王思宇，李銀江，歐陽依娜，李衛(wèi)娟，姚新榮，梁家充，薛 白，洪瓊花*

（1.云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，云南昆明650224；2.云南省種羊繁育推廣中心，云南尋甸655204；3.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所，四川成都611130）

母羊空懷期是斷奶后至配種受胎的準(zhǔn)備階段，此期飼養(yǎng)目標(biāo)是恢復(fù)體況，達(dá)到配種要求（謝艷麗等，2011）。飼糧蛋白質(zhì)水平不僅對動物增重有影響，還對母羊發(fā)情、排卵和胚胎早期發(fā)育等繁殖性能有影響。蛋白質(zhì)不足可導(dǎo)致母體發(fā)情排卵推遲，空懷期延長（閆學(xué)志，2017）；適當(dāng)提高飼糧蛋白質(zhì)水平可增加母羊排卵、提高發(fā)情率（楊寧等，2009）；但攝入過多的蛋白質(zhì)，氮代謝產(chǎn)生過多的氨和尿素可能會損傷卵子和胚胎、影響子宮酸堿環(huán)境、降低孕酮濃度而使受精率下降、影響胚胎的生長發(fā)育從而降低母羊繁殖率（閆學(xué)志，2017）。因此飼糧蛋白質(zhì)水平過高過低均不利于生產(chǎn)。NRC綿羊需要量標(biāo)準(zhǔn)（第六版）中50～60 kg體重的母羊日增重10 g/d時建議蛋白質(zhì)攝入量為95～104 g/d，配種前兩周補(bǔ)飼日增重100 g/d時為150～157 g/d。目前，針對綿羊空懷期的營養(yǎng)研究，特別是飼糧蛋白質(zhì)水平對云南半細(xì)毛羊的研究鮮見報道。因此，本研究旨在通過探討不同蛋白質(zhì)水平飼糧對云南半細(xì)毛羊空懷母羊增重及與蛋白質(zhì)代謝的作用，為其科學(xué)飼養(yǎng)提供理論基礎(chǔ)，也為云南半細(xì)毛羊繁殖激素的進(jìn)一步研究提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物 選擇50只體況良好、無疾病、體重（52.91±4.33）kg、38月齡的經(jīng)產(chǎn)兩胎空懷期云南半細(xì)毛羊母羊開展試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計 試驗(yàn)開始前使用獸藥阿苯達(dá)唑、伊維菌素、球蟲凈和氯氰碘柳胺鈉按照使用說明進(jìn)行驅(qū)蟲。試驗(yàn)動物平均分為5組，每組10只，分別飼喂蛋白質(zhì)水平為8.44%、9.95%、12.31%、13.58%、15.90%的飼糧，飼糧配方及營養(yǎng)水平見表1。所有試驗(yàn)羊在羊舍單欄（每欄一只羊）飼喂，進(jìn)行為期44 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)，包括14 d預(yù)試期和30 d正式試驗(yàn)。預(yù)試期間每天08:00、17:00各喂料1次，自由飲水，每天記錄每只試驗(yàn)羊的采食量，根據(jù)前一天的采食量調(diào)整第2天飼喂量，確保有10%左右的剩料。飼喂時將小黑麥草直接放于料槽中，精料和小麥秸（粉狀）混合后置于塑料盆（每只羊單獨(dú)使用一個塑料盆）中，塑料盆置于料槽中。每天記錄采食量時用總飼喂量減去剩料量。正試期每天的飼養(yǎng)管理同預(yù)試期。

1.3 測定指標(biāo)及方法

1.3.1 生產(chǎn)性能指標(biāo) 試驗(yàn)羊稱重均為早上空腹稱重。預(yù)試期開始時稱重后即進(jìn)行分組，對各組羊體重均值進(jìn)行統(tǒng)計分析，如果組間有差異則進(jìn)行羊只調(diào)整，直至差異不顯著。正試期開始時再次稱重并進(jìn)行統(tǒng)計分析，如果各組體重均值有差異則調(diào)整羊只分組使差異不顯著并延長預(yù)試期14 d，如果各組體重均值無差異則開始正式試驗(yàn)。正試期結(jié)束時羊只稱重。正試期每天記錄每只試驗(yàn)羊的采食量。計算正試期間的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.3.2 血清指標(biāo) 每組隨機(jī)選擇5只羊在正式試驗(yàn)結(jié)束前3 d晨飼前于頸靜脈實(shí)行無菌采血，連續(xù)采血3 d，檢測結(jié)果取3 d的均值。每只試驗(yàn)羊采血10 mL，靜置30 min后于3000 r/min離心20 min，獲得血清，將血清分裝于1.5 mL離心管內(nèi)，于-20℃冰柜中保存待測。

血清促卵泡素（FSH）、雌二醇（E2）、促黃體生成素（LH）、孕酮（PROG）和LEP使用酶標(biāo)儀（Molecular Devices公司，Versa Max型），按照試劑盒說明書測定；BUN使用紫外可見分光光度計（尤尼柯，UV-2600型），按照試劑盒說明書測定；FSH、E2、LH、PROG和BUN試劑盒購自南京建成海浩生物科技有限公司；LEP試劑盒購自上海浩本生物科技有限公司。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，多重比較采用LSD法，試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 不同蛋白質(zhì)水平飼糧對云南半細(xì)毛羊空懷母羊生長性能的影響 由表2可知，各組初始體重、末重和料重比差異均不顯著（P＞0.05）。組3的平均日增重較組2顯著降低31.00%（P＜0.05），其余各組的差異不顯著（P＞0.05）。組3的日采食量較組2顯著降低8.72%（P＜0.05），其余各組間差異不顯著（P＞0.05）。從組1到組5日均蛋白質(zhì)采食量顯著增加（P＜0.05），且除組2與組3間未達(dá)極顯著水平外，其余各組間差異均達(dá)極顯著水平 （P＜0.01），其中組2較組1提高24.04%（P＜0.01）、組3較組2提高13.10%（P＜0.05）、組4較組3提高14.45%（P＜0.01）、組5較組4提高14.85%（P＜0.01）。

2.2 不同蛋白質(zhì)水平飼糧對BUN、LEP及繁殖激素的影響 由表3可知，各組的促卵泡素和促黃體素濃度沒有顯著差異（P＞0.05）。對于血清雌二醇（E2）濃度，組3較組1極顯著提高128.60%（P＜0.01）、較組2極顯著提高133.38%（P＜0.01）；組4的E2水平較組1和組2分別顯著提高53.77%（P＜0.05）和56.98%（P＜0.05）；組5的E2水平較組1和組2分別顯著提高78.33%（P＜0.05）和82.06%（P＜0.05）；組4的E2水平較組3顯著降低32.74%（P＜0.05），但與組5差異不顯著（P＞0.05）。從組1至組4，孕酮（PROG）濃度逐漸升高，組4濃度較組1極顯著提高61.21%（P＜0.01），較組2顯著提高46.60%（P＜0.05）；組5的PROG濃度與組4差異不顯著（P＞0.05），但較組1顯著提高42.70%（P＜0.05）。隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高，BUN濃度逐漸增加，各組差異均達(dá)到顯著水平（P＜0.05），并且除第3組和第4組外，其余各組間差異達(dá)到極顯著水平 （P＜0.01）。從組2到組5依次較前一組提高34.65%（P＜0.01）、34.94%（P＜0.01）、7.29%（P＜0.05）、10.12%（P＜0.01）。對于瘦素（LEP），組5較組2顯著降低29.23%（P＜0.05），較組4降低36.11%（P＜0.05），其余各組間差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

日增重是衡量動物生長速度的重要指標(biāo)，目前很多研究結(jié)果認(rèn)為，羊的日增重隨著飼糧蛋白質(zhì)含量的增加先增加而后下降或者增重不顯著（田春麗，2015）。本研究中從組1到組5，飼糧蛋白質(zhì)含量依次升高，日均蛋白質(zhì)采食量也顯著增加，日增重除第3組較第2組顯著下降外，其余各組沒有差異。組1、組2、組4和組5的空懷母羊日增重沒有顯著差異。組3日增重與組2差異大，日增重的變化規(guī)律與采食量一致，因此推測組3日增重低的主要原因是采食量偏低。隨著動物體重和月齡的增加，生長速度逐漸下降，日增重水平有所降低，有研究表明，體重約36 kg時日增重可達(dá)120～226 g（哈麗代等，2016；王斌星等，2016），體重約40 kg的成年母羊日增重多為35～92 g（王惠，2012；趙玉民，2005）。有研究報道在放牧條件下，云南半細(xì)毛羊母羊在3歲左右體重達(dá)到約50 kg，其后體重緩慢下降（李高榮等，2001）。本研究中母羊體重約為54 kg，日均增重為69～100 g，取得了較好的生長速度，一是得益于充足的營養(yǎng)供給；二是舍飼條件下動物運(yùn)動量小，耗能少。哺乳結(jié)束后母羊體重一般較配種所需的理想體重低2～3 kg（周利勇，2012），按照母羊兩年產(chǎn)三胎的繁殖計劃，空懷期一般為1個月，據(jù)此估算1個月增重2～3 kg，則日增重應(yīng)在65～100 g/d。本研究中除組3外，其余各組的日增重均在80 g/d以上，可達(dá)到增重要求。各組料重比沒有差異，從飼糧成本來看，主要使用的蛋白質(zhì)飼料豆粕和菜籽粕價格較高，兩者比例從組1到組5逐漸上升，飼糧成本也隨之升高?？紤]到組2（9.95%蛋白質(zhì)水平）表現(xiàn)出最快生長速度，因此9.95%的飼糧蛋白質(zhì)水平更為適宜。

有研究認(rèn)為蛋白質(zhì)水平會影響動物采食量，趙智華等（2009）的研究中設(shè)計飼糧蛋白質(zhì)水平為8.23%、10.42%和12.52%，結(jié)果表明，動物采食量隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高有增加的趨勢。本研究中日均干物質(zhì)采食量除組3顯著低于組2外，其余各組差異不顯著。代謝能和粗蛋白質(zhì)均是影響采食量的重要因素（劉金祥等，2001），本研究中設(shè)置了蛋白質(zhì)水平梯度，代謝能保持一致，但代謝能數(shù)值為計算值，不排除實(shí)際值與計算值有一定差異的可能性。因此組3采食量偏低可能是飼糧代謝能產(chǎn)生的差異。

表2 飼糧蛋白質(zhì)水平對空懷母羊生長性能的影響

表3 飼糧粗蛋白質(zhì)水平對BUN、LEP和繁殖激素的影響

對羊料重比的報道多見于生長期的研究，3～4月齡體重30 kg以下的羊料重比約為4.5～8.5，體重在30～35 kg時料重比約為7.5～12.5，體重在36～40 kg時則為8.8～17（唐丹等，2017；史曉雪等，2017）。育成后期母羊料重比在6～8.4（劉寧，2016）。目前鮮有對空懷期、妊娠期和哺乳期羊料重比的報道。有研究表明，料重比隨著羊年齡和體重的增長而增大，飼料轉(zhuǎn)化效率逐漸降低。本研究中各組料重比均值為20.5（P＞0.05），數(shù)值偏大，可能是由于試驗(yàn)羊已成年，飼料轉(zhuǎn)化效率變低。

空懷期使羊體況恢復(fù)、盡早發(fā)情、增加排卵、提高配種成功率，可以提高母羊的生產(chǎn)效率。母羊繁殖性能主要受到下丘腦-垂體-性腺軸激素的作用，其中FSH、LH、E2和PROG是重要的調(diào)控激素。相比日糧蛋白質(zhì)水平的差異，繁殖激素濃度主要受到羊只繁殖周期的影響。目前尚缺乏對云南半細(xì)毛羊繁殖激素的相關(guān)研究，繁殖激素的作用濃度還有待精確，本研究中結(jié)果可為進(jìn)一步研究云南半細(xì)毛羊繁殖激素的濃度提供參考。

BUN來源于機(jī)體蛋白、氨基酸降解和瘤胃吸收的氨氮，是反映反芻動物蛋白質(zhì)代謝的重要指標(biāo)（火靜萍，2015）。尿素氮與體內(nèi)氮沉積和蛋白利用率呈負(fù)相關(guān)（火靜萍，2015）。BUN低說明動物可有效利用飼糧中氮、蛋白質(zhì)或氨基酸，蛋白質(zhì)沉積率高；BUN高表明較多蛋白質(zhì)被氧化代謝，造成了蛋白質(zhì)飼料的浪費(fèi)（王興濤等，2016）。李志靜等（2014）報道，BUN正常為3.5～16 mmol/L，在本研究中各組BUN濃度均在此范圍內(nèi)，且隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高顯著增加，這與雷耀庚（2015）等的研究結(jié)果一致，也符合蛋白質(zhì)代謝規(guī)律。

LEP是一種由脂肪細(xì)胞分泌的蛋白質(zhì)，其是一種可控制采食量，調(diào)節(jié)體重的因子，生理作用涉及泌乳、能量、發(fā)情和免疫等方面（王春艷等，2012）。羊血清LEP濃度在0.5～35 ng/mL（張秋旭等，2018；石國慶等，2008），不同品種、不同性別的羊血清LEP濃度差異較大。在本研究中隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高，LEP的濃度變化沒有明顯規(guī)律，各組采食量、日增重變化與LEP水平也不一致，說明飼糧蛋白水平可能對LEP沒有影響。LEP對繁殖性能的作用一般認(rèn)為是通過調(diào)節(jié)促性腺激素釋放激素（GnRH）神經(jīng)元的活性和分泌，從而促進(jìn)LH和FSH的分泌（Kamalamma等，2016；Vázquez等，2015）。黃欽華（2012）的研究中LEP表現(xiàn)出與FSH和LH相同的變化規(guī)律，但也有學(xué)者認(rèn)為LEP對FSH和LH影響結(jié)果不一致，有的FSH和LH分泌量隨LEP濃度的提高先上升后下降，有的隨著LEP濃度變化LH水平變化但FSH無變化（石國慶等，2009）。本研究結(jié)果中LEP水平與LH、FSH濃度變化沒有顯著規(guī)律，可能一方面LEP受到飼糧和動物體脂肪水平的影響（李興升等，2003），另一方面FSH與LH的分泌也受發(fā)情周期影響。

4 結(jié)論

本研究中飼糧蛋白質(zhì)水平為9.95%時表現(xiàn)出較好的采食量和較快的生長速度，而料重比、BUN相對不高，因此在實(shí)際生產(chǎn)中推薦云南半細(xì)毛羊母羊空懷期的飼糧蛋白質(zhì)水平為9.95%。