郭浚 曹玉剛

[摘要]目的 探討血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）在原發(fā)性肝癌中的診斷價(jià)值。方法 選取我院收治的原發(fā)性肝癌病人72例，以肝硬化病人70例和健康志愿者70例作為對(duì)照，檢測(cè)各組血清GPC3水平。結(jié)果 原發(fā)性肝癌組血清GPC3水平明顯高于肝硬化組和健康對(duì)照組，肝硬化組血清GPC3水平明顯高于對(duì)照組（F=105.647，P<0.05）;腫瘤長(zhǎng)徑>5 cm病人血清GPC3水平明顯高于腫瘤≤5 cm者（t=-2.771，P<0.05）;中低分化病人血清GPC3水平明顯高于高分化者（t=-2.276，P<0.05）。血清GPC3水平診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線下面積為0.882，截?cái)嘀禐?00 ng/L時(shí)，其原發(fā)性肝癌診斷靈敏度和特異度分別為81.40%和86.43%。結(jié)論 血清GPC3可用于原發(fā)性肝癌的診斷。

[關(guān)鍵詞]磷脂酰肌醇蛋白聚糖類(lèi);肝腫瘤;血清;診斷

[中圖分類(lèi)號(hào)]R735.7

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

[文章編號(hào)] 2096-5532（2019）05-0611-03

doi：10.11712/jms201905026

[開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）]

流行病學(xué)研究顯示，原發(fā)性肝癌的發(fā)病率和病死率均顯著上升[1-2]。疾病的早期診斷對(duì)于改善肝癌病人的臨床結(jié)局尤為重要。血清標(biāo)志物檢測(cè)在惡性腫瘤早期篩查中的價(jià)值已獲共識(shí)。近年研究顯示，磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）能夠影響癌細(xì)胞間連接蛋白的合成，降低癌細(xì)胞間的黏附能力，為癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移提供前提[3-4]，在促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖等方面發(fā)揮作用[5-6]。有研究認(rèn)為，高表達(dá)的GPC3是促進(jìn)肝癌病情進(jìn)展的重要因素，但尚未見(jiàn)其對(duì)肝癌診斷學(xué)價(jià)值的分析。本研究通過(guò)對(duì)原發(fā)性肝癌病人血清GPC3水進(jìn)行檢測(cè)，探討其與肝癌臨床病理特征的關(guān)系及其在原發(fā)性肝癌診斷中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用回顧性研究方法，選取2016年2月—2017年5月在我院治療的原發(fā)性肝癌（C組）病人72例，納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)病理組織學(xué)診斷;②研究前未進(jìn)行放療、化療等治療;③臨床資料保存完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不完整;②合并有其他原發(fā)性惡性腫瘤者。同時(shí)選取肝硬化（B組）病人70例、健康志愿者（A組）70例作為對(duì)照。3組受試者性別、年齡等

一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表1。

1.2 血清GPC3檢測(cè)方法

采集各組受試者肘部靜脈血3 mL，加入抗凝劑2 mL，1 000 r/min離心5 min，采用生物酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法檢測(cè)血清GPC3水平。GPC3檢測(cè)試劑盒購(gòu)自羅氏生物檢測(cè)應(yīng)用公司，配套試劑及儀器購(gòu)自南京伯斯金生物科技有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料結(jié)果采用[AKx-D]±s表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn);兩組間比較采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料比較使用χ2檢驗(yàn);診斷價(jià)值采用ROC曲線進(jìn)行分析。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清GPC3水平比較

原發(fā)性肝癌組、肝硬化組、對(duì)照組血清GPC3水平分別為（189.06±48.22）、（70.41±20.03）、（5.01±1.03）ng/L，原發(fā)性肝癌組明顯高于肝硬化組和對(duì)照組，肝硬化組明顯高于對(duì)照組，差異有顯著性（F=105.647，P<0.05）。

2.2 血清GPC3水平與原發(fā)性肝癌臨床病理特征關(guān)系

血清GPC3水平與原發(fā)性肝癌腫瘤大小、分化程度有關(guān)（t=-2.771、-2.276，P<0.05），與病人年齡、性別、TNM分期、HBsAg陽(yáng)性、包膜、微血管侵犯和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)（P>0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 血清GPC3水平診斷原發(fā)性肝癌的價(jià)值

血清GPC3水平診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線下面積為0.882，截?cái)嘀禐?00 ng/L時(shí)，其診斷靈敏度和特異度分別為81.40%和86.43%。見(jiàn)圖1。

3 討論

原發(fā)性肝癌容易早期發(fā)生淋巴結(jié)或者血行轉(zhuǎn)移，病情進(jìn)展較為隱匿。長(zhǎng)期臨床隨訪研究發(fā)現(xiàn)，中晚期肝癌占到了肝癌發(fā)病人群的25%以上，多數(shù)原發(fā)性肝癌臨床確診時(shí)已處于疾病的中晚期，失去了手術(shù)機(jī)會(huì)[7]?，F(xiàn)階段臨床上肝癌的總體診斷水平仍然較低，一項(xiàng)匯集了115例病人的臨床回顧性分析的結(jié)果顯示，原發(fā)性肝癌的早期診斷靈敏度不足35%，診斷的一致性較差，漏診率較高[8]，導(dǎo)致高危人群的篩查效果明顯下降。人甲胎蛋白（AFP）為肝癌診斷的主要特異性參考指標(biāo)，其在肝癌的篩查過(guò)程中具有重要的參考價(jià)值，但AFP在肝硬化或者重度肝炎等疾病也存在一定程度的異常表達(dá)，其診斷原發(fā)性肝癌的特異度較低，檢查的穩(wěn)定程度較低。

GPC3主要影響細(xì)胞間的蛋白連接，其表達(dá)水平的改變能夠干預(yù)錨合蛋白、成纖維蛋白等細(xì)胞間質(zhì)成分的表達(dá)，加劇癌細(xì)胞間黏附能力的下降，促進(jìn)癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[9-10]。GPC3結(jié)構(gòu)上包含了多個(gè)磷酸基團(tuán)結(jié)構(gòu)，其能夠在結(jié)合肝癌上皮細(xì)胞膜糖蛋白配體的基礎(chǔ)上，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路或者第二信使等因子的改變，增加細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的異常，增加癌細(xì)胞DNA異常擴(kuò)增的風(fēng)險(xiǎn)，促進(jìn)癌細(xì)胞對(duì)靜脈血竇內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，增加癌細(xì)胞通過(guò)血行轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)[11]。同時(shí)，GPC3能夠影響癌細(xì)胞的生物學(xué)特征，增加癌細(xì)胞的凋亡抑制，增加癌細(xì)胞對(duì)于鄰近正常組織的浸潤(rùn)，導(dǎo)致臨床分期的進(jìn)展[12]。

本文研究結(jié)果顯示，肝癌病人血清中GPC3濃度較健康對(duì)照組明顯上升，提示GPC3可能參與到了原發(fā)性肝癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，GPC3的高表達(dá)能夠通過(guò)影響肝癌細(xì)胞內(nèi)的NOTCH信號(hào)通路或者AKT信號(hào)通路的激活，促進(jìn)癌細(xì)胞DNA基因的高轉(zhuǎn)錄，最終促進(jìn)腫瘤浸潤(rùn)病灶范圍的增大。同時(shí)，過(guò)度表達(dá)的GPC3能夠增強(qiáng)局部癌細(xì)胞氧化應(yīng)激反應(yīng)，維持腫瘤干細(xì)胞的活性。已有研究結(jié)果顯示，肝癌病人血清及病灶組織中的GPC3濃度平均上升25%～55%，并且病人的臨床分期進(jìn)展越快，癌細(xì)胞的分化程度越低，其GPC3蛋白的異常表達(dá)越為明顯[13-14]。但本文研究并未發(fā)現(xiàn)GPC3的異常表達(dá)與肝癌病人臨床分期有關(guān)，考慮可能與檢測(cè)方法、肝癌病人并發(fā)癥及GPC3表達(dá)的個(gè)體化差異等有關(guān)。本文研究結(jié)果顯示，病灶組織的范圍越大、癌細(xì)胞的分化程度越差，血清中GPC3的水平越高，提示GPC3能夠影響肝癌病人臨床病理特征的進(jìn)展。本次研究并未發(fā)現(xiàn)GPC3表達(dá)與微血管侵犯和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示GPC3并不會(huì)增加肝癌病人癌細(xì)胞對(duì)于血管內(nèi)皮或者淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的黏附能力。本文研究結(jié)果還顯示，血清GPC3水平>200 ng/L時(shí)，其診斷肝癌的靈敏度和特異度均超過(guò)80%，提示通過(guò)隨訪病人血清GPC3水平可能為臨床上肝癌病情的判斷提供參考。

綜上所述，血清GPC3可能用于原發(fā)性肝癌的診斷。

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（本文編輯 黃建鄉(xiāng)）