陳杏園 王敬仁 高 干 羅世強 唐 寧

(廣西柳州市婦幼保健院1 醫(yī)學(xué)遺傳科，2 柳州市出生缺陷預(yù)防與控制重點實驗室，3 檢驗科，柳州市 545001,電子郵箱：1411263743@qq.com)

在我國，每年宮頸癌的新發(fā)病例占全球新發(fā)病例的30%[1]。而人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一種嗜黏膜和皮膚上皮的病毒，是導(dǎo)致宮頸上皮增生和宮頸癌的主要因素[2]。目前已確認的HPV有100多種，有30多種亞型能導(dǎo)致宮頸病變，可分為高危型和低危型兩大類，其中將HPV6、HPV11、HPV40、HPV42、HPV43、HPV44、HPV54、HPV61、HPV70、HPV72、HPV81等歸為低危型，其與肛周皮膚尖銳濕疣等良性病變有關(guān)；高危型主要為HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV68、HPV73、HPV82等，是宮頸癌的常見致病因素[3]。HPV可垂直感染，所以孕前HPV篩查對預(yù)防新生兒感染極為重要。本文分析4 190例孕前女性HPV感染情況及其臨床特征，旨在為宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)及早期治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析2017年1月至2018年6月在廣西柳州市婦幼保健院行孕前檢查的4 190例女性的臨床資料，排除既往有宮頸HPV感染病史及1周內(nèi)有陰道用藥的女性。納入女性年齡17～48(34.1±3.2)歲，無癥狀1 277例(30.48%)，表現(xiàn)為宮頸炎2 811例(67.09%)，其他癥狀102例(2.43%)。宮頸炎診斷標準：陰道分泌物增多，多呈黏液膿性，或混有血；有外陰瘙癢及灼熱感等臨床癥狀，或者分泌物白細胞檢測、子宮頸取材病原體檢測陽性。

1.2 方法

1.2.1 試劑及儀器：HPV分型檢測試劑盒購自上海透景生命科技股份有限公司(批號：2018005)；Mastercycler Gradient擴增儀以及多功能流式點陣分析儀購自Eppendorf公司。

1.2.2 標本的獲?。阂詳U陰器暴露宮頸口，用棉拭子擦去宮頸口分泌物，將宮頸刷伸進宮頸口處，緊貼宮頸口順時針轉(zhuǎn)動4～5周，慢慢抽出宮頸刷，將其放進預(yù)裝細胞保存液的洗脫管中；在管口處沿刷柄折痕將宮頸刷折斷，宮頸刷頭留在洗脫液中；旋緊管蓋，做好樣本標識，并保持洗脫管直立放置。

1.2.3 HPV檢測方法:按說明書操作步驟提取DNA后進行PCR擴增。擴增反應(yīng)條件為95℃ 5 min，1個循環(huán)；95℃ 30 s、58℃ 30 s、72℃ 30 s，5個循環(huán)；95℃ 30 s、55℃ 30 s、72℃ 30 s，35個循環(huán)，72℃ 3 min，1個循環(huán)。PCR擴增結(jié)束后，按照試劑說明書加入雜交試劑進行雜交然后檢測，雜交條件為95℃ 5 min變性，48℃ 30 min雜交，48℃ 15 min孵育。用多功能流式點陣分析儀進行數(shù)據(jù)采集。

1.2.4 雜交結(jié)果判定：本研究共檢測27個HPV基因型，其中低危型HPV包括HPV6、HPV11、HPV40、HPV42、HPV43、HPV44、HPV55、HPV61、HPV81、HPV83；高危型HPV包括HPV16、HPV18、HPV26、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV82。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以例數(shù)(率)表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 HPV的陽性檢出率 4 190例標本中，陽性標本共757例，陽性檢出率為18.07%。檢出率位列前6位的HPV型別為HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV39、HPV18，均為高危型HPV，占51.38%(389/757)。見表1。

表1 各型HPV的陽性檢出情況

2.2 不同年齡段女性HPV陽性率比較 不同年齡段HPV陽性檢出率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=30.557，P<0.001)。≤20歲的孕前女性陽性率最高，但與其他年齡段女性比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 各年齡段女性孕前HPV陽性檢出率比較[n(%)]

2.3 不同臨床表現(xiàn)女性HPV陽性檢出率比較 不同臨床表現(xiàn)女性間HPV陽性檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=10.712，P=0.005)。宮頸炎女性的HPV陽性率高于其他臨床表現(xiàn)者(P<0.05)，但與無癥狀者比較，差異無統(tǒng)計意義(P>0.05)。見表3。

表3 不同臨床表現(xiàn)的女性孕前HPV陽性檢出率比較[n(%)]

3 討 論

宮頸癌是婦女第二大常見腫瘤，每年平均新發(fā)病患者人數(shù)約為50萬例，病死人數(shù)約為25萬例[4]。研究表明，從HPV感染到宮頸癌病變需要5～10年的時間[5]；有較大一部分女性為無癥狀攜帶，只有高危型的HPV持續(xù)感染才會有致病的風(fēng)險[6]。另有研究表明，母嬰HPV垂直感染率可達24.44%，且不同分娩方式HPV的垂直感染率差異無統(tǒng)計學(xué)意義[7]，因此孕前對HPV的篩查意義重大。目前，已經(jīng)形成的專家共識建議采用以病因?qū)W為主的高危型HPV檢測技術(shù)在我國大面積開展女性宮頸癌篩查[8]。臨床醫(yī)師根據(jù)共識意見對患者進行治療和管理的同時，應(yīng)該結(jié)合所在地的具體實際情況對患者進行正確的診斷和個體化治療。

本研究4 190例孕前女性的HPV陽性檢出率為18.07%，與趙菊芬等[9]報告的感染率相似，遠低于曾錦婷等[10]報告的感染率，這可能與就診人群不同及地域差別有關(guān)。本研究中，孕前女性生殖道感染的HPV以高危型感染為主，其中HPV52、HPV16、HPV58、HPV53的陽性檢出率居前4位。關(guān)于HPV感染的常見型別，國內(nèi)不同的研究所得結(jié)果有一定的差異，例如，趙海英等[11]報告HPV感染的常見型別為HPV16、HPV52、HPV58、HPV6，而吳銳浩等[12]報告的常見型別為HPV52、HPV53、HPV39、HPV16。雖然HPV基因分型具有較大的地區(qū)差異，但總體以高危型為主。

研究表明，隨著年齡增長，HPV感染率有逐漸增高的趨勢，其中≥59歲組的總感染率、多重感染率和高危型感染率均高于其他年齡組[13]。有學(xué)者報告≥61歲年齡組的HPV感染率最高，其次是51～60歲年齡組[14]，也有研究結(jié)果顯示≤25和>46歲年齡組的陽性檢出率均高于其他各組[15]。本研究中，≤20歲女性人數(shù)最少，但其HPV陽性檢出率卻很高，可能是由于這個年齡段的女性在發(fā)生性生活時缺乏自我保護意識所致，應(yīng)加強對青少年的宣傳教育工作；但≤20歲年齡組的人數(shù)相對較少，可能不足以代表真實情況；21～<31歲女性的HPV陽性檢出率也較高，可能原因是此年齡段的女性性生活較活躍。由于檢測人群及地域分布的不同，本研究納入的是17～48歲行孕前檢查的人群，因此與各地區(qū)的研究結(jié)果有所差異?？傊栽诟髂挲g段都應(yīng)加強預(yù)防HPV感染并且要定期進行HPV篩查。

此外，本研究中大部分女性具有宮頸炎的表現(xiàn)，其HPV陽性檢出率達19.17%，而無癥狀者的HPV陽性檢出率達16.37%，但與宮頸炎女性差異并無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。因此，HPV檢測不僅有利于對宮頸炎患者進行病因的精確診斷，且對于無癥狀人群也有重大意義，有助于預(yù)防宮頸疾病的發(fā)生。

綜上所述，孕前女性的HPV感染以高危型為主，傾向年輕化；宮頸炎患者與無癥狀人群的HPV陽性檢出率無明顯差異，因此對無癥狀攜帶患者的篩查也不容忽視。