郭丹丹

（長治職業(yè)技術(shù)學(xué)院，山西長治046000）

目前，犬只各種傳染病流行十分嚴(yán)重，大多數(shù)由于幼齡犬在被動免疫和主動免疫時期免疫系統(tǒng)缺陷。被動免疫時期，研究發(fā)現(xiàn)未哺乳初乳或者被動免疫較差幼犬可使用血清（Greene，1984；Fisher，1982）來提高免疫力，但是免疫劑量和注射時間目前還沒有較為明確的結(jié)論。隨著幼齡犬的生長，母源抗體在體內(nèi)逐漸衰減，主動免疫期間還要輔助人工免疫以保證體內(nèi)免疫抗體（黃利權(quán)，2011）。目前寵物犬人工免疫大多還是人工注射抗體，但往往會因疫苗質(zhì)量、疾病、先天性遺傳免疫缺陷、藥物干擾以及生長環(huán)境影響等造成免疫失敗，通過其他手段來提高幼齡犬免疫力尤其是通過調(diào)整飲食結(jié)構(gòu)越來越受到關(guān)注。中草藥在我國使用歷史悠久，可調(diào)節(jié)機體新陳代謝，改善生長性能（李艷艷等，2018）。此外中草藥大多從天然植物中提取，具有來源廣、成本低、副作用低等優(yōu)點。因此，開發(fā)復(fù)方中草藥制劑為提高幼齡寵物犬免疫力提供了新途徑。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 復(fù)方中草藥由黨參、炒白術(shù)、甘草、黃芪、蒲公英等12味中草藥組成。干燥箱58℃烘干3 h后100目粉碎，密封保存。

1.2 試驗動物 試驗小型寵物犬是由成都荷花池花鳥魚市場購買的3月齡左右健康貴賓犬，平均體重2 kg。

1.3 試驗設(shè)計 采用單因子試驗設(shè)計，選取健康的貴賓犬27只，隨機分為3組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)3只，對照組P0飼喂基礎(chǔ)日糧，P1、P2組在基礎(chǔ)日糧中分別添加1%、2%復(fù)方中草藥制劑。每日3次，定時飼喂，自由采食與飲水。試驗基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.4 血樣樣品采集 飼喂42 d后，每組隨機選取6只，前腔靜脈采全血2 mL，3500 r/min離心10 min，分離血清，-20℃冰箱保存。

1.5 測定指標(biāo)

1.5.1 生長性能 試驗結(jié)束時，空腹稱重，計算耗料量、平均日采食量、日增重、料重比以及腹瀉率。

1.5.2 超氧化物歧化酶活性 超氧化物歧化酶活性測定試劑盒購自南京建成生物工程研究所，采用UNIC-UV-2800（4 nm）紫外可見分光亮度計測定。

1.5.3 免疫指標(biāo)的測定 血清中IgA、IgG、IgM采用免疫比濁法測定，試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.6 統(tǒng)計分析 試驗結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用SPASS 9.1進行單因素方差分析，多重比較采用Duncan’s法。

表1 試驗基礎(chǔ)日糧組成和營養(yǎng)水平

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)方中草藥對貴賓犬生長性能和采食量的影響 由表2可知，添加復(fù)方中草藥制劑后P1、P2組日增重較對照組分別提高59%、52.1%（P＜0.05），日采食量分別提高56.1%、27.9%（P＜0.05），腹瀉率和料重比均顯著性降低（P＜0.05）。

表2 復(fù)方中草藥制劑對貴賓犬生長性能的影響

2.2 復(fù)方中草藥對貴賓犬血清中超氧化物歧化酶活性的影響 由表3可知，日糧中添加復(fù)方中草藥制劑后P1和P2組血清SOD活性均顯著高于P0組（P＜0.05），并且有緩慢遞增的趨勢。

2.3 復(fù)方中草藥對貴賓犬免疫指標(biāo)的影響 由表4可知，血清中IgM含量三組均無顯著性差異（P＞0.05），P1、P2組血清IgA含量較P0組顯著提高，且隨著劑量增加顯著性升高（P＜0.05），P1和P2組血清中IgG含量較P0組顯著升高，但P1和P2組之間差異不顯著（P＞0.05）。

表3 復(fù)方中草藥對貴賓犬超氧化物歧化酶（SOD）活性的影響U/L

3 討論

3.1 復(fù)方中草藥制劑對生長性能的影響 本研究表明，在日糧中添加復(fù)方中草藥制劑可以改善貴賓犬生長性能。這與其他畜禽類研究結(jié)果基本一致（李玉，2011；張世昌等，2010）。本試驗添加量為1%時效果較好，可能是因為添加過量的復(fù)方中草藥制劑日糧的口感變差，進而影響了貴賓犬的采食量。本研究表明復(fù)方中草藥制劑顯著降低了腹瀉率。韓劍眾等（2002）研究表明，復(fù)方中草藥有效成分抽提物能夠抑制多種腸道致病菌。推測復(fù)方中草藥制劑降低貴賓犬腹瀉率極有可能是通過抑制腸道致病菌，起到防止腹瀉的作用。

3.2 復(fù)方中草藥制劑對超氧化物歧化酶活性的影響 超氧化物歧化酶是一種廣泛存在于動植物、微生物中的金屬酶。其能催化生物體內(nèi)超氧自由基（O2-）發(fā)生歧化反應(yīng)，是機體內(nèi)天然消除劑（黎瑞珍等，2004）。在動植物自我保護系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)起到重要作用。本研究表明日糧中添加復(fù)方中草藥制劑后，經(jīng)過42 d飼喂，P1、P2組血清中SOD活性顯著高于P0組，且P2組活性最強。以往研究表明，許多中草藥都可以不同程度地提高機體內(nèi)SOD的活性，減少超氧陰離子自由基對機體的損傷（武晉孝，2003）。本研究與此相似，說明復(fù)方中草藥制劑能夠刺激貴賓犬體內(nèi)的SOD活性，提高貴賓犬的免疫力和抗病能力。

表4 復(fù)方中草藥對貴賓犬免疫指標(biāo)的影響

3.3 復(fù)方中草藥制劑對血清免疫球蛋白水平的影響 免疫球蛋白主要存在于血清中，是體液免疫應(yīng)答中最主要的免疫分子。研究表明，中草藥飼料添加劑可以提高仔豬血清中免疫球蛋白的水平（李玉，2011；馬玉芳，2009）。這些研究結(jié)果與本試驗結(jié)果一致，復(fù)方中草藥制劑能夠顯著提高血清中IgG、IgA的水平，血清IgM的水平有增高的趨勢。本試驗為提高寵物犬免疫球蛋白含量提供了新思路。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，在幼齡貴賓犬日糧中添加復(fù)方中草藥制劑，可以提高其生長性能和免疫功能，并且復(fù)方中草藥制劑的適宜添加量為1.0%。