魏寧 丁小明 卓國(guó)榮 張步彩 李巨銀 胡新崗

摘要：為研究中藥制對(duì)雞胚人工感染犬傳染性肝炎病毒的防治效果，試驗(yàn)用雞胚成活率作為評(píng)價(jià)藥物預(yù)防效果指數(shù)。結(jié)果表明，中藥制劑具有防治雞胚感染犬傳染性肝炎病毒效果。

關(guān)鍵詞：中藥制劑;犬傳染性肝炎;防治效果;研究

中圖分類號(hào)：S858.292 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.20.002

0 引言

犬傳染性肝炎是由犬腺病毒引起的一種急性、敗血性傳染病。該病以循環(huán)障礙、肝小葉中心壞死、肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)包涵體為特征。主要癥狀有精神沉郁，食欲不振，喜歡飲水。在急性癥狀消失后7～10d，約有60%的康復(fù)犬一側(cè)或雙側(cè)眼發(fā)生暫時(shí)性淡藍(lán)色角膜渾濁（眼色素層炎），俗稱“藍(lán)眼病”。我國(guó)中藥資源豐富，臨床上使用已有數(shù)千年的歷史，而且中藥治療可以起到標(biāo)本兼治的作用，因此開(kāi)發(fā)能有效治療犬傳染性肝炎的中藥組合物是解決該病的有效途徑之一。試驗(yàn)擬用由旱蓮花等四味中草藥組成的復(fù)方制劑進(jìn)行體外試驗(yàn)效果研究，以期為今后中藥復(fù)合物防治犬傳染性肝炎臨床試驗(yàn)提供選擇和參考。

1 材料

1.1 試驗(yàn)藥物

旱蓮花、槐栓菌、路邊青、青刺尖，購(gòu)自泰州宏泰衛(wèi)生物資公司。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

10日齡SPF雞胚，36枚，分2批購(gòu)自南京藥械所。其中12枚用于中藥復(fù)合物毒性試驗(yàn)，24枚用于分組測(cè)定試驗(yàn)。犬肝炎病毒毒株由軍事獸醫(yī)研究所提供。

2 方法

2.1 中藥制劑制備

將旱蓮花17～20重量份，槐栓菌8～10重量份，路邊青9～11重量份，青刺尖11～13重量份混合加水浸泡，煮沸，過(guò)濾，濾渣再加水煮沸，過(guò)濾，兩次濾液合并后濃縮至稠狀，加乙醇調(diào)至乙醇濃度60%～70%，充分?jǐn)噭蚶洳爻恋?，過(guò)濾，濾液回收乙醇，回收乙醇后的藥液再加乙醇至乙醇75%～80%，攪勻，冷藏沉淀，過(guò)濾，濾液回收乙醇，再濃縮至無(wú)醇味，藥液加水冷藏沉淀，過(guò)濾，濾液濃縮得濃度為每mL含1.5g生藥量的藥液，調(diào)pH7.0，制成中藥制劑口服液，經(jīng)流通蒸氣滅菌備用。

2.2 犬肝炎最小致死量測(cè)定

經(jīng)病毒液稀釋并接種雞胚致死測(cè)定，犬肝炎病毒按1：10倍稀釋即達(dá)到最小致死量。

2.3 分組

2.3.1 中藥制劑毒性試驗(yàn)

將中藥制劑口服液原液與生理鹽水按1：1、1：2、1：4進(jìn)行稀釋，并分別接種于3只10日齡雞胚的尿囊腔中，每只0.2mL，置37.8℃溫箱孵育72h，每天觀察存活情況，雞胚全部存活的最高藥液濃度為正式實(shí)驗(yàn)起始濃度。

2.3.2藥物作用試驗(yàn)

試驗(yàn)分組見(jiàn)表1。

3 結(jié)果與分析

3.1 中藥制劑毒性試驗(yàn)結(jié)果

中藥制劑稀釋液及原液在72h內(nèi)對(duì)所有雞胚不具有致死性，雞胚全部存活。見(jiàn)表2。

3.2 藥物作用結(jié)果

中藥制劑在72h內(nèi)具有作用顯著保護(hù)犬感染犬傳染性肝炎病毒的作用;在保護(hù)雞胚成活率方面，中藥制劑組能顯著提高雞胚感染犬傳染性肝炎病毒成活率。見(jiàn)表3。

4 討論

治療方面，臨床上常采用注射犬傳染性肝炎高免血清或免疫血漿或使用干擾素、阿昔洛韋、三氮唑核苷、聚肌胞等抗病毒藥物對(duì)犬傳染性肝炎進(jìn)行治療，同時(shí)需輔以保肝利膽等對(duì)癥治療的方法。科研人員一直在研究安全、有效的防治犬傳染性肝炎藥物。中藥的耐藥性低，不良反應(yīng)小，藥物殘留低等特點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物疫病防控。聶玉梅[1]用龍膽瀉肝湯，即炙甘草、桅子、黃芩、車(chē)前、柴胡等加水煎煮給病犬灌服治療。盧勁嘩[2]等用大黃、茵陳、桅子、穿心蓮等混合均勻制成藥粉灌服。秦澤武[3]等用普濟(jì)消毒飲，即板藍(lán)根、黃芩、黃連、陳皮、甘草等煎汁灌服治療等。

試驗(yàn)選擇旱蓮花、槐栓菌、路邊青、青刺尖作為復(fù)方，主要是依據(jù)中藥配伍“君-臣-佐-使”原則。旱蓮花，為君藥，槐栓菌為臣藥，路邊青為佐藥，青刺尖為使藥;其中旱蓮花，性辛、涼，具有清熱解毒，涼血止血，主治口赤腫痛，瘡癤，吐血，咯血;槐栓菌，性辛、平，具有止血，止痢，抗癌，主治便血，痢疾，肝癌，肝炎，還有提高機(jī)體免疫功能的作用;路邊青，性苦、辛，微寒，具有健脾利濕，解毒止血，主治小兒疳積，腹瀉，痢疾，蛇咬傷，外傷出血;青刺尖，性微寒，味苦，具有清熱解毒，活血散瘀，主治乳癰，貧血，痄腮，瘰疬，跌打損傷。4種藥物配伍，達(dá)到標(biāo)本兼治的效果。

5 結(jié)論

中藥制劑與阿德福韋酯都具有防治犬傳染性肝炎效果。其中中藥制劑組防治犬傳染性肝炎效果率高于阿德福韋酯組，并可作為今后藥物預(yù)防犬傳染性肝炎病試驗(yàn)的選擇和參考。

參考文獻(xiàn)

[1]聶玉梅.犬傳染性肝炎的臨床診斷和中西醫(yī)防治[J].現(xiàn)代畜牧科技，2016（7）：132.

[2]盧勁曄，王玉倩，顧蓓蓓.犬傳染性肝炎的診斷與防治[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊，2017（21）：44-45.

[3]秦澤武，周會(huì)梅，蒲大章.中西結(jié)合治療犬傳染性肝炎的體會(huì)[J].中獸醫(yī)學(xué)雜志，2015（8）：37.

基金項(xiàng)目：江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院教育教學(xué)研究課題（JYYJ201901）

作者簡(jiǎn)介：魏寧（1978-），男，漢族，副教授，本科，從事獸醫(yī)教學(xué)、畜禽疫病防治研究工作。