常自強(qiáng)，范潤(rùn)月，鄧 波，饒安舉，劉 環(huán)

（川北醫(yī)學(xué)院 預(yù)防醫(yī)學(xué)系，四川 南充 637007）

鉛是一種重金屬環(huán)境污染物，不可降解且損害器官，能在體內(nèi)蓄積，并對(duì)神經(jīng)、消化、生殖等系統(tǒng)造成嚴(yán)重危害[1]?；ń肥撬拇ú说闹匾袅?，測(cè)定花椒中的鉛含量具有重要意義。在食品檢測(cè)樣本的前處理方法上，微波消解是近年來(lái)新興且高效的一種樣品前處理方法，是保證檢測(cè)結(jié)果可靠性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[2]。利用這種方法處理樣品不僅高效、快速、安全，而且準(zhǔn)確性高[3]。但影響微波消解效率的因素較多，而微波消解條件的設(shè)定是否恰當(dāng)，直接影響樣品前處理效果以及樣品中金屬元素測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性[4]。因此，本文利用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化，采用微波消解-原子吸收光譜法測(cè)定花椒中鉛的含量，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，探索花椒樣品的最佳前處理?xiàng)l件，得出更具有準(zhǔn)確性的數(shù)據(jù)，為花椒質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與試劑

微波消解儀（Titan MPS，鉑金埃爾默儀器有限公司）；酸蒸清洗儀（德國(guó)安東帕）；原子吸收光譜儀（PinAAcle 900T，鉑金埃爾默儀器有限公司）；硝酸（UPS級(jí)，蘇州晶瑞化學(xué)股份有限公司）實(shí)驗(yàn)室用水均為純凈水；1000μg/ml鉛標(biāo)準(zhǔn)液（中國(guó)有色金屬及電子材料分析測(cè)定中心）；過(guò)氧化氫（優(yōu)級(jí)純）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 微波消解條件的確定

以硝酸量（A）、消解壓力（B）、消解溫度（C）和保持時(shí)間（D）為試驗(yàn)因素，每個(gè)因素分別選定三個(gè)水平，以加標(biāo)回收率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，根據(jù)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)來(lái)設(shè)定消解程序組合（表1），篩選出花椒中鉛元素測(cè)定的最佳消解條件。按照正交表L9（34）共進(jìn)行9次實(shí)驗(yàn)，每次實(shí)驗(yàn)做3個(gè)平行樣本，3個(gè)平行加標(biāo)樣本，1個(gè)空白對(duì)照，最后得到63個(gè)樣液。

表1 微波消解正交試驗(yàn)因素水平表

1.2.2 樣品前處理

取7個(gè)消解罐，其中6個(gè)按1/1'、2/2'、3/3'順序編號(hào)加入0.3000g花椒粉末，1個(gè)消解罐作為空白對(duì)照。然后在每個(gè)消解罐中加入所需硝酸和2ml雙氧水，在1'、2'、3'消解罐中加入混和加標(biāo)液，靜置10分鐘～20分鐘，加蓋放入微波消解儀中進(jìn)行消解。

按照設(shè)定的微波消解程序（見(jiàn)表1）進(jìn)行消解，消解程序分為3步，固定第1步和第3步，以第2步待定的硝酸量、壓力、溫度和時(shí)間為試驗(yàn)因素，分別設(shè)定3個(gè)水平（見(jiàn)表1），表2中待定參數(shù)按照表1中數(shù)值進(jìn)行設(shè)定。

表2 微波消解程序

微波消解儀運(yùn)行結(jié)束后，取出消解罐置于通風(fēng)處冷卻至室溫，將消解罐中樣液倒出至聚四氟乙烯燒杯中，然后進(jìn)行加熱趕酸處理，待燒杯中的樣液減少至約1ml左右（黃豆樣大?。r(shí)，用少量的純凈水多次洗滌燒杯，合并洗滌液轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中，最后用純凈水定容，搖勻，備用。

1.3 測(cè)定方法

利用石墨爐原子吸收光譜儀，在工作條件下，測(cè)得各標(biāo)準(zhǔn)液濃度下的吸光度，得出鉛的標(biāo)準(zhǔn)曲線。石墨爐原子吸收光譜儀依次吸取消解處理后的花椒樣液，測(cè)定樣液中鉛元素的含量，通過(guò)計(jì)算得出加標(biāo)回收率。吸取標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的中間濃度，連續(xù)7次測(cè)定吸光度，得出花椒中鉛的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差值。試劑空白連續(xù)測(cè)定11次，得出鉛的檢出限值。

2 結(jié)果

2.1 正交試驗(yàn)結(jié)果

正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。根據(jù)極差（R）分析可得出影響微波消解效果的因素重要程度：消解壓力（B）＞硝酸量（A）＞消解溫度（C）＞保持時(shí)間（D）。微波消解最優(yōu)組合是A2B2C2D3，即優(yōu)化的消解條件是硝酸量6ml，消解壓力60bar，消解溫度170℃，保持時(shí)間25min。

表3 正交試驗(yàn)結(jié)果

K1、K2、K3分別為各因素在3個(gè)水平下的加標(biāo)回收率均值之和；R為同一因素的K1、K2、K3之間的極差。

2.2 精密度和檢出限值

為了驗(yàn)證本實(shí)驗(yàn)的可靠性，連續(xù)7次測(cè)定鉛標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的中間濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，得出花椒中鉛測(cè)定的精密度為0.21%。用石墨爐原子吸收光譜儀對(duì)空白試劑連續(xù)測(cè)定11次，得到鉛測(cè)定的檢出限值為0.24μg/L。

3 討論

3.1 結(jié)果分析

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，影響微波消解法測(cè)定花椒中鉛含量效率的因素依次是：消解壓力、硝酸量、消解溫度、保持時(shí)間，加標(biāo)回收率91%～104%，鉛測(cè)定的優(yōu)化條件是硝酸量6ml，消解壓力60bar，消解溫度170℃，保持時(shí)間25min。本實(shí)驗(yàn)測(cè)得鉛測(cè)定的精密度為0.21%，檢出限值為0.24μg/L。在國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)[5]，說(shuō)明本法具有良好的精密度，符合檢測(cè)分析鉛元素的要求。

3.2 實(shí)驗(yàn)方法分析

正交試驗(yàn)是一種適用于研究和分析多因素試驗(yàn)的科學(xué)方法，通過(guò)最少的試驗(yàn)次數(shù)獲知實(shí)驗(yàn)因素對(duì)效應(yīng)指標(biāo)的影響和最佳或較理想的試驗(yàn)條件，同時(shí)有效利用各因素間的均勻性分散及整齊可比性[6]。本次正交試驗(yàn)共進(jìn)行9次，相比于按舊方法進(jìn)行全面實(shí)驗(yàn)，共計(jì)需要81次實(shí)驗(yàn)，極大減少工作量和干擾，節(jié)約時(shí)間和資源。目前食品理化檢驗(yàn)常用的前處理方法：干法消解、濕式消解和微波消解[7]。朱醇[8]、夏慧杰[9]等研究表明三種前處理方法中，微波消解操作更為簡(jiǎn)便、耗時(shí)短、檢測(cè)效率高，環(huán)境污染較小，結(jié)果更為精確、穩(wěn)定。

綜上所述，本文選用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、微波消解前處理相結(jié)合的方法優(yōu)化花椒中鉛含量的前處理?xiàng)l件是科學(xué)高效、經(jīng)濟(jì)環(huán)保、穩(wěn)定可行的。