活性巨噬細(xì)胞中一氧化氮(NO),環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2),IL-6,IL-1b和TNF-α的產(chǎn)生,給予EGCG后,線粒體脫氧核糖核酸(mitochondrial deoxyribonucleic acid,mtDNA)和炎癥介質(zhì)的血漿濃度顯著降低,EGCG還顯著降低了急性肺損傷的嚴(yán)重程度。EGCG通過(guò)限制熱損傷后的線粒體DNA釋放具有抗炎和保護(hù)肺的作用[39]。
在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的脫氧尿嘧啶缺口末端標(biāo)記原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)測(cè)定和陰離子熒光配體染料Fluoro-Jade B染色中,EGCG可以減弱凋亡神經(jīng)元和神經(jīng)變性以顯著改善同型半胱氨酸誘導(dǎo)的腦血管損傷,使得EGCG成為阻止大腦中同型半胱氨酸誘導(dǎo)的神經(jīng)變性和神經(jīng)炎癥的優(yōu)良藥物[40]。
1.06 mg/mL的EGCG通過(guò)增加 IL-1β、IL-10、IL-12、IFN-γ和IL-6等蛋白并降低蛋白IL-17的活性等抗炎介質(zhì)的分泌來(lái)抑制牙炎;EGCG預(yù)處理顯著增加B細(xì)胞淋巴瘤-2蛋白表達(dá),并抑制大鼠中半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase-3)活性和腫瘤壞死因子TNF-α相關(guān)凋亡誘導(dǎo)腫瘤壞死因子凋亡相關(guān)配體(recombinant tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)蛋白表達(dá),表明EGCG為牙周炎的新型輔助治療提供了方向[41]。
表沒(méi)食子兒茶素(3″-O-甲基)沒(méi)食子酸酯(epigallocatechin(3″-O-methyl)gallate,EGCG3″Me)是EGCG的3-O-甲基化衍生物,其在小鼠牙槽骨的器官培養(yǎng)中抑制脂多糖誘導(dǎo)的骨吸,并抑制COX-2和前列腺素(phenyl glycidyl ether,PGE)合成的關(guān)鍵酶mPGES-1等酶的表達(dá),保護(hù)牙周炎中的炎癥性骨質(zhì)流失[42];載有EGCG的微粒抑制人皮膚成纖維細(xì)胞的炎癥,且在用新鮮培養(yǎng)基替換載藥顆粒懸浮液后,抑制作用持續(xù)存在,表明載有EGCG的微米級(jí)顆粒是生物相容的并且發(fā)揮持續(xù)的抗炎作用。
FU M等[43]研究了EGCG對(duì)卵清蛋白誘導(dǎo)的小鼠模型中的過(guò)敏性鼻炎的影響,結(jié)果顯示,給予EGCG后小鼠血清中的免疫球蛋白E和組胺濃度顯著下降,白細(xì)胞介素(IL)-1β,IL-4水平降低,打噴嚏次數(shù)和鼻涕發(fā)生率均顯著下降,表明EGCG具有減少過(guò)敏性鼻炎的有益效果。
潰瘍性結(jié)腸炎是一種常見(jiàn)的慢性炎癥,給患者每天用兩次EGCG(200~400 mg)治療,結(jié)果顯示,78%的患者在開(kāi)始用EGCG后出現(xiàn)明顯的pouchitis(是全直腸結(jié)腸切除術(shù)后回腸袋-肛門(mén)吻合術(shù)最常見(jiàn)的并發(fā)癥)癥狀改善,而56%的患者進(jìn)入完全緩解期,體現(xiàn)了EGCG對(duì)炎癥的治療效果[44]。
牛皮癬是一種慢性且目前無(wú)法治愈的炎性皮膚病,其特征在于過(guò)度增殖,異常分化導(dǎo)致皮膚屏障功能損傷,EGCG增加胱天蛋白酶(caspase-14)的表達(dá),同時(shí)促進(jìn)表皮分化和角質(zhì)化用于治療牛皮癬[45]。
EGCG或EGCG與其他物質(zhì)協(xié)同作用通過(guò)降低炎癥反應(yīng)中相關(guān)蛋白的表達(dá),抑制相關(guān)酶的表達(dá),占據(jù)反應(yīng)位點(diǎn)等方式抑制了炎癥的發(fā)病,現(xiàn)階段EGCG的抗炎癥作用在大部分驗(yàn)證中均有報(bào)道,但任有部分研究沒(méi)有說(shuō)明其作用機(jī)制,這可能是未來(lái)研究的方向之一。
肥胖作為一種多因素疾病涉及低度炎癥一直備受關(guān)注,研究表明了加入EGCG后人體內(nèi)厚壁菌門(mén)(Firmicutes)擬桿菌比率顯著降低,證明了EGCG不僅對(duì)腸道微生物群的影響,與膳食成分一起影響宿主健康、另一方面,還可能來(lái)自抗氧化活性,可以有效改善肥胖癥。YI L等[46]研究了EGCG在脂肪形成過(guò)程中的作用,指出EGCG對(duì)肥胖的抑制作用可能是通過(guò)PI3K-AKT-交叉頭蛋白O1(forkhead box O1,F(xiàn)oxO1)信號(hào)通路介導(dǎo)的介導(dǎo)的,負(fù)向調(diào)節(jié)過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ的表達(dá);另一組研究表明EGCG通過(guò)上調(diào)多個(gè)轉(zhuǎn)錄途徑顯著改善了高脂肪和高果糖飲食觸發(fā)的胰島素抵抗和氧化應(yīng)激,還通過(guò)抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B加速葡萄糖攝取的表達(dá)影響了體內(nèi)對(duì)脂肪和糖類(lèi)物質(zhì)的吸收,表明EGCG可以潛在地用作針對(duì)肥胖[47];EGCG3"Me嵌入由殼聚糖(chitosan,CS)和酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptides,CPP)組裝的納米顆粒中,它們顯示出對(duì)雙歧桿菌(Bifidobacterium)和乳桿菌(Lactobacillus)-腸球菌(Enterococcus)屬的最佳增殖效果,由于提高了生物利用度,EGCG3“Me負(fù)載的CS-CPP納米粒子可以作為潛在的功能性食品開(kāi)發(fā),以預(yù)防肥胖個(gè)體中與肥胖相關(guān)的代謝紊亂[48];KIAN K等[49]研究表明,EGCG抑制脂肪酸合成酶的表達(dá),有助于降低脂肪酸水平。此外,用EGCG處理后發(fā)現(xiàn)ROS產(chǎn)生增加,表明氧化應(yīng)激機(jī)制誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡抑制肥胖。
研究還表明[50],當(dāng)EGCG濃度為1~20 μmol/L時(shí)保護(hù)紅細(xì)胞免受紫外線誘導(dǎo)的損傷,防止ROS形成,脂質(zhì)過(guò)氧化,還原型谷胱甘肽和血紅蛋白氧化,顯示EGCG可用于保護(hù)血液成分免受UVB誘導(dǎo)的氧化損傷。
用EGCG處理神經(jīng)橫斷后大鼠,檢測(cè)到丙二醛含量顯著降低,超氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶活性顯著升高,明顯檢測(cè)到EGCG可減少蛋白caspase-3和COX-2的表達(dá),同時(shí)顯著增加S100B蛋白的表達(dá),表明EGCG可有效保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞免受逆行細(xì)胞凋亡,并可增強(qiáng)神經(jīng)橫斷后的神經(jīng)元存活時(shí)間;同時(shí),在神經(jīng)橫斷后EGCG處理的大鼠中可以檢測(cè)到顯著減少的蛋白caspase-3和COX-2的表達(dá),表明EGCG可有效保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞免受逆行細(xì)胞凋亡,并可增強(qiáng)神經(jīng)橫斷后的神經(jīng)元存活時(shí)間[51]。
BORUTINSKAITE˙V等[52]證明了EGCG抑制急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞增殖并引起細(xì)胞凋亡的能力表明EGCG作為細(xì)胞增殖抑制劑可能對(duì)白血病治療有用。
EGCG通過(guò)降低血清中肌鈣蛋白T水平和肌酸激酶,乳酸脫氫酶和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性,改善了糖尿病大鼠的心臟功能,此外EGCG還在支氣管哮喘,膀胱過(guò)度活動(dòng)癥(over active bladder,OAB)等方面有著廣泛的研究[53]。
EGCG可在治療肥胖,減少紫外線的損傷,保護(hù)神經(jīng),支氣管哮喘等方面均有良好的醫(yī)療效果,且已經(jīng)初步了解到作用機(jī)制,可以作為在新領(lǐng)域的研究的理論基礎(chǔ),現(xiàn)階段的研究已經(jīng)證明EGCG在多反面都具有良好的醫(yī)療效果,探究EGCG在更多方面的醫(yī)療效果會(huì)成為未來(lái)的研究方向。
茶葉中EGCG作為天然來(lái)源物質(zhì),近幾年在作為藥用的價(jià)值正被逐漸的開(kāi)發(fā)利用,而中國(guó)是全球最大的產(chǎn)茶的國(guó)家,ECGC通過(guò)多種作用機(jī)制在抗炎、抗病毒、抗炎癥、抗癌、抗氧化等方面發(fā)揮重要作用,研究表明EGCG可以單獨(dú)作用抑制病毒,病毒與靶細(xì)胞的結(jié)合,病毒衍生物,衍生顆粒,中間體,酶等抑制病毒的生長(zhǎng),還可以通過(guò)調(diào)節(jié)環(huán)境氧化還原環(huán)境等抑制病毒的生長(zhǎng);也可以通過(guò)和其他物質(zhì)的結(jié)合如CD4和納米材料的嵌合作用可在一定程度上增強(qiáng)其抗癌作用;還可以充當(dāng)酶的抑制劑和阻斷相關(guān)的作用因子阻礙病毒的復(fù)制;同時(shí)還有研究表示EGCG可以凝集病毒來(lái)防止病毒的繁殖,以依賴(lài)性方式減少癌細(xì)胞生長(zhǎng);在抗菌,抗炎癥和抗癌中,EGCG也發(fā)揮著相似的機(jī)制。
在已經(jīng)報(bào)道了EGCG的生物活性在諸多疾病中的作用,也部分報(bào)道了其作用機(jī)制,但是其作用機(jī)制大部分還是未知的,其次是所用EGCG都是提純的產(chǎn)物,很少有報(bào)道直接使用茶葉等天然食品來(lái)做相關(guān)研究的,這給茶葉等天然藥物也指明了研究方向,茶葉等天然植物能進(jìn)一步研發(fā)成更多產(chǎn)品,就可以極大助推天然植物產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,對(duì)茶葉中物質(zhì)的作用機(jī)理研究也提供了更為茶葉等制品充足的理論基礎(chǔ)。