張延智，劉佳樂(lè)，杜一民，陳旭冰,2*

(1.大理大學(xué)藥學(xué)院，云南 大理 671000；2.云南省昆蟲(chóng)生物醫(yī)藥研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 大理 671000)

滇龍膽 (Gentiana rigescens)，又名堅(jiān)龍膽、苦草、青魚(yú)膽、小秦艽，為龍膽科 (Gentianaceae) 多年生草本植物，生于海拔1100～3000米的山坡草地灌叢、林下及山谷，主要產(chǎn)于云南、四川和貴州[1]。龍膽味苦、性寒，具有清熱燥濕，瀉肝定驚的作用，主治濕熱黃疸、小便淋痛、陰腫陰癢、濕熱帶下、肝膽實(shí)火之頭脹頭痛、目赤腫痛、耳聾耳腫、肋痛口苦、熱病驚風(fēng)抽搐[1]?！兜崮媳静荨酚涊d，苦龍膽草，一名地膽草，味苦，性大寒，治咽喉疼痛，洗疥瘡腫毒。

對(duì)滇龍膽化學(xué)成分的研究較多，研究人員從滇龍膽的根和根莖中發(fā)現(xiàn)了大量化合物，其中龍膽苦苷(gentiopicroside)、獐牙菜苦苷(swertiamarin)、獐牙菜苷(sweroside)、馬錢(qián)子苷酸(lognic acid)、熊果酸(ursolic acid)、齊墩果酸(oleanolic acid)、龍膽堿(gentianine)等為滇龍膽的主要化學(xué)成分和藥效成分?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，滇龍膽不僅具有瀉火保肝、解熱鎮(zhèn)痛的傳統(tǒng)藥理作用，還有抗腫瘤、抑制甲狀腺亢進(jìn)、促膠原蛋白合成、促神經(jīng)元再生等新的藥理活性。本文對(duì)近年來(lái)滇龍膽的化學(xué)成分及藥理作用研究作一歸納總結(jié)，為滇龍膽的開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 滇龍膽的化學(xué)成分

1.1 環(huán)烯醚萜類(lèi)成分

環(huán)烯醚萜類(lèi)成分是滇龍膽的主要化學(xué)成分之一。1982年，陸蘊(yùn)如[2]首次從滇龍膽中分離出化合物龍膽苦苷(1)。Liu H，Jiang R W等人[3,4]從滇龍膽中分離出龍膽苦苷和獐牙菜苦苷(2)，gentiotrifloroside(3)，獐牙菜苷(4)。2006年，Xu M等[5]從滇龍膽中分離出了一種新的裂環(huán)烯醚萜類(lèi)化合物堅(jiān)龍膽A(5)，以及其它幾種已知的化合物，即龍膽苦苷，獐牙菜苷，獐牙菜苦苷，馬錢(qián)苷酸(6)，6 '-Ο-β-D-吡喃葡萄糖基-龍膽苦苷(7)，6 '-Ο-β-D-吡喃葡萄糖基-馬錢(qián)苷酸(8)，四乙酰開(kāi)聯(lián)番木鱉苷(9)。2013年，Suyama Y[6]從滇龍膽中分離到了4種新的環(huán)烯醚萜類(lèi)化合物，分別是rigenolide A (10)，2 '-(2,3-二羥基苯甲酰)-龍膽苦苷(11)，3 '-(2,3-二羥基苯甲酰)- 獐牙菜苷 (12)，2 '-(2,3-二羥基苯甲酰)-獐牙菜苦苷(13)。見(jiàn)表1。

1.2 三萜類(lèi)成分

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，共有14個(gè)三萜類(lèi)化合物從滇龍膽中被分離出來(lái)。2002年，Xu M等[7]從滇龍膽根部分離得到6種達(dá)瑪烷型三萜類(lèi)化合物，分別是gentirigenic acid(14)和gentirigeoside A～E(15～19)。2009年，趙磊等[8]從滇龍膽的地上部分分離得到6個(gè)三萜類(lèi)化合物，分別為熊果酸(20)，齊墩果酸(21)，α-香樹(shù)脂醇(22)，α-香樹(shù)脂醇棕櫚酸酯(23)，β-香樹(shù)脂醇(24)和β-香樹(shù)脂醇棕櫚酸酯(25)。朱衛(wèi)萍等[9]從滇龍膽中分離得到羽扇豆醇(26)和羽扇豆醇棕櫚酸酯(27)。見(jiàn)表1。

1.3 黃酮類(lèi)成分

2009年，趙磊等[8]從滇龍膽地上部分中分離得到肥皂草素(28)，異肥皂草素(29)和異葒草素(30)。Xu M等[10]從滇龍膽根部分離出化合物異葒草素-3 '-Ο-β-D-葡萄糖苷(31)。見(jiàn)表1。

1.4 木脂素類(lèi)成分

滇龍膽中也含有木脂素類(lèi)成分，Xu M等[10]從滇龍膽中分離得到鵝掌楸堿(32)，Tortoside B(33)，(-)-丁香脂素-Ο-β-D-葡萄糖苷(34)，(-)-松脂醇-Ο-β-D-葡萄糖苷(35)，(-)-7R,8S-Dehydro-diconiferyl alcohol-4,9'-di-Ο-β-D-glucoside (36)和(-)-7R,8S-Dehydro-diconiferyl alcohol-4-Ο-β-D-glucoside(37)。朱衛(wèi)萍等[9]也從滇龍膽中分離得到鵝掌楸堿。見(jiàn)表1。

1.5 生物堿類(lèi)成分

20世紀(jì)80年代，孫南君和夏春芳[11]從滇龍膽地上部分分離出龍膽堿(秦艽堿甲)(38)、龍膽次堿(秦艽堿乙)(39)和龍膽醛堿(秦艽堿丙)(40)。但是楊書(shū)彬[12]、楊維霞[13]等人認(rèn)為從滇龍膽中提取分離到的生物堿很可能不是天然的，而是在提取過(guò)程中加氨水與滇龍膽中其它成分反應(yīng)轉(zhuǎn)化而來(lái)的。見(jiàn)表1。

1.6 苯甲酸酯類(lèi)成分

近年來(lái)，研究人員從滇龍膽中分離和鑒定出一系列苯甲酸酯類(lèi)成分，共有11種，分別被命名為苯甲酸酯A～K(41-51)[14-16]。見(jiàn)表1。

1.7 其他化學(xué)成分

據(jù)報(bào)道，滇龍膽中含有多糖類(lèi)成分，趙磊等人[8-10]從滇龍膽中分離得到2,3-二羥基苯甲酸酯3-Ο-β-D-葡萄糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(52)，2,5-二羥基苯并5-Ο-β-D-木糖基-(1→6)-Ο-β-D-葡萄糖苷(53)，4-Ο-β-D-葡萄糖基-丁香酸(54)，2-羥基-3-甲氧基苯甲酸葡萄糖酯(55)，3,5-二甲氧基-4-對(duì)羥基甲醇-4-Ο-β-D-葡萄糖苷(56)，香草基乙醇-Ο-β-D-葡萄糖苷(57)，4-羥基-3-甲氧基苯基-Ο-β-D-木糖基-(1→6)-Ο-β-D-葡萄糖苷(58)，3-Ο-β-D-咖啡酸苷(59)，Oct-1-en-3yl arabinosyl-(1→6)-Ο-β-D-glucoside(60)，胡蘿卜苷(61)，β-龍膽二糖(62)。見(jiàn)表1。

表1 滇龍膽中的化學(xué)成分

表1(續(xù))

2 滇龍膽的藥理作用

2.1 保肝作用

龍膽苦苷是滇龍膽的主要成分之一，研究發(fā)現(xiàn)[17,18]，龍膽苦苷能明顯降低CCl4所致的急性肝損傷小鼠血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)水平，增加肝組織中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)的活性，促進(jìn)膽汁分泌，增加膽汁中膽紅素的濃度，具有明顯的保肝作用。Luo Y D等[19]通過(guò)微量透析技術(shù)對(duì)給藥小鼠的血漿進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)獐芽菜苷與獐牙菜苦苷口服易吸收、代謝，具有高效的保肝作用。Lian L H[20]等通過(guò)D-半乳糖胺和脂多糖誘導(dǎo)的小鼠肝損傷模型實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)龍膽苦苷有明顯的保肝作用。Tang X W[21]等通過(guò)α-荼基異硫氰酸鹽誘導(dǎo)小鼠膽汁淤積肝損傷模型的研究發(fā)現(xiàn)，龍膽苦苷能夠改善膽酸的代謝，使細(xì)胞內(nèi)膽酸的代謝顯著降低回到正常水平，其保護(hù)機(jī)制與膽酸相關(guān)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的調(diào)節(jié)有關(guān)。

2.2 抗炎、鎮(zhèn)痛作用

余昕等[22,23]采用二甲苯致小鼠耳腫脹模型、冰醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性模型、角叉菜膠致大鼠足跖腫脹模型和角叉菜膠致大鼠胸腔炎癥模型，篩選堅(jiān)龍膽抗炎作用的活性部位及其抗炎機(jī)制，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與模型組比較,各模型組小鼠耳廓腫脹、小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性、大鼠足跖腫脹、大鼠胸腔及肺組織的炎癥因子NO,PGE2,TNF-α,IL-1β,MDA均明顯增高;與空白組比較,水部位高、中劑量對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹,急性炎癥導(dǎo)致的腹腔毛細(xì)血管通透性,角叉菜膠引起的大鼠足跖腫脹均有顯著抑制作用,堅(jiān)龍膽水部位組能抑制胸腔液MDA,PGE2,TNF-α,IL-1β含量升高,堅(jiān)龍膽水部位組能抑制肺組織NO,MDA,PGE2,TNF-α,IL-1β含量升高。堅(jiān)龍膽水部位為抗炎活性部位,抗炎機(jī)制可能與影響炎癥介質(zhì)產(chǎn)生和抗氧化作用有關(guān)。沈磊等[24]用二甲苯致小鼠耳腫脹模型比較滇龍膽不同部位提取物的抗炎作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，滇龍膽不同部位提取物能劑量依賴(lài)性地減輕二甲苯致炎小鼠的耳腫脹程度，且葉和莖的抑制作用要優(yōu)于花和根。陳雷等[25]采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹、蛋清致大鼠足跖腫脹急性炎癥模型及大鼠肉芽腫慢性炎癥模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，研究發(fā)現(xiàn)，在小鼠醋酸扭體和熱板法實(shí)驗(yàn)中，龍膽苦苷能減少扭體次數(shù)，提高小鼠痛域閾值，呈良好的量效關(guān)系。龍膽苦苷明顯減輕了二甲苯致小鼠耳廓腫脹，降低蛋清致大鼠足趾腫脹，抑制了大鼠肉芽腫。 結(jié)果表明龍膽苦苷對(duì)熱和化學(xué)刺激引起的疼痛反應(yīng)有明顯的鎮(zhèn)痛作用，對(duì)急、慢性炎癥反應(yīng)均有一定的抑制作用。

2.3 抑菌作用

Bibi[26]等的實(shí)驗(yàn)研究表明，龍膽堿對(duì)釀膿鏈球菌和金黃色葡萄球菌具有較高抑菌活性，而對(duì)普通變形桿菌、克雷伯氏肺炎桿菌、大腸埃希菌和傷寒桿菌抑菌活性較低。Xu M[10]等從滇龍膽中分離出兩種酚苷3-O-β-D-glucopyranosyl-(1-6)-β-D-glucopyranoside和2,5-dihydroxylbenzofuran 5-O-β-D-xylopyranosyl-(1-6)-O-β-D-glucopyranoside，通過(guò)紙片擴(kuò)散法對(duì)荔枝霜疫霉病菌、植物病原菌、蘋(píng)果炭疽病菌和香蕉炭疽病菌的抗真菌實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，化合物3-O-β-D-glucopyranosyl-(1-6)-β-D-glucopyranoside對(duì)荔枝霜疫霉病菌和香蕉炭疽病菌有抑制作用，化合物2,5-dihydroxylbenzofuran 5-O-β-D-xylopyranosyl-(1-6)-O-β-D-glucopyranoside對(duì)4種真菌無(wú)活性。

2.4 抗腫瘤作用

齊墩果酸與熊果酸最主要的藥理作用在于抗腫瘤，Li J等[27]通過(guò)四唑染色法的實(shí)驗(yàn)研究表明熊果酸與齊墩果酸都有抗腫瘤作用，且熊果酸的抗腫瘤活性要稍強(qiáng)于齊墩果酸。

2.5 預(yù)防糖尿病作用

Hitesh Vaidya等[28]通過(guò)對(duì)3T3-L1細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，獐芽菜苦苷對(duì)PPAR-γ和GLUT-4的mRNA的表達(dá)沒(méi)有作用，而能顯著提高脂連素的mRNA的表達(dá)。龍膽堿能顯著提高PPAR-γ、GLUT-4和脂連素的mRNA的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，獐芽菜苦苷是通過(guò)其活性代謝產(chǎn)物龍膽堿，來(lái)調(diào)整PPAR-γ、GLUT-4和脂連素的mRNA的基因表達(dá)，起到預(yù)防糖尿病的作用。

2.6 對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用

Gao L J等[14]從滇龍膽中分離得到的2個(gè)2,3-二羥基苯甲酸酯成分gentiside A和gentiside B，在濃度為30μM時(shí)能促進(jìn)PC12神經(jīng)細(xì)胞增殖。

2.7 其他作用

實(shí)驗(yàn)表明，滇龍膽還有抑制甲狀腺功能亢進(jìn)作用，其作用機(jī)制是抑制肝臟對(duì)皮質(zhì)醇滅活,并可抑制甲亢大鼠肝臟中的類(lèi)固醇還原酶活性,從而起到抑制甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)的功效[29]。此外，滇龍膽還有預(yù)防人體免疫缺陷類(lèi)疾病的作用[30]。

3 討論

滇龍膽是我國(guó)特有的藥用本草，也是《中國(guó)藥典》收錄的四大龍膽品種之一，憑借其多種藥理作用，尤其是在保肝、健脾方面展現(xiàn)出的良好功效，使其在臨床上得以廣泛應(yīng)用。隨著對(duì)化學(xué)成分研究的不斷深入,藥理研究也從對(duì)提取物研究轉(zhuǎn)向?qū)误w化合物篩選。但藥理實(shí)驗(yàn)僅僅針對(duì)某一單體化合物或某一類(lèi)成分進(jìn)行研究，對(duì)于滇龍膽中各成分之間是否有協(xié)同或抑制作用仍不清楚，尚需進(jìn)行大量研究。由于滇龍膽的藥用部位主要在其根及根莖，地上部分暫被作為棄物處理,因此，要加強(qiáng)對(duì)滇龍膽地上部分資源的評(píng)價(jià)研究。